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생체 고분자 물질의 상호작용 검출 방법

  • 기술번호 : KST2014066504
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 새로운 생체 고분자 물질의 상호작용 검출 방법에 관한 것으로서 보다 상세하게는 (a) (i) 목적물질(bait), 제1표지물질 및 단백질 인산화효소 C(protein kinase C) 또는 이의 C1 도메인을 포함하는 변이체인 이동모듈을 포함하는 제1구성물; 및 (ii) 표적물질(prey) 및 제2표지물질을 포함하는 제2구성물;을 포함하는 세포를 제조하는 단계; 및 (b) 제1구성물 및 제2구성물의 세포내 분포를 검출하는 단계를 포함하는 목적물질(bait)과 표적물질(prey)의 상호작용을 검출하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 세포내에서 일어나는 물질결합(binding) 및 상호작용(interaction)을 살아있는 세포에서 실시간으로 검출할 수 있는 방법 및 이를 이용한 물질결합 및 상호작용을 변화시키는 물질의 스크리닝 방법을 제공한다. 본 발명의 방법은 기존의 생체물질 상호작용 탐색 방법들이 가지는 부정확성 및 복잡성 등의 단점을 극복하였고, 구성물 모두에 표지를 함으로써 정확도를 더욱 높일 수 있어 종래의 분석기술과 차별화되는 새로운 실시간 무항체 분석 방법을 제공하는 효과가 있다. 상호작용, 검출, 단백질-단백질, 스크리닝
Int. CL G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/48 (2006.01)
CPC G01N 33/6845(2013.01) G01N 33/6845(2013.01) G01N 33/6845(2013.01)
출원번호/일자 1020080112354 (2008.11.12)
출원인 한국기초과학지원연구원
등록번호/일자 10-0948767-0000 (2010.03.12)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20100323) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2009.08.20)
심사청구항수 19

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국기초과학지원연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이지원 대한민국 대전광역시 유성구
2 김수현 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이희숙 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 **길 ** *층 (역삼동, JS빌딩)(시원국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 이지원 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2008.11.12 수리 (Accepted) 1-1-2008-0783013-71
2 보정요구서
Request for Amendment
2008.11.14 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2008-0126606-41
3 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2008.11.19 수리 (Accepted) 1-1-2008-0797856-15
4 [대리인사임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Resignation of Agent] Report on Agent (Representative)
2009.06.18 수리 (Accepted) 1-1-2009-0369499-70
5 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)
2009.08.20 수리 (Accepted) 1-1-2009-0509179-15
6 [우선심사신청]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Preferential Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)
2009.08.24 수리 (Accepted) 1-1-2009-0514911-59
7 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2009.09.04 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
8 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2009.09.21 수리 (Accepted) 9-1-2009-0053181-43
9 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2009.11.02 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2009-0454019-08
10 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2010.01.04 수리 (Accepted) 1-1-2010-0002274-77
11 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2010.01.04 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2010-0002272-86
12 등록결정서
Decision to grant
2010.03.11 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2010-0105919-02
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2011.10.21 수리 (Accepted) 4-1-2011-5212108-42
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2012.08.31 수리 (Accepted) 4-1-2012-5184331-50
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2012.08.31 수리 (Accepted) 4-1-2012-5184293-13
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2013.04.15 수리 (Accepted) 4-1-2013-5058386-17
17 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2013.04.15 수리 (Accepted) 4-1-2013-5058545-81
18 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.06.22 수리 (Accepted) 4-1-2020-5135881-88
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
하기 단계를 포함하는 목적물질(bait)과 표적물질(prey)의 상호작용을 검출하는 방법; (a) (i) 목적물질(bait), 제1표지물질 및 단백질 인산화효소 C(protein kinase C) 또는 이의 C1 도메인을 포함하는 변이체인 이동모듈을 포함하는 제1구성물; 및 (ii) 표적물질(prey) 및 제2표지물질을 포함하는 제2구성물;을 포함하는 세포를 제조하는 단계; 및 (b) 제1구성물 및 제2구성물의 세포내 분포를 검출하는 단계
2 2
제1항에 있어서, 하기 단계를 포함하는 목적물질(bait)과 표적물질(prey)의 상호작용을 검출하는 방법; (a) (i) 목적물질(bait), 제1표지물질 및 단백질 인산화효소 C(protein kinase C) 또는 이의 C1 도메인을 포함하는 변이체인 이동모듈을 포함하는 제1구성물; 및 (ii) 표적물질(prey) 및 제2표지물질을 포함하는 제2구성물;을 포함하는 세포를 제조하는 단계; (b) 신호물질을 처리하는 단계; 및 (c) 제1구성물 및 제2구성물의 세포내 분포를 검출하는 단계
3 3
삭제
4 4
제1항 또는 제2항에 있어서, 단백질 인산화효소 C 및 이의 C1 도메인을 포함하는 변이체는 서열번호 1, 서열번호 3, 서열번호 5 및 서열번호 7로 이루어진 군에서 선택된 아미노산 서열을 가지는 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 제1표지물질은 GFP(Green Fluorescent Protein), EGFP(Enhanced Green Fluorescent Protein), RFP(Red Fluorescent Protein), mRFP(Monomeric Red Fluorescent Protein), DsRed(Discosoma sp
6 6
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 제2표지물질은 GFP(Green Fluorescent Protein), EGFP(Enhanced Green Fluorescent Protein), RFP(Red Fluorescent Protein), mRFP(Monomeric Red Fluorescent Protein), DsRed(Discosoma sp
7 7
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 제1구성물은 NLS(nuclear localization signal) 서열 또는 NES(nuclear export signal) 서열을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
8 8
제7항에 있어서, 상기 NLS 서열은 서열번호 17로 표시되는 아미노산 서열을 가지는 것을 특징으로 하는 방법
9 9
제7항에 있어서, 상기 NES 서열은 서열번호 19로 표시되는 아미노산 서열을 가지는 것을 특징으로 하는 방법
10 10
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 제2구성물은 NLS(nuclear localization signal) 서열 또는 NES(nuclear export signal) 서열을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
11 11
하기 단계를 포함하는 목적물질(bait)과 표적물질(prey)의 상호작용을 검출하는 방법; (a) (i) 목적물질(bait), EGFP(Enhanced Green Fluorescent Protein) 또는 mRFP(Monomeric Red Fluorescent Protein)인 제1표지물질 및 서열번호 1, 서열번호 3, 서열번호 5 및 서열번호 7로 이루어진 군에서 선택된 아미노산 서열을 가지는 이동모듈을 포함하는 제1구성물; 및 (ii) 표적물질(prey) 및 EGFP(Enhanced Green Fluorescent Protein), mRFP(Monomeric Red Fluorescent Protein), AzG(Azami Green) 및 HcR(HcRed, Heteractis crispa red fluorescent protein)로 이루어진 군에서 선택된 제2표지물질을 포함하는 제2구성물;을 포함하는 세포를 제조하는 단계; (b) 신호물질을 처리하는 단계; 및 (c) 제1구성물 및 제2구성물의 세포내 분포를 검출하는 단계
12 12
제11항에 있어서, 상기 신호물질의 처리는 PMA(Phorbol 12-myristate 13-acetate, Phorbol ester)를 50nM 내지 5μM의 농도로 처리하는 것임을 특징으로 하는 방법
13 13
하기 단계를 포함하는 목적물질과 표적물질간의 상호작용을 변화시키는 물질을 스크리닝하는 방법
14 14
제13항에 있어서, 상기 상호작용의 변화는 상호작용의 저해 또는 증진인 것을 특징으로 하는 방법
15 15
제13항에 있어서, 신호물질을 처리하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
16 16
(i) 목적물질(bait), 제1표지물질 및 단백질 인산화효소 C(protein kinase C) 또는 이의 C1 도메인을 포함하는 변이체인 이동모듈을 포함하는 제1구성물; 및 (ii) 표적물질(prey) 및 제2표지물질을 포함하는 제2구성물을 포함하는 세포
17 17
제16항에 있어서, 상기 세포는 (i)프로모터 및 이와 작동가능하게 연결된 목적물질(bait), 제1표지물질 및 단백질 인산화효소 C(protein kinase C) 또는 이의 C1 도메인을 포함하는 변이체인 이동모듈을 암호화하는 뉴클레오티드를 포함하는 벡터 및 (ii) 프로모터 및 이와 작동가능하게 연결된 표적물질(prey) 및 제2표지물질을 암호화하는 뉴클레오티드를 포함하는 벡터로 형질전환된 것임을 특징으로 하는 세포
18 18
제16항에 있어서, 상기 세포는 (i) 프로모터 및 이와 작동가능하게 연결된 목적물질(bait), EGFP(Enhanced Green Fluorescent Protein) 또는 mRFP(Monomeric Red Fluorescent Protein)인 제1표지물질 및 서열번호 1, 서열번호 3, 서열번호 5 및 서열번호 7로 이루어진 군에서 선택된 아미노산 서열을 가지는 이동모듈을 암호화하는 뉴클레오티드를 포함하는 벡터 및 (ii) 프로모터 및 이와 작동가능하게 연결된 표적물질(prey) 및 EGFP(Enhanced Green Fluorescent Protein), mRFP(Monomeric Red Fluorescent Protein), AzG(Azami Green) 및 HcR(HcRed, Heteractis crispa red fluorescent protein)로 이루어진 군에서 선택된 제2표지물질을 암호화하는 뉴클레오티드를 포함하는 벡터로 공동 형질전환된 것임을 특징으로 하는 세포
19 19
제16항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포는 CHO-k1 세포, HEK293 세포, HeLa 세포, SH-SY5Y 세포, Swiss 3T3 세포, 3T3-L1 세포, NIH/3T3 세포, L-929 세포, Rat2 세포, RBL-2H3 세포 및 MDCK 세포로 이루어진 군에서 선택된 것임을 특징으로 하는 세포
20 20
제16항 내지 제18항 중 어느 한 항의 세포를 포함하는 목적물질과 표적물질의 상호작용 검출용 키트
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 EP02187213 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
2 EP02187213 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
3 JP05222813 JP 일본 FAMILY
4 JP22115192 JP 일본 FAMILY
5 US09193984 US 미국 FAMILY
6 US20100120066 US 미국 FAMILY
7 US20130130273 US 미국 FAMILY

DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 EP2187213 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
2 EP2187213 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
3 JP2010115192 JP 일본 DOCDBFAMILY
4 JP5222813 JP 일본 DOCDBFAMILY
5 US2010120066 US 미국 DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 한국기초과학지원연구원 자체연구사업, 대형 연구장비를 이용한 막단백질 분석기술 개발사업 세포내 단백질 상호작용 분석용 세포침 개발, 막단백질 in vitro 활성평가기술 개발