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하기를 포함하는, 1H-13C HSQC NMR을 이용한 대사물질 정량 분석 방법:
내부 기준 물질(internal standard) 및 대사물질(metabolites)을 포함하는 표준 시료를 준비하는 단계,
상기 표준 시료에 포함된 내부 기준 물질 및 대사물질에 대해 NMR (Nuclear Magnetic Resonance, 핵자기공명) 분광기를 사용하여 2-차원의 1H-13C HSQC 스펙트럼을 수득하는 단계,
상기 표준 시료에 포함된 대사물질의 농도에 대한 1H-13C HSQC 피크 강도를 나타내는 그래프를 작성하여 최소자승법 (least square method)으로 상기 대사물질에 대한 농도 대 1H-13C HSQC 피크 강도의 관계식을 수득하여 표준 곡선을 작성하는 단계,
대사물질을 포함하는 피검 시료에 대해 NMR 분광기를 사용하여 2-차원의 1H-13C HSQC 스펙트럼을 수득하는 단계, 및
상기 수득된 피검 시료의 1H-13C HSQC 스펙트럼의 피크 위치 및 피크 강도 값을 이용하여 상기 표준 곡선으로부터 상기 피검 시료에 포함된 대사물질의 종류 및 농도를 계산하는 단계:
여기에서, 상기 내부 기준 물질은 HEPES(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid)이며,
상기 대사물질은 하기 4개 그룹의 각각을 포함하는 것임:
제 1 그룹: 4-아미노부티레이트, 아데노신, 알라닌, AMP, 아스라파진, 아스파르테이트, 베타인, 콜린, 시트레이트, 시트룰린, 크리에이틴, 에타놀아민, 과당, 글루타민산염, 산화된-글루타티온, 히스티딘, 호모세린, 이소루신, 유산염, 루신, 라이신, 말산염, 메티오닌, 미오-이노시톨, NAD, 페닌알라닌, 프롤린, 세린, 타르타레이트, 트랜스-4-히드록시프롤린, 트레할로스, 트립토판 및 발린 포함;
제 2 그룹: ADP, 아르기닌, 카나바닌, 카르니틴, 시스테인, 갈락토즈, 환원된-글루타티온, 글리신, 마노즈, 숙신산염, 자당, 타우린 및 트레오닌 포함;
제 3 그룹: 글리세롤, 글루타민, 글루코스, 푸트리신(1,4 디아미노부탄), 아세트산, 우리딘 및 베타인 포함;
제 4 그룹: MES, 오리니틴, 트레할로스 및 말토오스 포함
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