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다중 플라스미드 이용 co-transformation 기법을 이용한 심비디움 형질 전환 식물체 생산

  • 기술번호 : KST2014057380
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 유전자총을 이용한 심비디움 형질전환에서 심비디움 원괴체에 co-transformation 방법으로 다중 plasmid를 형질전환 시킨 후, 동시에 다양한 유전자를 가지는 형질전환 개체생산 또는 선발과정에서 항생제나 제초제 저항성 등의 선발유전자가 제거된 형질전환 심비디움 식물체 생산에 관한 것이다.본 발명의 목적은 유전자총을 이용한 형질전환 심비디움 식물체 생산에 있어서 향후 co-transformation을 이용한 마커-프리 식물체 개발 및 복합유전자 형질전환에 사용할 수 있는 유전자총 이용 심비디움 형질전환 시스템 개발에 관한 방법을 제공하는 것이다. 상세하게는 다양한 플라스미드를 유전자 총 형질전환에 이용되는 gold-particle 제조 시 일정 농도로 혼합 후, 심비디움 원괴체에 형질전환시켜 동시에 여러 유전자가 들어가는 빈도를 높여 다양한 유전자가 들어간 형질전환 심비디움 식물체를 생산하는 방법을 제공하고, 이를 기반으로 마커-프리 형질전환 심비디움 식물체 개발에 기여하는데 그 목적이 있다.상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 유전자총을 이용한 심비디움 형질전환에 있어서 유전자 코팅 시 2종류 플라스미드를 적절히 혼합하여 여러 유전자가 들어간 형질전환 심비디움 식물체가 생산되는 방법을 제공한다. 이러한 목적을 달성하기 위하여 2종류 플라스미드를 여러 비율로 나누어 혼합 후, 유전자총 실험을 수행하여 최적의 혼합농도를 규명하는 단계로 이루어진 것에 특징이 있다.본 발명의 효과는 심비디움 원괴체를 절편체로 하여 유전자총을 이용한 형질전환 시 2가지 플라스미드를 적절한 비율로 혼합하여 심비디움 우량 계통에 여러 유전자를 동시에 도입할 수 있는 체계를 확립하는데 기여할 수 있으며, 이러한 방법들은 향후 심비디움 외에 호접란, 카틀레야 및 온시디움 등의 다른 난과 식물들의 형질전환에 있어서 마커-프리 형질전환체 생산 및 복합 유전자 형질전환 등의 분야에 기여할 수 있을 것이다.[색인어]심비디움, 유전자총, 원괴체, 형질전환,
Int. CL C12N 15/89 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01) C12N 15/87 (2006.01) A01H 5/00 (2006.01)
CPC C12N 15/8207(2013.01) C12N 15/8207(2013.01) C12N 15/8207(2013.01)
출원번호/일자 1020100120455 (2010.11.30)
출원인 건국대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1272301-0000 (2013.05.31)
공개번호/일자 10-2012-0058926 (2012.06.08) 문서열기
공고번호/일자 (20130610) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2010.11.30)
심사청구항수 1

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 건국대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 광진구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김종보 대한민국 충북 충주시
2 김미선 대한민국 경기도 수원시 권선구
3 예병우 대한민국 경기도 수원시 권선구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 수 대한민국 서울특별시 강남구 강남대로**길 **, *층(역삼동, 케이앤와이빌딩)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 대한민국(관리청: 특허청장, 승계청: 농촌진흥청장)
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2010.11.30 수리 (Accepted) 1-1-2010-5039344-69
2 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2010.12.31 수리 (Accepted) 1-1-2010-0879658-20
3 [출원인변경]권리관계변경신고서
[Change of Applicant] Report on Change of Proprietary Status
2010.12.31 수리 (Accepted) 1-1-2010-0879686-09
4 [전자문서첨부서류]전자문서첨부서류등 물건제출서
[Attachment to Electronic Document] Submission of Object such as Attachment to Electronic Document
2010.12.31 수리 (Accepted) 1-1-2011-5000125-10
5 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2011.07.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
6 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2011.08.12 수리 (Accepted) 9-1-2011-0067221-13
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2012.06.01 수리 (Accepted) 4-1-2012-5116974-69
8 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2012.07.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0438906-09
9 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2012.09.26 수리 (Accepted) 1-1-2012-0782572-20
10 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2012.10.29 수리 (Accepted) 1-1-2012-0882871-90
11 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2012.11.29 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2012-0990335-95
12 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2012.11.29 수리 (Accepted) 1-1-2012-0990336-30
13 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)
2013.02.27 불수리 (Non-acceptance) 1-1-2013-0173988-26
14 서류반려이유통지서
Notice of Reason for Return of Document
2013.03.11 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2013-0025843-26
15 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)
2013.03.12 수리 (Accepted) 1-1-2013-0213966-50
16 서류반려통지서
Notice for Return of Document
2013.03.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2013-0031121-77
17 등록결정서
Decision to grant
2013.05.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0376584-92
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
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유전자 총을 이용한 제초제 저항성 마커 프리 심비디움 형질전환 방법에 있어서, 리포터 유전자로 GUS유전자 및 형질전환 식물체를 선발하기 위하여 PPT (phosphinotricin) 저항성 유전자가 선발마커 유전자로 포함된 첫 번째 pCAMBIA3301 벡터 및 pCAMBIA3301 벡터에서 GUS 유전자 부분을 제거하고 ORE7 유전자가 목적 유용유전자로 삽입되고, 형질전환 선발약제로서 상기 첫 번째 벡터와 동일하게 PPT 저항성 유전자가 포함된 두 번째 벡터를 심비디움 원괴체에 유전자 총을 이용하여 형질전환하며, 이때 상기 두 종류의 벡터를 50:50의 비율로 혼합하고, 상기 유전자 총 사용조건은 정지판에서 목적 조직까지의 거리 6cm, 헬륨가스 압력 1,350 psi, 진공압력 28 inch Hg에서 수행하고, phosphinotricin를 10mg/l을 첨가하여 형질전환체를 선발하는 단계를 포함하는 유전자 총을 이용한 제초제 저항성 마커 프리 심비디움 형질전환 방법
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패밀리정보가 없습니다
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1 농촌진흥청 건국대학교 충주산학협력단 공동연구사업 분자육종기술을 이용한 내환경복합저항성 양란 품종 육성