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다음을 포함하는, 티올 반응성 에디티브를 이용하여, 항체 및 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물의 반응을 통해 제조되는 기능성 그룹을 포함하는 항체의 수율을 높이는 방법:(a) 항체 및 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물을 반응 조성물 내에서 접촉함, 이때 상기 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물은 티오에스터 그룹(thioester group), 기능성 그룹(Functional group; FG), 및 Fc 결합성 펩타이드 (Fc-binding peptide; FcBP)를 포함하고, 이때 상기 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물의 상기 티오에스터 그룹과 상기 항체의 친핵체가 반응하며, 상기 티오에스터 그룹과 상기 항체의 친핵체의 반응의 결과로, 기능성 그룹을 포함하는 항체, 그리고 티올 그룹 및 상기 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물로부터 유래된 Fc 결합성 펩타이드를 포함하는 부산물이 생성되고, 이때 상기 부산물의 상기 티올 그룹은 상기 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물의 티오에스터 그룹과 상기 항체의 상기 친핵체의 반응에 의해 생성되며, 이때, 상기 부산물은 상기 반응 조성물 내 아직 반응하지 않은 항체와 아직 반응하지 않은 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물의 반응을 방해하는 반응 저해 효과를 가짐; 및(b) 상기 부산물의 상기 반응 저해 효과를 제거하기 위해, 상기 부산물과 상기 티올 반응성 에디티브를 반응 조성물 내에서 접촉함, 이때 상기 티올 반응성 에디티브는 티올 그룹과 반응성을 갖고, 이때 상기 티올 반응성 에디티브와 상기 부산물의 상기 티올 그룹이 반응하고, 상기 티올 반응성 에디티브와 상기 티올 그룹의 반응의 결과로, 상기 부산물의 티올기가 캡핑됨
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제1항에 있어서, 상기 부산물의 티올기가 캡핑됨으로써, 상기 부산물의 상기 반응 저해 효과가 제거되는 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서, 상기 티올 반응성 에디티브는 항체와 반응성이 적거나 없는 화합물인, 방법
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제1항에 있어서, 상기 티올 반응성 에디티브는 저분자 화합물인, 방법
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제1항에 있어서, 상기 티올 반응성 에디티브의 분자량은 50 g/mol 이상 1000 g/mol 이하인, 방법
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제1항에 있어서,상기 티올 반응성 에디티브는 티올-다이설파이드 교환 반응(thiol-disulfide exchange reaction)을 하는 화합물인, 방법
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제1항에 있어서, 상기 티올 반응성 에디티브는 다이설파이드 그룹을 포함하는 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서,상기 티올 반응성 에디티브는 다이페닐 다이설파이드 또는 이의 유도체인, 방법
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제1항에 있어서,상기 티올 반응성 에디티브는 다이페닐 다이설파이드, 다이피리딜다이설파이드 (Dipyridyldisulfide), 5,5′-다이티오비스-(2-니트로벤조익산) (5,5′-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid); DTNB), 2,2'-다이티오다이벤조익산 (2,2′-Dithiodibenzoic acid), 4-아미노페닐 다이설파이드(4-Aminophenyl disulfide), 2-아미노페닐 다이설파이드(2-Aminophenyl disulfide), Bis(4-클로로페닐) 다이설파이드 (Bis(4-chlorophenyl disulfide), Bis(2-니트로페닐) 다이설파이드 (Bis(2-nitrophenyl disulfide), p-톨릴 다이설파이드 (p-tolyl disulfide), Bis(4-니트로페닐) 다이설파이드 (Bis(4-nitrophenyl) disulfide), Bis(2-니트로페닐) 다이설파이드 (Bis(2-nitrophenyl) disulfide), Bis(4-메톡시페닐) 다이설파이드 (Bis(4-methoxyphenyl) disulfide), 또는 Bis(2-메톡시페닐) 다이설파이드 (Bis(2-methoxyphenyl) disulfide), 또는 이의 유도체인, 방법
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제1항에 있어서, 상기 티올 반응성 에디티브는 5,5′-다이티오비스-(2-니트로벤조익산) (5,5′-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid); DTNB) 또는 2,2'-다이피리딜다이설파이드 (2,2'-Dipyridyldisulfide)인, 방법
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제1항에 있어서,상기 티올 반응성 에디티브는 화학식 06의 구조를 갖는 화합물인, 방법:[화학식 06],이때, A는 5-원 또는 6-원 아로마틱 고리이고, 이때 A는, 선택적으로, 하나 이상의 헤테로원자를 고리 상에 포함하고, 이때 헤테로원자는 각각 독립적으로 N, O, 및 S 중에서 선택되며, p는 0 내지 4의 정수이고, Ra는, 각각 독립적으로, -R, -NO2, -CR3, -NR2, -OR, -SR, -SO2R, -OSO2R, -PO2R2, -OPOR2, -C(=O)R, -C(=O)CR3, -C(=O)OR, 및 -C(=O)NR2 중에서 선택되고, B는 5-원 또는 6-원 아로마틱 고리이고, 이때 B는, 선택적으로, 하나 이상의 헤테로원자를 고리 상에 포함하고, 이때 헤테로원자는 각각 독립적으로 N, O, 및 S 중에서 선택되며, q는 0 내지 4의 정수이고, Rb는, 각각 독립적으로, -R, -NO2, -CR3, -NR2, -OR, -SR, -SO2R, -OSO2R, -PO2R2, -OPOR2, -C(=O)R, -C(=O)CR3, -C(=O)OR, 및 -C(=O)NR2 중에서 선택되고, R은, 각각 독립적으로, H, 할로겐, C1-6알킬, C3-10 시클로알킬, C3-10 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, -OH, =O, =S, 및 -NH2 중에서 선택됨
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제11항에 있어서, Ra 중 적어도 어느 하나는 전자 끄는 그룹(Electron Withdrawing Group) 또는 친수성 그룹(hydrophilic group)인 것을 특징으로 하는, 방법
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제11항에 있어서, Rb 중 적어도 어느 하나는 전자 끄는 그룹(Electron Withdrawing Group) 또는 친수성 그룹(hydrophilic group)인 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서, 상기 티올 반응성 에디티브는 말레이미드 또는 이의 유도체인, 방법
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제1항에 있어서, 상기 티올 반응성 에디티브는 말레이미드, N-메틸말레이미드 (N-Methylmaleimide), N-에틸말레이미드 (N-Ethylmaleimide), N-페닐말레이미드 (N-Phenylmaleimide), N-벤질말레이미드 (N-Benzylmaleimide), 3-말레이미도프로피오닉산 (3-Maleimidopropionic acid), N-tert-부틸말레이미드 (N-tert-butylmaleimide), 또는 N-시클로헥실말레이미드 (N-Cyclohexylmaleimide), 또는 이의 유도체인, 방법
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제1항에 있어서,상기 티올 반응성 에디티브는 tert-부틸 말레이미드인 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서,상기 티올 반응성 에디티브는 화학식 09의 구조를 갖는 화합물인, 방법:[화학식 09],이때, Rc는 -R, =O, =S, -NO2, -CR3, -CH2CR3, -NR2, -OR, -SR, -SO2R, -OSO2R, -PO2R2, -OPOR2, -C(=O)R, -C(=O)CR3, -C(=O)OR, 및 -C(=O)NR2 중에서 선택되고, 이때 R은 각각 독립적으로 H, 할로겐, C1-6알킬, C3-10 시클로알킬, C3-10 헤테로시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, -OH, =O, =S, -NH2, 및 -SH 중에서 선택됨
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제1항에 있어서, 상기 티올 반응성 에디티브는 화학식 10 내지 화학식 31 중 어느 하나의 구조를 갖는 화합물인 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서,상기 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물은 화학식 01의 구조를 갖는 것을 특징으로 하는, 방법:[화학식 01]FU-RU-PU, 이때, FU는 기능성 그룹(functional group; FG)을 포함하는 기능성 유닛 (Functional Unit)이고, RU는 티오에스터 그룹을 포함하는 반응성 유닛 (Reactive Unit) 이고, PU는 Fc 결합성 펩타이드 (Fc-binding peptide; FcBP)를 포함하는 펩티드 유닛(Peptide Unit; PU)임
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제1항에 있어서,상기 Fc 결합성 펩타이드는 8 내지 20 아미노산 잔기의 길이를 갖는 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서,상기 Fc 결합성 펩타이드는 서열번호 02 내지 서열번호 80 중 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열, 또는 이와 80% 이상의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서, 상기 기능성 그룹은 하나 이상의 생체직교적 작용기를 포함하는 것을 특징으로 하는, 방법
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제22항에 있어서,상기 생체직교적 작용기는, 각각 독립적으로, 스타우딩어 라이게이션(Staudinger Ligation), 구리-촉매화 아자이드-알킨 사이클로에디션 (Copper-Catalyzed Azide-Alkyne Cycloaddition; CuAAC), 구리가 없는 아자이드-알킨 사이클로에디션 (Copper-Free Azide-Alkyne Cycloaddition), 테트라진 라이게이션 (Tetrazine Ligation), 테트라졸 라이게이션 (Tetrazole Ligation), 옥심 라이게이션 (Oxime Ligation), 및 이소시아나이드 클릭 반응 (Isocyanide Click Reaction) 중 선택되는 어느 하나의 생체직교적 반응에 참여하는 그룹인 것을 특징으로 하는, 방법
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제22항에 있어서, 상기 생체직교적 작용기는, 각각 독립적으로, 아자이드, 말단 알킨, 사이클로 알킨, 테트라진, 노르보르넨, 사이클로 알켄, 테트라졸, 옥심, 및 이소시아나이드 그룹 중에 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서, 상기 기능성 그룹은 하나 이상의 활성 모이어티를 포함하는 것을 특징으로 하는, 방법
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제25항에 있어서,상기 활성 모이어티는, 각각 독립적으로, 약물, 이미징 모이어티, 방사성 동위원소에 대한 리간드, 친화성 물질, 안정화 물질, 비타민, 및 친수성 모이어티 중 선택되는 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서, 상기 부산물의 상기 반응 저해 효과는 상기 부산물에 포함된 Fc 결합성 펩타이드가 상기 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물과 상기 항체의 반응이 일어나는 상기 항체에 위치한 반응 자리로 상기 부산물을 가이드함과 함께, 상기 부산물에 포함된 티올기가 상기 반응 자리에서 상기 항체와 상호작용하기 때문에 생성되는 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서,상기 방법의 상기 기능성 그룹을 포함하는 항체의 수율은, 티올 반응성 에디티브를 사용하지 않는 경우와 비교할 때, 1
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제28항에 있어서,상기 기능성 그룹을 포함하는 항체의 수율은 2개의 기능성 그룹을 포함하는 항체를 기준으로 측정된 것인, 방법
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제1항에 있어서,상기 방법의 (a) 항체 및 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물의 접촉, 및 (b) 부산물 및 티올 반응성 에디티브의 접촉은 티올 반응성 에디티브, 항체 및 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물을 혼합함으로써 수행되는 것인, 방법
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제30항에 있어서,상기 티올 반응성 에디티브, 항체 및 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물을 혼합함에 있어서,상기 티올 반응성 에디티브와 항체가 먼저 혼합되고, 이후에 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물이 혼합되는 것을 특징으로 하는, 방법
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제30항에 있어서,상기 티올 반응성 에디티브, 항체 및 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물을 혼합함에 있어서,상기 티올 반응성 에디티브와 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물이 먼저 혼합되고, 이후에 항체가 혼합되는 것을 특징으로 하는, 방법
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티올 반응성 에디티브, 항체, 및 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물을 포함하는 기능성 그룹을 포함하는 항체의 제조 수율을 높이기 위해 사용되는 키트
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티올 반응성 에디티브, 항체, 및 기능성 그룹을 전달하기 위한 화합물을 포함하는 기능성 그룹을 포함하는 항체의 제조 수율을 높이기 위해 사용되는 조성물
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