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브라제인(brazzein) 암호화 유전자 및 알파-메이팅 인자(α-mating factor) 암호화 유전자가 삽입된 pESC-URA 벡터를 포함하는, 사카로미세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae)에서의 브라제인 발현용 재조합 벡터
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제1항에 있어서,상기 브라제인 암호화 유전자는 서열번호 2로 표시되는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 사카로미세스 세레비시아에서의 브라제인 발현용 재조합 벡터
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제1항에 있어서,상기 알파-메이팅 인자 암호화 유전자는 서열번호 5로 표시되는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 사카로미세스 세레비시아에서의 브라제인 발현용 재조합 벡터
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제1항에 있어서,상기 브라제인 암호화 유전자는 상기 알파-메이팅 인자 암호화 유전자와 연결되어 있고, 상기 브라제인 암호화 유전자 및 알파-메이팅 인자 암호화 유전자 사이에는 알파-메이팅 절단 부위(α-mating cleavage site)가 존재하는 것을 특징으로 하는, 사카로미세스 세레비시아에서의 브라제인 발현용 재조합 벡터
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제1항에 있어서,상기 pESC-URA 벡터는 서열번호 8로 표시되는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 사카로미세스 세레비시아에서의 브라제인 발현용 재조합 벡터
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제1항에 있어서,서열번호 7 또는 10으로 표시되는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 사카로미세스 세레비시아에서의 브라제인 발현용 재조합 벡터
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제1항의 브라제인 발현용 재조합 벡터로 형질전환된, 브라제인 발현용 사카로미세스 세레비시아 균주
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제7항에 있어서,상기 사카로미세스 세레비시아 균주는 INVSc1, Y2805, 또는 BY4741인 것을 특징으로 하는, 브라제인 발현용 사카로미세스 세레비시아 균주
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제7항의 브라제인 발현용 사카로미세스 세레비시아 균주의 배양물
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(1) 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 브라제인 발현용 벡터를 사카로미세스 세레비시아 균주에 형질전환시키는 단계;(2) 단계 (1)에서 형질전환된 균주를 배양하는 단계;(3) 단계 (2)에서 배양된 형질전환 균주의 배양물을 수득하는 단계; 및(4) 단계 (3)의 배양물로부터 브라제인을 정제하는 단계를 포함하는, 브라제인의 대량 생산방법
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제10항에 있어서, 단계(2)의 배양은 하기 조건 중 하나 이상을 만족하는 것인, 브라제인의 대량 생산방법:(a) 사카로미세스 세레비시아 균주 내에 도입된 브라제인 발현용 재조합 벡터의 복제 개수(copy number)는 5 내지 60임;(b) 상기 배양은 복합배지 또는 제한배지에서 이루어짐;(c) 상기 배양은 pH 4
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제11항에 있어서,단계(2)의 배양이 제한배지에서 이루어지는 경우, 하기 조건 중 하나 이상을 더 만족하는 것인, 브라제인의 대량 생산 방법:(a) 상기 제한배지 내의 탄소원(C)/질소원(N)의 몰비율(M/M)은 0
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제10항에 있어서,단계 (2)의 배양 단계는 형질전환된 균주를 고체 배지에 도말하여 배양하는 단계; 상기 고체 배지에 형성된 콜로니(colony)를 채취해 액체 배지에서 전배양하여 전배양액을 제조하는 단계; 및 상기 전배양액을 본배양액에 접종하여 배양하는 단계를 포함하고,여기서 상기 전배양액의 접종 농도는 본배양액의 1 내지 5(v/v)% 이며,상기 전배양액이 접종된 본배양액의 OD600은 0
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제10항에 있어서,단계 (2)의 배양 단계는 형질전환된 균주의 브라제인 발현을 유도하기 위해 유도제를 첨가하는 단계를 포함하고,여기서 상기 유도제는 글루코스(glucose), 갈락토스(galactose), 또는 이들의 조합 중에서 선택되고, 상기 유도제는 전체 배지의 1 내지 2(w/w)%의 농도로 첨가되는 것인, 브라제인의 대량 생산방법
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제14항에 있어서,상기 유도제를 첨가하는 단계는 하기 조건 중 하나 이상을 만족하는 것인, 브라제인의 대량 생산방법:(a) 글루코스/갈락토스 비율은 0
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제10항에 있어서,단계(4)의 정제 단계는 한외여과법(ultrafiltration)으로 브라제인을 정제하는 것인, 브라제인의 대량 생산방법
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제7항의 형질전환된 균주, 제9항의 배양물, 또는 이들의 혼합물을 포함하는, 브라제인 대량생산용 조성물
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제7항의 형질전환된 균주, 제9항의 배양물, 또는 이들의 혼합물을 포함하는, 식품 조성물
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제7항의 형질전환된 균주, 제9항의 배양물, 또는 이들의 혼합물을 포함하는, 건강기능식품
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제7항의 형질전환된 균주, 제9항의 배양물, 또는 이들의 혼합물을 포함하는, 화장료 조성물
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제7항의 형질전환된 균주, 제9항의 배양물, 또는 이들의 혼합물을 포함하는, 사료 첨가제
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