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써모코커스 구아이마센시스 균주 유래 내열성 ＤＮＡ중합효소 및 이를 이용한 중합효소 연쇄반응 방법

  • 기술번호 : KST2014021910
  • 담당센터 : 경기기술혁신센터
  • 전화번호 : 031-8006-1570
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 초고온성 고세균 (hyperthermophilic archaebacteria) 써모코커스 구아이마센시스 (Thermococcus guaymasensis) 균주 유래 내열성 DNA 중합효소 (이하 ‘Tgu DNA 중합효소’라고 함) 및 그것을 암호화하는 유전자, 그리고 Tgu DNA 중합효소 유전자의 대장균 (Escherichia coli) 내에서의 발현 및 정제 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 발현 및 정제방법에 의하여 생산된 Tgu DNA 중합효소를 이용한 중합효소 연쇄반응 (polymerase chain reaction; PCR) 방법을 제공한다. 본 발명의 Tgu DNA 중합효소는 우수한 DNA 중합 활성 (DNA polymerization activity) 및 높은 교정 활성 (proofreading activity)을 가지고 있어 PCR에 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 본 발명에서 내열성 Tgu DNA 중합효소의 발현 시스템의 구축 및 정제 과정의 확립은 산업적으로 중요한 기술인 PCR에 절대적으로 필요한 내열성 DNA 중합효소의 대량생산을 용이하게 할 뿐만 아니라 생산비용 절감 효과가 있다. 써모코커스 구아이마센시스, 내열성, 중합효소, PCR
Int. CL C12N 9/00 (2006.01) C12N 9/12 (2006.01) C12N 15/52 (2006.01)
CPC C12N 9/1252(2013.01) C12N 9/1252(2013.01) C12N 9/1252(2013.01) C12N 9/1252(2013.01) C12N 9/1252(2013.01) C12N 9/1252(2013.01)
출원번호/일자 1020080031585 (2008.04.04)
출원인 성균관대학교산학협력단
등록번호/일자 10-0969477-0000 (2010.07.02)
공개번호/일자 10-2009-0106085 (2009.10.08) 문서열기
공고번호/일자 (20100714) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2008.04.04)
심사청구항수 18

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 성균관대학교산학협력단 대한민국 경기도 수원시 장안구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 권석태 대한민국 경기 수원시 팔달구
2 이종일 대한민국 경기 군포시

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 권형중 대한민국 서울특별시 중구 서소문로 *** (서소문동, 대한항공빌딩 *층)(특허법인 남앤남)
2 이종승 대한민국 서울특별시 송파구 법원로**길** 에이동 ***호 (문정동, 현대지식산업센터)(리스비특허법률사무소)
3 김문재 대한민국 서울특별시 중구 서소문로 *** (서소문동, 대한항공빌딩 *층)(특허법인 남앤남)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 성균관대학교산학협력단 대한민국 경기도 수원시 장안구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2008.04.04 수리 (Accepted) 1-1-2008-0245640-14
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2008.11.21 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2008.12.15 수리 (Accepted) 9-1-2008-0082514-99
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2010.04.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2010-0185684-10
5 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2010.06.15 수리 (Accepted) 1-1-2010-0384656-63
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2010.06.15 수리 (Accepted) 1-1-2010-0384655-17
7 등록결정서
Decision to grant		 2010.06.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2010-0279831-63
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2012.04.26 수리 (Accepted) 4-1-2012-5090770-53
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2012.06.20 수리 (Accepted) 4-1-2012-5131828-19
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2012.06.27 수리 (Accepted) 4-1-2012-5137236-29
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2017.02.23 수리 (Accepted) 4-1-2017-5028829-43
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
서열번호 10의 아미노산 서열을 가진 써모코커스 구아이마센시스 균주 유래의 내열성 DNA 중합효소 (Thermococcus guaymasensis DNA 중합효소, Tgu DNA 중합효소)
2 2
서열번호 10의 아미노산 서열을 암호화하는, 써모코커스 구아이마센시스 균주로부터 분리된 내열성 Tgu DNA 중합효소 유전자
3 3
제 2항에 있어서, 상기 유전자는 서열번호 9의 핵산서열임을 특징으로 하는 내열성 Tgu DNA 중합효소 유전자
4 4
제 2항 또는 제3항의 내열성 Tgu DNA 중합효소 유전자를 포함하는 재조합 벡터
5 5
제 4항에 있어서, 재조합 벡터는 도 3의 pEGUPOL임을 특징으로 하는 재조합 벡터
6 6
제 4항의 재조합 벡터로 형질전환된 숙주 세포
7 7
제 6항에 있어서, 숙주 세포는 대장균(Eshcherichia coli)임을 특징으로 하는 숙주 세포
8 8
제 7항에 있어서, 대장균은 BL21-CodonPlus(DE3)-RIL임을 특징으로 하는 숙주 세포
9 9
i) 서열번호 10의 아미노산 서열을 암호화하는, 써모코커스 구아이마센시스 균주로부터 분리된 내열성 Tgu DNA 중합효소 유전자를 포함하는 재조합 벡터를 제조하는 단계; ii) 상기 재조합 벡터를 숙주세포에 형질전환하는 단계; iii) 형질전환된 숙주세포를 배양하는 단계; iv) 재조합 단백질의 발현을 유도하는 단계; 및 v) 발현된DNA 중합효소를 분리하는 단계를 포함하는 내열성 Tgu DNA 중합효소 제조방법
10 10
제 9항에 있어서, 분리된 DNA 중합효소를 80℃에서 30분간 열처리하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 내열성 Tgu DNA 중합효소 제조방법
11 11
제 10항에 있어서, 열처리한 DNA 중합효소를 HisTrapTM HP 컬럼크로마토그래피 및 HiTrapTM Heparin HP 컬럼크로마토그래피로 정제하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 내열성 Tgu DNA 중합효소 제조방법
12 12
제 9항 내지 제11항 중 어느 한 항의 제조방법에 의하여 생산된 내열성 Tgu DNA 중합효소
13 13
제 12항에 있어서, 최적 pH가 7
14 14
제 1항의 내열성 Tgu DNA 중합효소를 이용한 DNA 중합 방법
15 15
제 14항에 있어서, DNA 중합방법은 중합효소 연쇄반응(polymerase chain reaction, PCR)임을 특징으로 하는 방법
16 16
제 14항 또는 제 15항에 있어서, 반응 조건으로서 반응 pH가 pH 8
17 17
제 14항 또는 제 15항에 있어서, 반응 조건으로서 반응시 KCl 농도가 50 - 80mM임을 특징으로 하는 중합효소 연쇄반응 방법
18 18
제 14항 또는 제 15항에 있어서, 반응 조건으로서 반응시 Mg2+ 농도가 3 - 5 mM임을 특징으로 하는 중합효소 연쇄반응 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.