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(a) 완충용액에 PEO(Polyethylene oxide)를 넣고 교반시키는 단계;(b) 상기 PEO 완충용액에 히알루론산 고분자를 넣고 교반시켜 히알루론산/PEO 완충용액을 제조하는 단계; 및(c) 상기 히알루론산/PEO 완충용액을 가교제 및 커플링제가 포함되어 있는 에탄올 배스에 전기 방사시켜 HRP(Horseradish Peroxidase) 고정용 히알루론산 나노섬유 지지체를 제조하는 단계로 상기 가교제는 ADH이고, 상기 커플링제는 EDC, EIC 및 DCC 중 어느 하나 또는 2 이상의 혼합물이며;(d) pH 4 내지 5의 아세트산 나트륨염 완충용액(Sodium acetate buffer)에 커플링제, 활성화제 및 상기 단계 (c)의 HRP(Horseradish Peroxidase) 고정용 히알루론산 나노섬유 지지체를 넣고 반응시키는 단계; (e) 반응 후 HRP(Horseradish Peroxidase)가 고정된 히알루론산 나노섬유 지지체가 용해된 완충용액을 원심 분리 후 고순도 에탄올을 이용하여 세척하는 단계; 및(f-1) 상기 세척된 HRP(Horseradish Peroxidase)가 고정된 히알루론산 나노섬유 지지체를 과산화수소와 미지의 농도인 TMB(3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine)가 포함되어 있는 용액에 첨가하여 반응시켜 변환되는 청색의 색상 변환 정도를 확인하여 TMB(3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine)의 농도를 확인하는 단계 로 구성된 HRP(Horseradish Peroxidase) 고정용 히알루론산 나노섬유 지지체를 이용한 미지의 TMB 농도를 확인하는 방법
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(a) 완충용액에 PEO(Polyethylene oxide)를 넣고 교반시키는 단계;(b) 상기 PEO 완충용액에 히알루론산 고분자를 넣고 교반시켜 히알루론산/PEO 완충용액을 제조하는 단계; 및(c) 상기 히알루론산/PEO 완충용액을 가교제 및 커플링제가 포함되어 있는 에탄올 배스에 전기 방사시켜 HRP(Horseradish Peroxidase) 고정용 히알루론산 나노섬유 지지체를 제조하는 단계로 상기 가교제는 ADH이고, 상기 커플링제는 EDC, EIC 및 DCC 중 어느 하나 또는 2 이상의 혼합물이며;(d) pH 4 내지 5의 아세트산 나트륨염 완충용액(Sodium acetate buffer)에 커플링제, 활성화제 및 상기 단계 (c)의 HRP(Horseradish Peroxidase) 고정용 히알루론산 나노섬유 지지체를 넣고 반응시키는 단계; (e) 반응 후 HRP(Horseradish Peroxidase)가 고정된 히알루론산 나노섬유 지지체가 용해된 완충용액을 원심 분리 후 고순도 에탄올을 이용하여 세척하는 단계; 및(f-2) 상기 세척된 HRP(Horseradish Peroxidase)가 고정된 히알루론산 나노섬유 지지체를 과산화수소와 미지의 농도인 TMB(3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine)가 포함되어 있는 용액에 첨가하여 반응시킨 후 TMB의 흡광도를 분석하여 TMB의 농도를 확인하는 단계로 구성된 HRP(Horseradish Peroxidase) 고정용 히알루론산 나노섬유 지지체를 이용한 미지의 TMB 농도를 확인하는 방법
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 단계 (a)의 완충용액은 D
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 단계 (a)의 완충용액은 D
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 히알루론산/PEO 완충용액에 첨가된 히알루론산의 첨가량은 0
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 히알루론산/PEO 완충용액에 첨가된 히알루론산의 첨가량은 0
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 히알루론산/PEO 완충용액에 첨가된 PEO의 첨가량은 0
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 히알루론산/PEO 완충용액에 첨가된 PEO의 첨가량은 0
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 히알루론산/PEO 완충용액에 첨가된 히알루론산과 PEO의 질량비는 그 비율이 1:3 내지 1:5 인 것을 특징으로 하는 HRP(Horseradish Peroxidase) 고정용 히알루론산 나노섬유 지지체를 이용한 미지의 TMB 농도를 확인하는 방법
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 히알루론산은 분자량이 500 kDa 내지 1000 kDA인 것을 특징으로 하는 HRP(Horseradish Peroxidase) 고정용 히알루론산 나노섬유 지지체를 이용한 미지의 TMB 농도를 확인하는 방법
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 전기 방사단계는 사출 속도가 30~50 ㎕/분이며, 인가전압은 25 내지 30 kV인 것을 특징으로 하는 HRP(Horseradish Peroxidase) 고정용 히알루론산 나노섬유 지지체를 이용한 미지의 TMB 농도를 확인하는 방법
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 활성화제는 NHS(N-Hydroxysuccinimide)인 것을 특징으로 하는 HRP(Horseradish Peroxidase) 고정용 히알루론산 나노섬유 지지체를 이용한 미지의 TMB 농도를 확인하는 방법
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 단계 (e)의 용액은 pH 4인 아세트산 나트륨염 완충용액인 것을 특징으로 하는 HRP(Horseradish Peroxidase) 고정용 히알루론산 나노섬유 지지체를 이용한 미지의 TMB 농도를 확인하는 방법
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 측정하고자 하는 미지의 농도의 TMB는 0 mM 내지 0
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