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서열번호 1 의 아미노산 서열을 암호화하는 제 1 염기서열 및 항체의 Fc(fragment crystalline)부위와 결합하여 항체의 Fab(fragment antigen binding)부위가 분석 용액 방향으로 배열되게 하는 단백질을 암호화하는 제 2 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드
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2
제1항에 있어서,
상기 제 1 염기서열의 3´말단에 제 2 염기서열의 5´말단이 직접 연결된 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드
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3 |
3
제1항에 있어서,
상기 폴리뉴클레오티드가 서열번호 10 또는 11 의 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드
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4 |
4
제1항에 있어서,
상기 제 2 염기서열이 서열번호 8 또는 9 의 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드
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5
제1항에 있어서,
상기 단백질이 protein A 또는 protein G 인 것을 특징으로하는 폴리뉴클레오티드
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6
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 발현벡터
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7 |
7
제6항의 발현벡터로 형질전환된 것을 특징으로 하는 형질전환체
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8
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 폴리뉴클레오티드에 의해 암호화되는 것을 특징으로 하는 재조합 융합단백질
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9
제8항에 있어서,
서열번호 1 의 아미노산 서열; 및 서열번호 8 또는 9 의 염기서열로 암호화된 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 융합단백질
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10
제9항에 있어서,
상기 서열번호 1의 아미노산 서열이 서열번호 8 또는 9의 염기서열로 암호화된 아미노산 서열의 N 말단 또는 C 말단에 결합되는 것을 특징으로 하는 재조합 융합단백질
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11
제8항의 재조합 융합단백질 및 골드-함유 고체상을 포함하는 것을 특징으로 하는 바이오센서
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12
제11항에 있어서,
상기 골드-함유 고체상이 골드 콜로이드 입자, 나노-골드 입자, 골드-코팅 입자 및 골드가 도포된 기판으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 바이오센서
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13
다음의 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 바이오센서의 제작방법:
(a) 서열번호 10 또는 11의 유전자를 함유하고, 상기 두 유전자가 융합된 형태로 발현되도록 구성된 재조합벡터를 박테리아로 구성된 군에서 선택되는 숙주세포에 삽입하여 형질전환 미생물을 준비하는 단계;
(b) 상기 형질전환 미생물을 배양하여 서열번호 10 또는 11의 염기서열로 암호화된 재조합 융합단백질을 발현시키는 단계;
(c) 상기 융합단백질이 발현된 미생물을 회수한 다음, 파쇄하여 상기 재조합 단백질을 함유하는 분획을 수득하는 단계; 및
(d) 상기 융합단백질을 함유하는 분획을 골드-함유 고체상에 특이적으로 고정시키는 단계
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14
제13항의 바이오센서를 이용한 면역검출법
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제14항에 있어서,
상기 면역검출법이 상기 바이오센서의 재조합 융합단백질에 항체를 특이적으로 결합시키는 단계; 및
상기 항체에 특이적인 항원을 처리하여 항원-항체의 특이적 결합을 검출하는 단계를 포함하는 면역검출법
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16
제15항에 있어서,
상기 항체가 anti-AFB1(항 아플라톡신 B1)임을 특징으로 하는 면역검출법
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17
제16항에 있어서, 상기 anti-AFB1 항체의 농도는 100㎍/㎖임을 특징으로 하는 면역검출법
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제14항에 있어서,
상기 면역검출법이 가시적(visually), 광학적(Optically) 또는 전기화학적(electrochemically) 방법을 통해 수행하는 것을 특징으로 하는 면역검출법
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제18항에 있어서,
상기 광학적 검출법이 SPR(surface plasmon resonance: 표면플라즈몬공명) 방법을 사용하는 것을 특징으로 하는 면역검출법
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