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휘발성 유기 화합물의 노출 시간별 특이적 메틸화 바이오마커 및 이를 이용한 휘발성 유기 화합물의 노출 여부 확인 방법

  • 기술번호 : KST2019031177
  • 담당센터 : 인천기술혁신센터
  • 전화번호 : 032-420-3580
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 휘발성 유기 화합물(Volatile organic compounds, VOCs)의 인체 노출 시간별 특이적 메틸화 바이오마커 및 이를 이용한 휘발성 유기 화합물의 노출 여부 확인 방법에 관한 것이다. 보다 상세하게는 휘발성 유기 화합물의 대표적인 화학물질인 톨루엔(Toluene), 자일렌(Xylene) 및 에틸벤젠(ethylbenzene)에 대해 단기 또는 장기적으로 복합 노출된 시간에 비례하여 유전자 발현 양상이 점차적으로 감소하고 과메틸화(hypermethylation)되거나, 또는 유전자 발현 양상이 점차적으로 증가하고 저메틸화(hypomethylation)되는 특이적 메틸화 바이오마커 및 이를 이용한 단기 또는 장기적으로 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠에 대해 복합 노출된 여부를 확인하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 휘발성 유기 화합물의 인체 노출 시간별 특이적 메틸화 바이오마커 및 이를 이용한 휘발성 유기 화합물의 노출 여부 확인 방법은, DNA 마이크로어레이 칩을 통하여 선별된 반응 유전자들을 바이오마커로 이용하여 휘발성 유기 화합물 중에 특이적으로 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠의 복합 노출 여부를 조기에 모니터링할 수 있고, 인체 위해성을 판정하는데 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 바이오마커로 선별된 본 발명의 특이적 반응 유전자의 발현량 및 메틸화 변화 수준에 따라 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠에 대한 복합 노출 시간 정도를 예측할 수 있을 뿐만 아니라 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠에 의해 야기되는 독성 작용 기작을 규명하는 도구로도 유용하게 이용할 수 있다.
Int. CL C12Q 1/68 (2018.01.01)
CPC C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01)
출원번호/일자 1020160019126 (2016.02.18)
출원인 한양대학교 에리카산학협력단
등록번호/일자 10-1757174-0000 (2017.07.06)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20170713) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2016.02.18)
심사청구항수 7

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한양대학교 에리카산학협력단 대한민국 경기도 안산시 상록구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 황승용 대한민국 서울 서초구
2 홍지영 대한민국 경기 의왕시 내

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인다나 대한민국 서울특별시 강남구 역삼로 *길 **, 신관 *층~*층, **층(역삼동, 광성빌딩)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한양대학교 에리카산학협력단 경기도 안산시 상록구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2016.02.18 수리 (Accepted) 1-1-2016-0162153-87
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2016.10.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2016.11.10 수리 (Accepted) 9-1-2016-0046274-68
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2016.12.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0923649-51
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2017.02.09 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2017-0134560-90
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2017.02.09 수리 (Accepted) 1-1-2017-0134559-43
7 등록결정서
Decision to grant
2017.06.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0442401-87
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번호 청구항
1 1
하기의 군을 모두 포함하는, 톨루엔(toluene), 자일렌(xylene) 및 에틸벤젠(ethylbenzene)의 노출 시간 정도에 따라 발현이 변화하고, DNA 메틸화 수준이 변화하는 특이적인 유전자의 서열 전체 또는 일부를 포함하는 올리고뉴클레오티드, 또는 그의 상보적인 올리고뉴클레오티드가 집적된 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠의 복합 노출 여부 확인용 DNA 마이크로어레이 칩:유전자 등록번호(Genbank): NM_001720(BMP8B, bone morphogenetic protein 8b);유전자 등록번호(Genbank): NM_001005464(HIST2H3A, histone cluster 2, H3a);유전자 등록번호(Genbank): NM_014053(FLVCR1, feline leukemia virus subgroup C cellular receptor 1);유전자 등록번호(Genbank): NM_001042548(FEZ2, fasciculation and elongation protein zeta 2);유전자 등록번호(Genbank): NM_014562(OTX1, orthodenticle homeobox 1);유전자 등록번호(Genbank): NR_003500(RP9P, retinitis pigmentosa 9 pseudogene);유전자 등록번호(Genbank): NM_005746(NAMPT, nicotinamide phosphoribosyltransferase);유전자 등록번호(Genbank): NM_001002814(RAB11FIP1, RAB11 family interacting protein 1(class I));유전자 등록번호(Genbank): NM_004235(KLF4, Kruppel-like factor 4(gut));유전자 등록번호(Genbank): NM_001169106
2 2
1) 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠에 대해 단기 또는 장기적으로 복합 노출 가능성이 있는 개체로부터 수득된 실험군 혈액 시료 및, 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠이 노출되지 않은 개체로부터 수득된 대조군 혈액으로부터 RNA를 분리하는 단계;2) 단계 1)의 실험군과 대조군의 RNA를 증폭하여 실험군과 대조군을 형광물질로 표지하는 단계;3) 단계 2)의 형광물질로 표지된 aRNA(amplified RNA)를 제1항의 DNA 마이크로어레이 칩과 혼성화시키는 단계;4) 단계 3)의 반응한 DNA 마이크로어레이 칩을 분석하는 단계; 및5) 단계 4)의 분석한 데이터에서 제1항의 DNA 마이크로어레이 칩에 집적된 유전자의 발현 정도를 대조군과 비교하여 확인하는 단계를 포함하는, 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠의 복합 노출 여부를 확인하기 위한 정보를 제공하는 방법
3 3
1) 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠에 대해 단기 또는 장기적으로 복합 노출 가능성이 있는 개체로부터 수득된 실험군 혈액 시료 및, 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠이 노출되지 않은 개체로부터 수득된 대조군 혈액으로부터 DNA를 분리하는 단계;2) 단계 1)의 실험군과 대조군의 DNA를 각기 다른 형광물질로 표지하는 단계;3) 단계 2)의 각기 다른 형광물질로 표지된 DNA를 제1항의 DNA 마이크로어레이 칩과 혼성화시키는 단계;4) 단계 3)의 반응한 DNA 마이크로어레이 칩을 분석하는 단계; 및5) 단계 4)의 분석한 데이터에서 제1항의 DNA 마이크로어레이 칩에 집적된 유전자의 메틸화 변화 정도를 대조군과 비교하여 확인하는 단계를 포함하는, 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠의 복합 노출 여부를 확인하기 위한 정보를 제공하는 방법
4 4
제2항 또는 제3항에 있어서, 단계 3)의 형광물질은 Cy3, Cy5, FITC(poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate), RITC(rhodamine-B-isothiocyanate) 및 로다민(rhodamine)으로 이루어진 군으로부터 선택하여 사용하는 것을 특징으로 하는, 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠의 복합 노출 여부를 확인하기 위한 정보를 제공하는 방법
5 5
제1항의 DNA 마이크로어레이 칩을 포함하는 것을 특징으로 하는, 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠의 복합 노출 시간 정도에 따라 발현이 변화하고, DNA 메틸화 수준이 변화하는 특이적인 유전자 발현 여부 확인용 키트
6 6
제5항에 있어서, 음성 대조군 및 양성 대조군의 인간 혈액시료를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는, 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠의 복합 노출 시간 정도에 따라 발현이 변화하고, DNA 메틸화 수준이 변화하는 특이적인 유전자 발현 여부 확인용 키트
7 7
하기 각각의 유전자에 상보적이고 유전자를 증폭시키는 프라이머 세트를 모두 포함하는 톨루엔, 자일렌 및 에틸벤젠의 복합 노출 시간 정도에 따라 발현이 변화하고, DNA 메틸화 수준이 변화하는 특이적인 유전자 발현 여부 확인용 키트:유전자 등록번호(Genbank): NM_001720(BMP8B, bone morphogenetic protein 8b);유전자 등록번호(Genbank): NM_001005464(HIST2H3A, histone cluster 2, H3a);유전자 등록번호(Genbank): NM_014053(FLVCR1, feline leukemia virus subgroup C cellular receptor 1);유전자 등록번호(Genbank): NM_001042548(FEZ2, fasciculation and elongation protein zeta 2);유전자 등록번호(Genbank): NM_014562(OTX1, orthodenticle homeobox 1);유전자 등록번호(Genbank): NR_003500(RP9P, retinitis pigmentosa 9 pseudogene);유전자 등록번호(Genbank): NM_005746(NAMPT, nicotinamide phosphoribosyltransferase);유전자 등록번호(Genbank): NM_001002814(RAB11FIP1, RAB11 family interacting protein 1(class I));유전자 등록번호(Genbank): NM_004235(KLF4, Kruppel-like factor 4(gut));유전자 등록번호(Genbank): NM_001169106
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