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고활성의 신규 또는 변이체의 β,β-카로틴 15, 15'-디옥시게나제(β, β-carotene 15, 15'-dioxygenases)를 스크리닝할 수 있는 스크리닝 시스템으로서,
(a) 프로모터(promoter)에 작동적으로 연결된 β-카로틴(carotene) 합성 효소 인코딩 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 제 1 의 DNA 컨스트럭트(construct); 및
(b) 프로모터에 작동적으로 연결된 프로테오로돕신(proteorhodopsin) 인코딩 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 제 2 의 DNA 컨스트럭트를 포함하는 숙주세포(host cell)를 포함하는 스크리닝 시스템
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제 1 항에 있어서, 상기 제 1 의 DNA 컨스트럭트의 β-카로틴 합성 효소는 서열목록 제1서열의 아미노산 서열을 포함하는 crtE 유전자 발현 단백질, 서열목록 제3서열의 아미노산 서열을 포함하는 crtB 유전자 발현 단백질, 서열목록 제5서열의 아미노산 서열을 포함하는 crtI 유전자 발현 단백질, 및 서열목록 제7서열의 아미노산 서열을 포함하는 crtY 유전자 발현 단백질을 포함하는 것을 특징으로 하는 시스템
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제 1 항에 있어서, 상기 프로테오로돕신은 서열목록 제9서열의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 시스템
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제 1 항에 있어서, 상기 제 1 및 제 2 의 DNA 컨스트럭트는 선별마커(selectable marker)로서 항생제(antibiotic) 내성을 갖는 단백질을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 것을 특징으로 하는 시스템
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제 1 항에 있어서, 상기 숙주 세포는 원핵 세포(prokaryotic cell)인 것을 특징으로 하는 시스템
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제 5 항에 있어서 상기 원핵세포는 대장균 (E
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다음의 단계를 포함하는 고활성의 신규 또는 변이체 β,β-카로틴 15, 15'-디옥시게나제를 스크리닝하는 방법:
(a) 프로모터에 작동적으로 연결된 β-카로틴 합성 효소 인코딩 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 제 1 의 DNA 컨스트럭트를 제조하는 단계;
(b) 프로모터에 작동적으로 연결된 프로테오로돕신 인코딩 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 제 2 의 DNA 컨스트럭트를 제조하는 단계;
(c) 상기 제 2 의 DNA 컨스트럭트에, 신규 추정 또는 변이체 β,β-카로틴 15, 15'-디옥시게나제 인코딩 폴리뉴클레오타이드를 프로모터에 작동적으로 연결되도록 삽입하는 단계;
(d) 상기 제조한 제 1 및 제 2 의 DNA 컨스트럭트를 숙주세포에 형질전환하는 단계; 및
(e) 상기 형질전환된 숙주세포를 배양하면서 숙주세포의 색깔을 관찰하는 단계
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제 7 항에 있어서, 상기 제 1 의 DNA 컨스트럭트의 β-카로틴 합성 효소는 서열목록 제1서열의 아미노산 서열을 포함하는 crtE 유전자 발현 단백질, 서열목록 제3서열의 아미노산 서열을 포함하는 crtB 유전자 발현 단백질, 서열목록 제5서열의 아미노산 서열을 포함하는 crtI 유전자 발현 단백질 및 서열목록 제7서열의 아미노산 서열을 포함하는 crtY 유전자 발현 단백질을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제 7 항에 있어서, 상기 프로테오로돕신은 서열목록 제9서열의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제 7 항에 있어서, 상기 제 1 및 제 2 의 DNA 컨스트럭트는 선별마커(selectable marker)로서 항생제(antibiotic) 내성을 갖는 단백질을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제 7 항에 있어서, 상기 숙주 세포는 원핵 세포(prokaryotic cell)인 것을 특징으로 하는 방법
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제 11 항에 있어서 상기 원핵세포는 대장균 (E
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