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a) 기판상에 GMBS(N-[γ-maleimidobutyryloxy]sulfosuccinimide ester)를 부착시키는 단계; b) 상기 GMBS가 부착된 기판에 단백질 키나아제(protein kinase)와 반응하는 기질을 부착시켜 단백질 키나아제 활성 측정용 키트를 제조하는 단계; c) 상기 키트에 분석대상 시료 및 트리톤 X-100(Triton X-100)을 포함하는 버퍼의 혼합물을 도입하는 단계; 및 d) 상기 시료에 포함된 단백질 키나아제에 의한 상기 기질의 인산화 반응을 탐침하여, 단백질 키나아제의 활성을 측정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 단백질 키나아제 활성 측정 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 기판은, 유리 슬라이드를 3-아미노프로필트리메톡실란(3-aminopropyltrimethoxiysilane)을 포함하는 에탄올 용액에 침지한 후 소성하여 제조되는 아민-개질된(amine-modified) 유리 슬라이드인, 단백질 키나아제 활성 측정 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 기판은, 아민-개질된(amine-modified) 유리 슬라이드에 PDMS(폴리 (디메틸 실록산); Poly(dimethylsiloxane)) 가스켓을 장착하여 제조되는 것인, 단백질 키나아제 활성 측정 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 단백질 키나아제(protein kinase)와 반응하는 기질은, 켐타이드(kemptide), RelA (NF-kappa-B p65 subunit), RhoA (ras homolog gene family, member A; Rho family GTPase) 및 CREB(cAMP response element-binding protein) 중 하나 이상인, 단백질 키나아제 활성 측정 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 단백질 키나아제(protein kinase)와 반응하는 기질은, 0
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청구항 1에 있어서, 상기 버퍼는, MgCl2 및 ATP를 추가로 포함하는 것인, 단백질 키나아제 활성 측정 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 버퍼는, 0
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청구항 1에 있어서, 상기 d) 단계는 상기 키트에 프로-Q 다이아몬드 염색제(pro-Q diamond stain)를 도입하여, 상기 시료에 포함된 단백질 키나아제에 의해 인산화된, 상기 기질의 세린 잔기를 탐침하는 단계인, 단백질 키나아제 활성 측정 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 인산화 반응은, 인산화기를 인식하는 항체, 인산화기를 인식하는 화학물질 및 발광법 중 어느 하나에 의해 탐침되는 것을 특징으로 하는, 단백질 키나아제 활성 측정 방법
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10
청구항 1에 있어서, 상기 인산화 반응은, ELISA, 웨스턴 블롯, 유세포 분석법, 면역형광법, 면역조직화학법 및 질량 분광법 중 어느 하나에 의해 탐침되는 것을 특징으로 하는, 단백질 키나아제 활성 측정 방법
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11
청구항 1 내지 10 중 어느 한 항의 단백질 키나아제 활성 측정 방법에 사용하기 위한, 단백질 키나아제 활성 측정용 키트로, 기판; 단백질 키나아제(protein kinase)와 반응하는 기질; 및 상기 기판과 상기 단백질 키나아제를 연결하는 링커인 GMBS(N-[γ-maleimidobutyryloxy]sulfosuccinimide ester)를 포함하는, 키트
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청구항 11의 단백질 키나아제 활성 측정용 키트를 제조하는 방법으로, 기판상에 GMBS(N-[γ-maleimidobutyryloxy]sulfosuccinimide ester)를 부착시키는 단계; 및상기 GMBS가 부착된 기판에 단백질 키나아제(protein kinase)와 반응하는 기질을 부착시키는 단계를 포함하는, 방법
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