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수태능력 관련 단백질 마커를 이용한 동물의 산자수 예측 방법과 클로르테트라사이클린 염색법을 이용한 동물의 정액 품질 및 산자수의 예측 방법(Method of Predicting Animal Litter Size Using Protein Biomarkers Related with Fertility, and Method of Predicting Animal Sperm Quality and Litter Size Using Chlortetracycline Staining)

  • 기술번호 : KST2016011344
  • 담당센터 : 서울서부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-6124-6930
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 수태능력 관련 단백질 마커를 이용한 동물의 산자수 예측 방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 동물의 산자수 생산 능력에 따라 달리 발현되는 정자의 마커를 발굴하고, 상기 마커에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 산자수 예측용 마커 조성물 및 이를 이용하여 동물의 산자수를 예측하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한, 클로르테트라사이클린 염색법을 이용한 동물의 정액 품질 및 산자수의 예측 방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 정자의 운동성, 운동학 또는 수정능획득(capacitance) 상태를 측정하여 동물의 산자수를 예측하는 방법에 관한 것이다.본 발명에 따른 동물의 정자 유래 단백질 마커를 이용하여 산자수 생산 능력에 따라 달리 발현되는 단백질의 분석을 통해 개체의 산자수 생산 능력을 예측할 수 있으며, 클로르테트라사이클린 염색법을 이용한 동물 정액 품질 및 산자수의 예측 방법을 이용하여 정자의 수정능력 및 개체의 산자수 생산 능력을 예측할 수 있다. 따라서 본 발명은 상기 방법에서 제공되는 정보를 기반으로 정자의 수정능력이 높고, 산자수 생산 능력이 높은 우수 종을 선별하여 동물의 안정적 생산을 도모하는 데 매우 유용하게 사용할 수 있을 것이다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/532 (2006.01)
CPC G01N 33/532(2013.01) G01N 33/532(2013.01) G01N 33/532(2013.01)
출원번호/일자 1020140169854 (2014.12.01)
출원인 중앙대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2016-0066114 (2016.06.10) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2015.11.24)
심사청구항수 23

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 중앙대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 동작구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 방명걸 대한민국 서울특별시 양천구
2 권우성 대한민국 서울특별시 성북구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 장제환 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)
2 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 중앙대학교 산학협력단 서울특별시 동작구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2014.12.01 수리 (Accepted) 1-1-2014-1167114-22
2 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)
2015.11.24 수리 (Accepted) 1-1-2015-1148113-21
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2016.10.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2016.12.20 수리 (Accepted) 9-1-2016-0052743-66
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2017.01.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0071269-43
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2017.03.21 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2017-0279468-08
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2017.03.21 수리 (Accepted) 1-1-2017-0279469-43
8 등록결정서
Decision to grant
2017.07.11 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0484615-13
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.07.04 수리 (Accepted) 4-1-2018-5125629-51
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.07.29 수리 (Accepted) 4-1-2019-5151122-15
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.08.01 수리 (Accepted) 4-1-2019-5153932-16
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
L-아미노산 옥시다제(L-amino-acid oxidase, LAAO), MDH2(Mitochondrial malate dehydrogenase 2, NAD), 세포질 5’-뉴클레오티다제 1B(Cytosolic 5’-nucleotidase 1B, NT5C1B), 라이소자임-유사 단백질 4(Lysozyme-like protein 4, LYZL4), CALM(Calmodulin), EQTN(Equatorin), 스펌아드헤신 AWN(Spermadhesin AWN), TPI(Triosephosphate isomerase), RAB2A(Ras-related protein Rab-2A), 스펌아드헤신 AQN-3(Spermadhesin AQN-3) 및 NDUFS2(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 2)로 이루어진 군으로부터 선택된 동물의 정액에서 발현이 증가하는 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측용 마커
2 2
제1항에 있어서, 상기 동물은 소(bovine), 말(equine), 돼지(porcine), 양(ovine), 엘크(elk) 및 들소(bison)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측용 마커
3 3
L-아미노산 옥시다제(L-amino-acid oxidase, LAAO), MDH2(Mitochondrial malate dehydrogenase 2, NAD), 세포질 5’-뉴클레오티다제 1B(Cytosolic 5’-nucleotidase 1B, NT5C1B), 라이소자임-유사 단백질 4(Lysozyme-like protein 4, LYZL4), CALM(Calmodulin), EQTN(Equatorin), 스펌아드헤신 AWN(Spermadhesin AWN), TPI(Triosephosphate isomerase), RAB2A(Ras-related protein Rab-2A), 스펌아드헤신 AQN-3(Spermadhesin AQN-3) 및 NDUFS2(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 2)로 이루어진 군으로부터 하나 이상 선택된 마커에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하고, 상기 항체를 이용하여 정액 샘플에서의 상기 마커의 단백질 양을 측정하여,i) 상기 L-아미노산 옥시다제(L-amino-acid oxidase, LAAO), MDH2(Mitochondrial malate dehydrogenase 2, NAD), 세포질 5’-뉴클레오티다제 1B(Cytosolic 5’-nucleotidase 1B, NT5C1B), 라이소자임-유사 단백질 4(Lysozyme-like protein 4, LYZL4) 또는 CALM(Calmodulin) 마커의 양이 대조군보다 높을 경우에 고산자수 정자로 예측하고,ii) 상기 EQTN(Equatorin), 스펌아드헤신 AWN(Spermadhesin AWN), TPI(Triosephosphate isomerase), RAB2A(Ras-related protein Rab-2A), 스펌아드헤신 AQN-3(Spermadhesin AQN-3) 또는 NDUFS2(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 2) 마커의 양이 대조군보다 높을 경우에 저산자수 정자로 예측하는 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측용 조성물
4 4
제3항에 있어서, 상기 항체는 단일클로날 항체 또는 폴리클로날 항체인 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측용 조성물
5 5
제3항의 조성물을 포함하는 동물의 산자수 예측용 키트
6 6
제5항에 있어서, 기질과의 반응에 의하여 발색하는 표지체가 접합된 2차 항체 접합체; 상기 표지체와 발색 반응할 발색기질 용액; 세척액; 및, 효소반응 정지액을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측용 키트
7 7
제6항에 있어서, 상기 표지체는 HRP(horseradish peroxidase), 알칼리성 인산분해효소(alkaline phosphatase), 콜로이드 골드(colloid gold), 형광물질(fluorescein) 및 색소(dye)로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측용 키트
8 8
제6항에 있어서, 상기 발색기질은 TMB(3,3',5,5'-tetramethyl bezidine), ABTS[2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)] 및 OPD(o-phenylenediamine)로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측용 키트
9 9
(a) 항-L-아미노산 옥시다제(L-amino-acid oxidase, LAAO), 항-MDH2(Mitochondrial malate dehydrogenase 2, NAD), 항-세포질 5’-뉴클레오티다제 1B(Cytosolic 5’-nucleotidase 1B, NT5C1B), 항-라이소자임-유사 단백질 4(Lysozyme-like protein 4, LYZL4), 항-CALM(Calmodulin), 항-EQTN(Equatorin), 항-스펌아드헤신 AWN(Spermadhesin AWN), 항-TPI(Triosephosphate isomerase), 항-RAB2A(Ras-related protein Rab-2A), 항-스펌아드헤신 AQN-3(Spermadhesin AQN-3) 및 항-NDUFS2(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 2) 항체로 구성된 군에서 하나 이상 선택된 항체로 코팅시킨 고정체에 대상 시료를 가하여 항원-항체 반응시키는 단계;(b) 상기 (a) 단계를 통해 생성된 항원-항체 반응물을 표지체가 접합된 2차 항체 접합체 및 발색기질 용액을 이용하여 검출하는 단계; 및(c) 상기 검출된 L-아미노산 옥시다제(L-amino-acid oxidase, LAAO), MDH2(Mitochondrial malate dehydrogenase 2, NAD), 세포질 5’-뉴클레오티다제 1B(Cytosolic 5’-nucleotidase 1B, NT5C1B), 라이소자임-유사 단백질 4(Lysozyme-like protein 4, LYZL4), CALM(Calmodulin), EQTN(Equatorin), 스펌아드헤신 AWN(Spermadhesin AWN), TPI(Triosephosphate isomerase), RAB2A(Ras-related protein Rab-2A), 스펌아드헤신 AQN-3(Spermadhesin AQN-3) 또는 NDUFS2(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 2) 단백질의 수준을 고산자수 또는 저산자수를 가지는 동물 유래 정자의 상기 단백질의 양과 비교하여 산자수 예측을 위한 정보를 제공하는 단계;를 포함하는 동물의 산자수 예측용 마커 검출 방법
10 10
제9항에 있어서, 상기 고정체는 나이트로셀룰로오즈 막, PVDF 막, 폴리비닐(polyvinyl) 또는 폴리스티렌(polystyrene) 수지로 합성된 웰 플레이트 및 유리로 된 슬라이드 글래스로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측용 마커 검출 방법
11 11
제9항에 있어서, 상기 항원-항체 결합반응이 효소면역분석법(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA), 방사능면역분석법(radioimmnoassay, RIA), 샌드위치 측정법(sandwich assay), 웨스턴 블롯팅, 면역침강법, 면역조직화학염색법(immnohistochemical staining), 형광면역법, 효소기질발색법, 항원-항체 응집법으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측용 마커 검출 방법
12 12
제9항에 있어서, 상기 표지체는 HRP(horseradish peroxidase), 알칼리성 인산분해효소(alkaline phosphatase), 콜로이드 골드(colloid gold), 형광물질(fluorescein) 및 색소(dye)로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측용 마커 검출 방법
13 13
제9항에 있어서, 상기 발색기질은 TMB(3,3',5,5'-tetramethyl bezidine), ABTS[2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)] 및 OPD(o-phenylenediamine)로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측용 마커 검출 방법
14 14
L-아미노산 옥시다제(L-amino-acid oxidase, LAAO), MDH2(Mitochondrial malate dehydrogenase 2, NAD), 세포질 5’-뉴클레오티다제 1B(Cytosolic 5’-nucleotidase 1B, NT5C1B), 라이소자임-유사 단백질 4(Lysozyme-like protein 4, LYZL4), CALM(Calmodulin), EQTN(Equatorin), 스펌아드헤신 AWN(Spermadhesin AWN), TPI(Triosephosphate isomerase), RAB2A(Ras-related protein Rab-2A), 스펌아드헤신 AQN-3(Spermadhesin AQN-3) 및 NDUFS2(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 2)로 이루어진 군으로부터 하나 이상 선택된 마커를 암호화하는 유전자 또는 상기 유전자의 mRNA에 특이적으로 결합하는 프라이머 또는 프로브를 포함하고, 상기 프라이머 또는 프로브를 이용하여 동물 정액에서 상기 마커를 암호화하는 유전자 또는 상기 유전자의 mRNA의 양이 증가하는 것을 측정하는 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측용 조성물
15 15
제14항에 있어서, 상기 유전자 또는 상기 유전자의 mRNA와 엄격한 조건 하에서 혼성화할 수 있는 프로브인 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측용 조성물
16 16
제14항의 조성물을 포함하는 동물의 산자수 예측용 키트
17 17
제16항에 있어서, 상기 키트는 PCR 키트, RT-PCR 키트 또는 DNA 칩인 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측용 키트
18 18
(a) 동물에서 채취한 정자에서 L-아미노산 옥시다제(L-amino-acid oxidase, LAAO), MDH2(Mitochondrial malate dehydrogenase 2, NAD), 세포질 5’-뉴클레오티다제 1B(Cytosolic 5’-nucleotidase 1B, NT5C1B), 라이소자임-유사 단백질 4(Lysozyme-like protein 4, LYZL4), CALM(Calmodulin), EQTN(Equatorin), 스펌아드헤신 AWN(Spermadhesin AWN), TPI(Triosephosphate isomerase), RAB2A(Ras-related protein Rab-2A), 스펌아드헤신 AQN-3(Spermadhesin AQN-3) 및 NDUFS2(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 2)로 이루어진 군으로부터 하나 이상 선택된 동물의 산자수 예측용 마커의 mRNA 또는 단백질 수준을 측정하는 단계; 및(b) 상기 동물의 산자수 예측용 마커의 mRNA 또는 단백질 발현량의 증가를 분석하는 단계;를 포함하는 동물의 산자수 예측 방법
19 19
제18항에 있어서, 상기 (a) 단계의 단백질 수준을 측정하는 단계는 항-L-아미노산 옥시다제(L-amino-acid oxidase, LAAO), 항-MDH2(Mitochondrial malate dehydrogenase 2, NAD), 항-세포질 5’-뉴클레오티다제 1B(Cytosolic 5’-nucleotidase 1B, NT5C1B), 항-라이소자임-유사 단백질 4(Lysozyme-like protein 4, LYZL4), 항-CALM(Calmodulin), 항-EQTN(Equatorin), 항-스펌아드헤신 AWN(Spermadhesin AWN), 항-TPI(Triosephosphate isomerase), 항-RAB2A(Ras-related protein Rab-2A), 항-스펌아드헤신 AQN-3(Spermadhesin AQN-3) 및 항-NDUFS2(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 2) 항체로 구성된 군에서 하나 이상 선택하여 사용하는 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측 방법
20 20
제18항에 있어서, 상기 시료에서 L-아미노산 옥시다제(L-amino-acid oxidase, LAAO), MDH2(Mitochondrial malate dehydrogenase 2, NAD), 세포질 5’-뉴클레오티다제 1B(Cytosolic 5’-nucleotidase 1B, NT5C1B), 라이소자임-유사 단백질 4(Lysozyme-like protein 4, LYZL4) 및 CALM(Calmodulin)로 이루어진 군으로부터 하나 이상 선택된 동물의 산자수 예측용 마커의 mRNA 또는 단백질의 발현량이 증가하면 동물의 산자수가 높은 것으로 예측하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측 방법
21 21
제20항에 있어서, 항-L-아미노산 옥시다제(L-amino-acid oxidase, LAAO), 항-MDH2(Mitochondrial malate dehydrogenase 2, NAD), 항-세포질 5’-뉴클레오티다제 1B(Cytosolic 5’-nucleotidase 1B, NT5C1B), 항-라이소자임-유사 단백질 4(Lysozyme-like protein 4, LYZL4) 또는 항-CALM(Calmodulin) 항체를 사용하였을 때 L-아미노산 옥시다제(L-amino-acid oxidase, LAAO), MDH2(Mitochondrial malate dehydrogenase 2, NAD), 세포질 5’-뉴클레오티다제 1B(Cytosolic 5’-nucleotidase 1B, NT5C1B), 라이소자임-유사 단백질 4(Lysozyme-like protein 4, LYZL4) 또는 CALM(Calmodulin)의 단백질의 발현량이 증가하면 동물의 산자수가 높은 것으로 예측할 수 있음을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측 방법
22 22
제18항에 있어서, 상기 시료에서 EQTN(Equatorin), 스펌아드헤신 AWN(Spermadhesin AWN), TPI(Triosephosphate isomerase), RAB2A(Ras-related protein Rab-2A), 스펌아드헤신 AQN-3(Spermadhesin AQN-3) 및 NDUFS2(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 2)로 이루어진 군으로부터 하나 이상 선택된 동물의 산자수 예측용 마커의 mRNA 또는 단백질의 발현량이 증가하면 동물의 산자수가 낮은 것으로 예측하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측 방법
23 23
제22항에 있어서, 항-EQTN(Equatorin), 항-스펌아드헤신 AWN(Spermadhesin AWN), 항-TPI(Triosephosphate isomerase), 항-RAB2A(Ras-related protein Rab-2A), 항-스펌아드헤신 AQN-3(Spermadhesin AQN-3) 또는 항-NDUFS2(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 2) 항체를 사용하였을 때 EQTN(Equatorin), 스펌아드헤신 AWN(Spermadhesin AWN), TPI(Triosephosphate isomerase), RAB2A(Ras-related protein Rab-2A), 스펌아드헤신 AQN-3(Spermadhesin AQN-3) 또는 NDUFS2(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 2)의 단백질의 발현량이 증가하면 동물의 산자수가 낮은 것으로 예측할 수 있음을 특징으로 하는 동물의 산자수 예측 방법
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 JP06461059 JP 일본 FAMILY
2 JP28109659 JP 일본 FAMILY
3 JP28212121 JP 일본 FAMILY
4 US10288624 US 미국 FAMILY
5 US20160154002 US 미국 FAMILY

DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 CA2892401 CA 캐나다 DOCDBFAMILY
2 CA2892401 CA 캐나다 DOCDBFAMILY
3 JP2016109659 JP 일본 DOCDBFAMILY
4 JP2016212121 JP 일본 DOCDBFAMILY
5 JP6461059 JP 일본 DOCDBFAMILY
6 US10288624 US 미국 DOCDBFAMILY
7 US2016154002 US 미국 DOCDBFAMILY
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 중앙대학교 산학협력단 이공분야기초연구사업 (1차)정자의 동결 스트레스 바이오 마커 개발