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효모를 이용하여 섬유소(cellulose) 자원으로부터 연료용 에탄올을 제조하는 방법에 있어서, 첫째, 상기 섬유소 자원을 증류수로 현탁시키고, 30분간 121℃ 15 psig의 증기압 하에서 1%의 약한 황산용액을 첨가처리하여 점도를 낮춤으로서 효소당화특성을 향상시키는 전처리 단계와, 둘째, 상기 섬유소 자원을 최종 수소이온 농도가 4-5가 될 때까지 증류수로세척한 후 상기 섬유소 자원에서 다량의 수분을 필터를 이용하여 제거하고, 60℃ 건조대에서 완전히 건조하는 세척 및 건조 단계와, 셋째, 상기 효모를 축적하기 위하여 포도당과 기타 영양소를 포함한 배지를 이용하여 효모를 접종한 반응기에서 약 50% 부피까지 회분식 배양을 한 후, 20%의 포도당과 상기 회분식 배양에서 사용한 반복합 최소배지 성분의 2배를 첨가한 액을 공급하여 유가식 배양을 하여 효모와 효소를 축적하는 단계와, 넷째, 상기한 효모의 증식과 효소의 추가적 축적이 종료되는 시기에 유가식 배양을 중지하고, 최적의 효소량을 위한 부족분을 상용효소를 첨가하여 보충하는 단계와, 다섯째, 기질인 상기 섬유소 자원을 최종농도가 100 g/L 이상이 되도록 상기 배지에 공급하여 동시당화발효공정을 수행하는 단계로 이루어진 것을 특징으로 하는 섬유소 가수분해능을 갖는 재조합 효모를 이용한 재생종이로부터 연료용 에탄올 제조방법
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