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(1) 오리발을 세척 및 절단하는 단계;(2) 상기 (1)단계를 거친 오리발 절단조직으로부터 산가용성 콜라겐을 추출하는 단계;(3) 상기 (2)단계에서 추출된 산가용성 콜라겐을 동결 건조하는 단계;(4) 상기 (3)단계에서 건조된 콜라겐을 아세트산, 시트르산 및 염산으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상을 포함하는 산성용액에 용해시켜 콜라겐 용액을 제조하는 단계;(5) 상기 (4)단계에서 얻어진 콜라겐 용액을 동결하는 단계; 및(6) 상기 (5)단계에서 동결된 콜라겐 용액을 동결 건조하는 단계를 포함하는 고막재생용 콜라겐 패치의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 (2)단계는,상기 오리발 절단조직을 아세트산, 시트르산 및 포름산으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상을 포함하는 산성용액에 투입하여 교반한 후 상층액을 수거하는 1차 수거단계; 상기 1차 수거단계를 거친 상층액을 원심분리한 후 다시 그 상층액을 수거하는 2차 수거단계; 및 상기 2차 수거단계를 거친 상층액을 에탄올에 투입한 후 침전된 콜라겐을 수거하는 3차 수거단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 고막재생용 콜라겐 패치의 제조방법
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제2항에 있어서,상기 산성용액의 농도는 1 ~ 10%(w/w) 인 것을 특징으로 하는 고막재생용 콜라겐 패치의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 (3)단계에서 상기 산가용성 콜라겐이 증류수에 분산된 후 동결 건조되는 것을 특징으로 하는 고막재생용 콜라겐 패치의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 (3) 단계에서 상기 동결 건조는 -40 ~ 10℃의 온도 및 40 ~ 2000 mTorr의 압력 상태에서 12∼72시간 동안 수행되는 것을 특징으로 하는 고막재생용 콜라겐 패치의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 (4)단계에서 상기 산성용액의 농도는 0
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제1항에 있어서,상기 (4)단계에서 상기 콜라겐 용액은 2 ~ 6℃의 온도 조건 하에서 제조되는 것을 특징으로 하는 고막재생용 콜라겐 패치의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 (4)단계에서 얻어지는 콜라겐 용액의 농도는 0
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제1항에 있어서,상기 (4)단계에서 상기 산성용액에 키토산, 히알루론산, 실크 피브로인 및 젤라틴로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상의 첨가제를 더 투입하여 용해시키는 것을 특징으로 하는 고막재생용 콜라겐 패치의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 (5)단계에서 동결은 -100 ~ -50℃에서 12 ~ 24시간동안 수행되는 것을 특징으로 하는 고막재생용 콜라겐 패치의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 (6) 단계에서 상기 동결건조는 -40 ~ 10℃의 온도 및 40 ~ 2000 mTorr의 압력 상태에서 12 ~ 72시간 동안 수행되는 것을 특징으로 하는 고막재생용 콜라겐 패치의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 (6)단계를 거쳐 제조되는 콜라겐 패치는 스폰지 형태의 구조를 갖는 것을 특징으로 하는 고막재생용 콜라겐 패치의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 (6)단계를 거쳐 제조되는 콜라겐 패치의 두께는 80 ~ 200㎛인 것을 특징으로 하는 고막재생용 콜라겐 패치의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 (6)단계를 거쳐 제조되는 콜라겐 패치를 가교시키는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 고막재생용 콜라겐 패치의 제조방법
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제16항에 있어서,상기 가교에는 제니핀(genipin), 글루타르알데히드(glutaraldehyde), 에틸디메틸아미노프로필카르보디이미드(1-ethyl-3(3-dimethyl aminopropyl) carbodiimide, EDC) 및 N-하이드록시숙신이미드(N-hydroxysuccinimide, NHS)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상의 가교제가 사용되는 것을 특징으로 하는 고막재생용 콜라겐 패치의 제조방법
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상기 제1항, 제2항, 제4항 내지 제6항, 제8항 내지 제17항 중 어느 한 항에 따라 제조된 고막재생용 콜라겐 패치
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