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특정 특성이 발현된 단백질을 암호화하는 플라스미드를 선별하는 유도 플라스미드 디스플레이 시스템

  • 기술번호 : KST2020008260
  • 담당센터 : 경기기술혁신센터
  • 전화번호 : 031-8006-1570
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 특정 특성이 발현된 단백질을 암호화하는 플라스미드를 선별하는 유도 플라스미드 디스플레이 시스템에 관한 것이다. 즉, 본 발명자들은 기존 시스템과는 달리 시험관 내 분자 진화를 통하여 생성된 거대한 유전자 돌연변이 라이브러리에서 원하는 특성을 가지는 단백질 변이체를 플라스미드와 융합단백질을 이루게 함으로써, 짧은 시간 안에 효율적으로 선별할 수 있는 유도 플라스미드 디스플레이 시스템을 개발하였는 바, 본 발명을 통해 활성이 유지되거나 성능이 극대화된 단백질을 선별한 후 이를 이용하여 산업적 가치가 높은 물질의 생산용 미생물에 적용함으로써 고부가 산물을 보다 경제적이고 효율적으로 얻을 수 있을 것으로 기대된다.
Int. CL C12N 15/10 (2017.01.01) C40B 40/02 (2017.01.01)
CPC C12N 15/1086(2013.01) C12N 15/1086(2013.01) C12N 15/1086(2013.01)
출원번호/일자 1020190020634 (2019.02.21)
출원인 성균관대학교산학협력단
등록번호/일자 10-2129377-0000 (2020.06.26)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20200702) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2019.02.21)
심사청구항수 7

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 성균관대학교산학협력단 대한민국 경기도 수원시 장안구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 권대혁 경기도 수원시 영통구
2 김착희 경기도 수원시 장안구
3 신종혁 경기도 수원시 장안구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이명진 대한민국 서울특별시 강남구 영동대로**길 ** (대치동) 성원타워 *층(명진 국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 성균관대학교산학협력단 경기도 수원시 장안구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2019.02.21 수리 (Accepted) 1-1-2019-0186529-16
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2019.09.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2019.11.07 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2019-0140417-59
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2020.01.08 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0020562-25
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2020.03.04 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2020-0229310-81
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2020.03.04 수리 (Accepted) 1-1-2020-0229311-26
7 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2020.04.02 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0241935-24
8 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2020.05.28 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2020-0540038-28
9 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견서·답변서·소명서
 2020.05.28 수리 (Accepted) 1-1-2020-0540039-74
10 등록결정서
Decision to grant		 2020.06.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0435731-67
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
목적단백질(Protein of interest; POI)의 돌연변이 라이브러리(mutant library)를 형성시키는 단계;상기 돌연변이 라이브러리에 있는 돌연변이체를 발현시키는 단계;상기 돌연변이체를 발현시켜 얻는 단백질 중 특정 특성이 발현된 단백질은 플라스미드의 DNA 결합 영역(DNA binding domain; DBD)과 단백질 트랜스 접합(protein trans splicing)에 의해 융합단백질로 형성되는 단계;상기 융합 단백질이 플라스미드의 결합 자리(binding site; BS)에 결합하여 플라스미드-단백질 복합체가 형성되는 단계;상기 플라스미드-단백질 복합체가 포함된 세포를 파쇄하고, 크로마토그래피를 이용하여 플라스미드-단백질 복합체를 정제하는 단계; 및상기 플라스미드-단백질 복합체를 플라스미드 정제(plasmid purification)하여 융합 단백질을 제거한 플라스미드를 선별하는 단계를 포함하는, 유도 플라스미드 디스플레이 방법
2 2
제1항에 있어서,상기 특정 특성은 수용성, 열안정성, pH안정성, 리간드에 대한 친화도, 효소의 활성, 및 효소 저해제 저항성으로 이루어진 군으로부터 하나 이상 선택되는 것을 특징으로 하는, 유도 플라스미드 디스플레이 방법
3 3
제1항에 있어서,상기 돌연변이 라이브러리는 목적단백질에 오류유발 PCR(error prone PCR) 및 DNA 섞임(DNA shuffling)을 이용한 무작위 돌연변이생성(random mutagenesis)를 일으킴으로써 형성되는 것을 특징으로 하는, 유도 플라스미드 디스플레이 방법
4 4
제1항에 있어서,상기 돌연변이체를 발현시키는 것은 POI-IntN(Prontein of Interset - Intein N) 및 IntC-DBD(Intein C - DNA binding domain)을 발현시키는 것을 특징으로 하는, 유도 플라스미드 디스플레이 방법
5 5
제1항에 있어서, 상기 방법을 반복하여 특정 특성의 단백질 정보를 가진 플라스미드를 선별하는 것을 특징으로 하는, 유도 플라스미드 디스플레이 방법
6 6
제4항에 있어서,상기 IntN 및 IntC는 인테인(Intein)인 것을 특징으로 하는, 유도 플라스미드 디스플레이 방법
7 7
제1항에 있어서,상기 단백질 트랜스 접합은 POI-IntN의 IntN와 IntC-DBD의 IntC가 결합하여 인테인으로 형성된 후 제거되는 것을 특징으로 하는, 유도 플라스미드 디스플레이 방법
8 8
삭제
9 9
삭제
10 10
삭제
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 과학기술정보통신부 성균관대학교(자연과학캠퍼스) 이공분야 기초연구사업 단백질의 활성 비의존적 초고속 대용량 분자 진화 탐색/선별 기술 개발
2 교육부 성균관대학교(자연과학캠퍼스) 이공학개인기초연구지원사업 생체분자제어연구소-생체분자 제어 및 효능의 멀티스케일 연구