1 |
1
a) 연골 올리고머 기질 단백질(cartilage oligomeric matrix protein; COMP)에 포함되는 도메인을 포함하는 자가 조립성 다중체 단백질을 코딩하는 유전자; 및 번역 속도 조절을 위한 펩타이드를 코딩하는, 숙주 세포의 희귀 코돈(rare codon)의 수집을 통해 얻는 서열번호 23 내지 서열번호 34로부터 선택되는 핵산 서열이 인간 성장 호르몬(hGH), 인슐린, 과립구 콜로니 자극인자(G-CSF), 표피 성장인자 수용체(EGFR; epidermal growth factor receptor) 결합 도메인 및 RGD 펩타이드로 이루어진 군에서 선택되는 목적 단백질을 코딩하는 유전자 또는 상기 자가 조립성 다중체 단백질과 상기 목적 단백질의 융합 단백질(fusion protein)을 코딩하는 핵산 서열의 내부 또는 외부에 접목된, 핵산 서열;을 포함하는 벡터를 제조하는 단계;b) 상기 벡터를 숙주 세포에 형질전환하여 형질전환체를 제조하는 단계; 및c) 상기 형질전환체를 배양하여 재조합 단백질을 수득하는 단계;를 포함하는 가용성이 증가한 재조합 융합 단백질의 제조방법
|
2 |
2
삭제
|
3 |
3
삭제
|
4 |
4
제 1항에 있어서,상기 연골 올리고머 기질 단백질은 5 개의 동일한 설파이드 결합 서브 유닛으로 구성되는 것을 특징으로 하는 재조합 융합 단백질의 제조방법
|
5 |
5
삭제
|
6 |
6
삭제
|
7 |
7
제 1항에 있어서,상기 희귀 코돈의 수집은 코돈의 빈도수 및 이소 수용체(isoacceptor) tRNA 유전자 수를 분석하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 재조합 융합 단백질의 제조방법
|
8 |
8
제 7항에 있어서,상기 희귀 코돈의 빈도 수는 0
|
9 |
9
제 7항에 있어서,상기 이소 수용체 tRNA의 유전자 수는 0 내지 2개인 것을 특징으로 하는 재조합 융합 단백질의 제조방법
|
10 |
10
제 1항에 있어서,상기 목적 단백질을 코딩하는 유전자의 내부 또는 외부에 접목된 핵산 서열은 리더 서열 또는 분리정제용 태그를 코딩하는 핵산 서열인 것을 특징으로 하는 재조합 융합 단백질의 제조방법
|
11 |
11
제 10항에 있어서,상기 리더 서열은 pelB, gene Ⅲ, ompA, ompB, ompC, ompD, ompE, ompF, ompT, phoA 및 phoE로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상의 유전자의 핵산 서열인 것을 특징으로 하는 재조합 융합 단백질의 제조방법
|
12 |
12
제 10항에 있어서,상기 분리정제용 태그를 코딩하는 핵산 서열은 GST, poly-Arg, FLAG, poly-His 및 c-myc로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상의 태그를 코딩하는 핵산 서열을 순차적으로 연결하는 것을 특징으로 하는 재조합 융합 단백질의 제조방법
|
13 |
13
제 1항에 있어서,상기 숙주 세포는 에스케리치아 속(Escehreichia sp
|
14 |
14
삭제
|
15 |
15
삭제
|
16 |
16
삭제
|
17 |
17
제 1항, 제4항 및 제7항 내지 제 13항으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 한 항의 재조합 단백질 제조방법을 통해 제조된 재조합 융합 단백질
|
18 |
18
제 17항에 있어서,상기 재조합 융합 단백질은 서열번호 1로부터 도입되어 번역되는 COMP 단백질 다중화영역을 특징으로 하는 재조합 융합 단백질
|