| 1 |
1
사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae) 유래 Upc2p의 리간드 결합 도메인 부위가 변이된 UPC2 변이 유전자를 포함하는 재조합 발현벡터
|
| 2 |
2
제1항에 있어서, 상기 UPC2 변이 유전자는 서열번호 1로 표시되는 것을 특징으로 하는 재조합 발현벡터
|
| 3 |
3
제1항에 있어서, 상기 재조합 발현벡터는 UPC2 프로모터 유전자, 서열번호 1로 표시되는 UPC2 변이 유전자, GAL7 종결 유전자 및 HIS3 마커 유전자를 순서대로 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 발현벡터
|
| 4 |
4
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 재조합 발현벡터로 형질전환된 사카로마이세스 세레비시애 재조합 균주
|
| 5 |
5
제4항에 있어서, 상기 재조합 균주는 UPC2 유전자가 결손된 사카로마이세스 세레비시애 균주를 상기 재조합 발현벡터로 형질전환시킨 것을 특징으로 하는 재조합 균주
|
| 6 |
6
제5항에 있어서, 상기 재조합 균주는 KCTC 13401BP로 기탁된 사카로마이세스 세레비시애 BY-upc2Δ/npUPC2-1 균주인 것을 특징으로 하는 재조합 균주
|
| 7 |
7
제6항에 있어서, 상기 KCTC 13401BP로 기탁된 사카로마이세스 세레비시애 BY-upc2Δ/npUPC2-1 균주는 총 콜레스테롤 생산이 증진된 균주인 것을 특징으로 하는 재조합 균주
|
| 8 |
8
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 재조합 발현벡터로 UPC2 유전자가 결손된 사카로마이세스 세레비시애 균주를 형질전환시키는 단계; 및상기 형질전환된 균주를 배양하는 단계를 포함하는 총 콜레스테롤 생산 증진 방법
|
| 9 |
9
제8항에 있어서, 상기 형질전환된 균주는 KCTC 13401BP로 기탁된 사카로마이세스 세레비시애 BY-upc2Δ/npUPC2-1 균주인 것을 특징으로 하는 총 콜레스테롤 생산 증진 방법
|
| 10 |
10
제4항에 있어서, 상기 재조합 균주는 에폭시스쿠알렌 및 담마레네디올을 생산하는 사카로마이세스 세레비시애 균주를 상기 재조합 발현벡터로 형질전환시킨 것을 특징으로 하는 재조합 균주
|
| 11 |
11
제10항에 있어서, 상기 에폭시스쿠알렌 및 담마레네디올을 생산하는 사카로마이세스 세레비시애 균주는 KCTC 13399BP로 기탁된 사카로마이세스 세레비시애 EmD/tH1e7 균주인 것을 특징으로 하는 재조합 균주
|
| 12 |
12
제10항에 있어서, 상기 재조합 균주는 KCTC 13400BP로 기탁된 사카로마이세스 세레비시애 EmD/tHle7/npUPC2-1 균주인 것을 특징으로 하는 재조합 균주
|
| 13 |
13
제12항에 있어서, 상기 KCTC 13400BP로 기탁된 사카로마이세스 세레비시애 EmD/tHle7/npUPC2-1 균주는 에폭시스쿠알렌 및 담마레네디올 생산이 증진된 균주인 것을 특징으로 하는 재조합 균주
|
| 14 |
14
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 재조합 발현벡터로 에폭시스쿠알렌 및 담마레네디올을 생산하는 사카로마이세스 세레비시애 균주를 형질전환시키는 단계; 및상기 형질전환된 균주를 배양하는 단계를 포함하는 에폭시스쿠알렌 및 담마레네디올 생산 증진 방법
|
| 15 |
15
제14항에 있어서, 상기 에폭시스쿠알렌 및 담마레네디올을 생산하는 사카로마이세스 세레비시애 균주는 KCTC 13399BP로 기탁된 사카로마이세스 세레비시애 EmD/tH1e7 균주인 것을 특징으로 하는 에폭시스쿠알렌 및 담마레네디올 생산 증진 방법
|
| 16 |
16
제14항에 있어서, 상기 형질전환된 균주는 KCTC 13400BP로 기탁된 사카로마이세스 세레비시애 EmD/tHle7/npUPC2-1 균주인 것을 특징으로 하는 에폭시스쿠알렌 및 담마레네디올 생산 증진 방법
|
| 17 |
17
UPC2 프로모터 유전자, 서열번호 1로 표시되는 UPC2 변이 유전자, UPC2 종결 유전자, URA3 마커 유전자 및 UPC2 종결 유전자를 순서대로 포함하는 UPC2 변이 유전자 삽입 카세트
|
| 18 |
18
제17항에 따른 UPC2 변이 유전자 삽입 카세트를 포함하는 재조합 벡터
|
| 19 |
19
제18항에 따른 재조합 벡터로 형질전환된 사카로마이세스 세레비시애 재조합 균주
|
| 20 |
20
제19항에 있어서, 상기 재조합 균주는 KCTC 13404BP로 기탁된 사카로마이세스 세레비시애 CEN
|
| 21 |
21
제20항에 있어서, 상기 KCTC 13404BP로 기탁된 사카로마이세스 세레비시애 CEN
|
| 22 |
22
제19항 내지 제21항 중 어느 한 항에 따른 재조합 균주를 배양하는 단계를 포함하는 총 콜레스테롤 생산 증진 방법
|
| 23 |
23
Cas9 유전자 및 UPC2 유전자를 표적으로 하는 단일 가이드 RNA(single guide RNA; sgRNA)를 포함하는 크리스퍼-카스9(CRISPR-Cas9) 재조합벡터; 및 UPC2 변이 유전자 도입용 기증자(Donor) DNA로 형질전환된 사카로마이세스 세레비시애 재조합 균주
|
| 24 |
24
제23항에 있어서, 상기 UPC2 유전자를 표적으로 하는 sgRNA는 서열번호 7로 표시되는 것을 특징으로 하는 재조합 균주
|
| 25 |
25
제23항에 있어서, 상기 UPC2 변이 유전자 도입용 기증자(Donor) DNA는 서열번호 8로 표시되는 것을 특징으로 하는 재조합 균주
|
| 26 |
26
제23항에 있어서, 상기 크리스퍼-카스9(CRISPR-Cas9) 재조합벡터는 도 9(A)의 개열지도는 갖는 YCpH-SpCas9-sgUPC2 재조합벡터인 것을 특징으로 하는 재조합 균주
|
| 27 |
27
제23항에 있어서, 상기 재조합 균주는 염색체 내 내생(endogenous) UPC2 유전자가 서열번호 1로 표시되는 UPC2 변이 유전자로 치환된 것을 특징으로 하는 재조합 균주
|
| 28 |
28
제23항 내지 제27항 중 어느 한 항에 따른 재조합 균주를 배양하는 단계를 포함하는 스테롤 생산 증진 방법
|
