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다음의 단계를 포함하는 시냅스 소낭(synaptic vesicle)과 시냅스 전막(presynaptic membrane) 사이의 막 융합 억제제의 스크리닝 방법:(a) 포유동물로부터 분리된 세포로부터 얻은 시냅스 v-SNARE 단백질(synaptic vesicle-SNARE)을 코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 벡터로 형질전환되고, nyv1과 snc2를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드가 결실된 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)로부터 시냅스 v-SNARE 단백질인 시냅토브레빈(Synaptobrevin)이 발현된 하나 이상의 제1효모 액포를 얻고, 포유동물로부터 분리된 세포로부터 얻은 시냅스 t-SNARE 단백질(synaptic target-SNARE)을 코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 벡터로 형질전환되고, nyv1을 코딩하는 폴리뉴클레오타이드가 결실된 사카로마이세스 세레비시애로부터 시냅스 t-SNARE 단백질인 신택신(Syntaxin)과 스냅-25(Synaptosomal-associated protein 25)가 발현된 하나 이상의 제2효모 액포를 얻는 단계로서, 상기 제1효모 액포 및 제2효모 액포는 상기 v-SNARE 단백질과 t-SNARE 단백질간의 SNARE 복합체(SNARE complex) 형성에 의해서만 액포막을 서로 융합할 수 있으며;(b) 상기 제1효모 액포, 제2효모 액포 또는 상기 제1효모 액포와 제2효모 액포에 시험물질을 처리하는 단계; 및(c) 상기 시험물질이 처리된 액포들간의 막 융합 여부를 분석하는 단계로서, 상기 시험물질이 상기 액포들간의 막 융합을 저해시키면 시냅스 소낭과 시냅스 전막 사이의 막 융합에 대한 억제제로 판단한다
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제 1 항에 있어서, 상기 시냅토브레빈은 시냅토브레빈 1(Synaptobrevin 1) 또는 시냅토브레빈 2(Synaptobrevin 2)인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 신택신은 신택신1A, 신택신1B, 신택신2, 신택신3, 신택신4, 신택신5, 신택신6, 신택신7, 신택신8, 신택신10, 신택신11, 신택신12, 신택신16, 신택신17, 신택신18 및 신택신19로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 SNARE 복합체 형성에 의한 액포막 융합은 시냅토브레빈 2의 세포질 도메인(cytoplasmic domain)에 의해 억제되는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 포유동물은 인간, 마우스, 래트, 토끼, 원숭이, 돼지, 말, 소, 양, 영양, 개 또는 고양이인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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다음을 포함하는 시냅스 소낭(synaptic vesicle)과 시냅스 전막(presynaptic membrane) 사이의 막 융합 억제제 스크리닝용 조성물:(1) 포유동물의 시냅스 v-SNARE 단백질(synaptic vesicle-SNARE)인 시냅토브레빈(Synaptobrevin)을 발현하고, nyv1과 snc2를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드가 결실된 제1효모, 또는 이로부터 분리된 하나 이상의 제1액포; 및(2) 포유동물의 시냅스 t-SNARE 단백질(synaptic target-SNARE)인 신택신(Syntaxin)과 스냅-25(Synaptosomal-associated protein 25)를 발현하고, nyv1을 코딩하는 폴리뉴클레오타이드가 결실된 제2효모, 또는 이로부터 분리된 하나 이상의 제2액포, 여기서 상기 제1효모 및 제2효모는 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)이고, 상기 제1액포 및 제2액포는 상기 v-SNARE 단백질과 t-SNARE 단백질간의 SNARE 복합체(SNARE complex) 형성에 의해서만 액포막을 서로 융합할 수 있다
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제 13 항에 있어서, 상기 제1효모는 PEP4 단백질 분해효소를 발현하나 상기 PEP4 단백질 분해효소에 의해 활성화되는 알카라인 포스파타아제는 발현하지 않으며, 상기 제2효모는 불활성화 상태의 알카라인 포스파타아제를 발현하나 상기 불활성화 상태의 알카라인 포스파타아제를 활성화 시키는 PEP4 단백질 분해효소는 발현하지 않는 것을 특징으로 하는 조성물
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