| 1 |
1
삭제
|
| 2 |
2
삭제
|
| 3 |
3
삭제
|
| 4 |
4
삭제
|
| 5 |
5
삭제
|
| 6 |
6
삭제
|
| 7 |
7
삭제
|
| 8 |
8
삭제
|
| 9 |
9
삭제
|
| 10 |
10
삭제
|
| 11 |
11
1) 인산화 효소에 특이적인 기질 펩타이드를 활성기가 코팅된 기판 표면에 직접 집적하고, 차단 용액으로 차단 처리하지 않은 인산화 반응 측정용 바이오칩을 제조하는 단계;
2) 피검 시료를 [γ-32P]ATP와 혼합하는 단계;
3) 단계 2)의 혼합한 피검 시료를 단계 1)의 바이오칩에 처리하여 인산화 반응을 유도하는 단계;
4) 단계 3)의 바이오칩을 세척하는 단계; 및
5) 단계 4)의 바이오칩을 감광하여 인산화 정도를 측정하는 단계를 포함하는 인산화 반응 측정 방법
|
| 12 |
12
제 11항에 있어서, 단계 2)의 피검 시료는 세포 배양액, 세포 분쇄액, 세포 또는 조직의 조 추출액, 소변, 땀, 타액, 눈물 등 각종 분비액, 또는 혈액, 혈장, 림프액, 혈청 등 각종 체액으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 인산화 반응 측정 방법
|
| 13 |
13
삭제
|
| 14 |
14
제 11항에 있어서, 단계 3)의 반응 시간은 30℃ 또는 37℃에서 30-60분인 것을 특징으로 하는 인산화 반응 측정 방법
|
| 15 |
15
제 11항에 있어서, 단계 5)의 감광 방법은 X-선 필름(X-ray film) 또는 방사형광분석기에 감광시키는 것을 특징으로 하는 인산화 반응 측정 방법
|
| 16 |
16
1) 세포 배양액, 세포 분쇄액, 세포 또는 조직의 조 추출액, 소변, 땀, 타액, 눈물 등 각종 분비액, 또는 혈액, 혈장, 림프액, 혈청 등 각종 체액으로 이루어진 군에서 선택된 피검 시료를 활성기가 코팅된 기판 표면에 직접 집적하고 차단용액으로 차단 처리하지 않은 기질 분석용 바이오칩을 제조하는 단계;
2) 인산화효소(kinase)와 [γ-32P]ATP를 단계 1)의 바이오칩에 처리하여 인산화 반응을 유도하는 단계;
3) 단계 2)의 바이오칩을 세척하는 단계; 및
4) 단계 3)의 바이오칩을 감광하여 인산화 정도를 측정하는 단계를 포함하는 피검 시료 내에 상기 인산화효소에 특이적인 기질의 검출 방법
|
| 17 |
17
제 16항에 있어서, 인산화 효소는 IkB인 것을 특징으로 하는 기질의 검출 방법
|
| 18 |
18
제 16항에 있어서, 정해진 농도의 기질이 집적된 바이오칩을 이용하여 시료 내의 상기 기질을 정량하는 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 기질의 검출 방법
|
| 19 |
19
삭제
|
| 20 |
20
삭제
|
| 21 |
21
제 16항에 있어서, 단계 1)의 피검 시료의 스팟 직경은 40-60 ㎛이며, 간격은 300-500 ㎛인 것을 특징으로 하는 기질의 검출 방법
|
| 22 |
22
제 16항에 있어서, 단계 1)의 피검 시료의 양은 스팟 당 1 nℓ 이내인 것을 특징으로 하는 기질의 검출 방법
|
| 23 |
23
제 16항에 있어서, 단계 1)의 기판은 유리, 플라스틱, 금속 및 실리콘으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 기질의 검출 방법
|
| 24 |
24
제 16항에 있어서, 단계 1)의 활성기는 아민기(amine group), 알데하이드기(aldehyde group), 카르복실기(carboxyl group) 및 티올기(thiol group)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 기질의 검출 방법
|
| 25 |
25
제 16항에 있어서, 단계 2)의 인산화효소(kinase)는 오로라 카이네이즈(Aurora kinases; BTAK, STK15), 티로신 키나아제(tyrosine kinase; Lyn), PTK (protein tyrocine kinase), MAPK (MAP kinase), MAPKK (MAP kinase kinase), PKA (protein kinase A), PKC (protein kinase C), ERK (extracellular signal-regulated kinase), CAM KⅡ(calcium/Calnodulin-dependent protein kinase), MEKK (MAP/ERK kinase kinase), JNK (c-Jun N-terminal kinase), SAPK (stress-activated protein kinase), p38K (p38 kinase), phosphatase 2B, cPKC (conventional protein kinase), Serine Kinase IKKβ, Ab1K (Ab1 kinase), BTK (Bruton tyrosine kinase), CDK (cyclin-dependent kinase), VEGF-RTK (Vascular endothelial growth factor-receptor tyrosine kinase), AKT1 kinase, AKT2 kinase, AKT3-kinase, PK (Pyruvate kinase), Tumor M2-pyruvate kinase로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 기질의 검출 방법
|
| 26 |
26
삭제
|
| 27 |
27
제 16항에 있어서, 단계 2)의 반응 시간은 30℃ 또는 37℃에서 30-60분인 것을 특징으로 하는 기질의 검출 방법
|
| 28 |
28
제 16항에 있어서, 단계 4)의 감광 방법은 X-선 필름(X-ray film) 또는 방사형광분석기에 감광시키는 것을 특징으로 하는 기질의 검출 방법
|
