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CD9를 발현하는 인간 중간엽 줄기세포의 선별 및 배양방법

  • 기술번호 : KST2014009645
  • 담당센터 : 부산기술혁신센터
  • 전화번호 : 051-606-6561
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 동물혈청 없이 인간혈청을 포함하는 세포 배양 배지 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 50~60 %(v/v) DMEM , 40~50 %(v/v) IMDM, 4~6 μg/ml 인슐린 (insulin), 4~6 μg/ml 트랜스페린 (transferrin), 4~6 μg/ml 셀레니움 (selenium), 10-7~10-9 M 덱사메타손 (dexamethasone), 80~120 U 페니실린 (penicillin)/800~1200 U 스트렙토마이신 (streptomycin), 5~15 ng/ml FGF, 및 1~10 % 인간혈청을 포함하는 것을 특징으로 하는 인간 중간엽 줄기세포 배양 배지 조성물에 관한 것이다.본 발명에 따르면, 인간 중간엽 줄기세포의 배양에 사용하는 자가혈청의 농도를 감소시키기 위하여 F-12를 대체하는 배지를 검색한 결과 DMEM/F-12 대신 DMEM/IMDM 배지를 사용하였을 때 인체혈청농도를 5%로 감소시켜도 세포증식능이 대조군 (DMEM/F12, 10% HS)과 유사한 수준으로 유지되어 인체혈청사용을 최소화하며 생체 안전성을 확보한 배양방법을 확립하였다. 또한, CD9 표지인자의 발현이 중간엽줄기세포의 증식능, 부착능 및 생체생존능을 증가시킴과 DMEM/IMDM배지사용시 CD9발현이 증가됨을 발견하고 CD9 표지인자를 띄는 세포개체를 분리하여 DMEM/IMDM배지에 배양함으로써 중간엽 줄기세포의 세포치료효과를 증진시킬 수 있는 방법을 확립하였다.중간엽 줄기세포, CD9, 인간혈청, IMDM, 세포치료
Int. CL C12N 5/0775 (2010.01) C12N 5/02 (2010.01)
CPC C12N 5/0662(2013.01) C12N 5/0662(2013.01) C12N 5/0662(2013.01) C12N 5/0662(2013.01) C12N 5/0662(2013.01) C12N 5/0662(2013.01) C12N 5/0662(2013.01)
출원번호/일자 1020060104150 (2006.10.25)
출원인 대한민국 (식품의약품안전처장), 부산대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-0827660-0000 (2008.04.29)
공개번호/일자 10-2008-0037281 (2008.04.30) 문서열기
공고번호/일자 (20080507) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2006.10.25)
심사청구항수 5

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 대한민국 (식품의약품안전처장) 대한민국 충청북도 청주시 흥덕구
2 부산대학교 산학협력단 대한민국 부산광역시 금정구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 정진섭 대한민국 부산시 금정구
2 김연정 대한민국 경남 양산시
3 유지민 대한민국 부산시 남구
4 배용찬 대한민국 부산광역시 수영구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 윤여강 대한민국 경기도 수원시 영통구 광교산로 ***-** (이의동) 경기대학교 창업보육센터 ***호(여강특허기술사업화전문회사)
2 이문섭 대한민국 서울특별시 관악구 남부순환로 ****, ***호 제니스국제특허법률사무소 (봉천동, 청동빌딩)
3 양부현 대한민국 서울특별시 송파구 오금로 **, 태원빌딩 **층, 특허팀(주식회사씨젠)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 대한민국 (식품의약품안전처장) 대한민국 충청북도 청주시 흥덕구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application
2006.10.25 수리 (Accepted) 1-1-2006-0774192-44
2 보정요구서
Request for Amendment
2006.10.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2006-0136299-26
3 서지사항보정서
Amendment to Bibliographic items
2006.11.14 수리 (Accepted) 1-1-2006-0830936-10
4 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2007.03.30 수리 (Accepted) 4-1-2007-5049227-69
5 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2007.06.07 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
6 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2007.06.29 수리 (Accepted) 9-1-2007-0037938-54
7 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2007.08.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2007-0467815-59
8 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2007.10.24 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2007-0759927-33
9 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2007.10.24 수리 (Accepted) 1-1-2007-0759929-24
10 등록결정서
Decision to grant
2008.02.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2008-0090041-20
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2011.07.08 수리 (Accepted) 4-1-2011-0008979-68
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2011.10.06 수리 (Accepted) 4-1-2011-0013022-18
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2013.04.02 수리 (Accepted) 4-1-2013-5052682-98
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.01.02 수리 (Accepted) 4-1-2014-0000027-56
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2016.01.13 수리 (Accepted) 4-1-2016-5004891-78
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2016.08.23 수리 (Accepted) 4-1-2016-5119884-11
17 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.01.09 수리 (Accepted) 4-1-2017-5004005-98
18 출원인정보변경(경정)신고서
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2017.01.10 수리 (Accepted) 4-1-2017-5004797-18
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번호 청구항
1 1
동물혈청없이 인간혈청을 포함하는 세포 배양 배지 조성물에 있어서, 50~60 %(v/v) DMEM (Dulbeco's Modified Eagle's Medium), 40~50 %(v/v) IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium), 4~6 μg/ml 인슐린 (insulin), 4~6 μg/ml 트랜스페린 (transferrin), 4~6 μg/ml 셀레니움 (selenium), 10-7~10-9 M 덱사메타손 (dexamethasone), 80~120 U 페니실린 (penicillin)/800~1200 U 스트렙토마이신 (streptomycin), 5~15 ng/ml FGF, 및 1~10 % 인간혈청을 포함하는 것을 특징으로 하는 인간 중간엽 줄기세포 배양 배지조성물
2 2
제 1항에 있어서, 상기 인간혈청은 중간엽 줄기세포의 기원이 되는 환자에서 채취한 자가혈액으로부터 얻은 것을 특징으로 하는 배지조성물
3 3
제 1항에 있어서, 상기 중간엽 줄기세포는 부착능과 증식능을 증가시키는 표지인자 CD9를 발현하는 것을 특징으로 하는 배지조성물
4 4
제 1항의 배지 조성물을 이용하여 지방조직 또는 골수에서 유래한 인간 중간엽 줄기세포를 배양하는 단계 및 CD9 표지인자를 발현하는 줄기세포를 분리하는 단계를 포함하는 증식능과 부착능이 증가된 인간 중간엽 줄기세포의 배양방법
5 5
제 4항에 있어서, 상기 분리단계는 FACS (Fluorescent activated cell sorting system) 또는 MACS (magnetic activated cell sorting system)을 이용하여 CD9 항원을 갖는 세포를 분리하는 것을 특징으로 하는 방법
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