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a) 당단백질 특이적 항체의 N-형 당쇄를 산화시키는 단계;b) 산화된 당단백질 특이적 항체에 프로모터를 포함하여 서열이 알려진 이중가닥 DNA를 공유결합시켜 DNA-결합 당단백질 특이적 항체를 생성하는 단계;c) b) 단계에서 생성된 DNA-결합 당단백질 특이적 항체를 정제하는 단계;d) 정제된 DNA-결합 당단백질 특이적 항체와 생체시료를 반응시키는 단계;e) 반응된 생체시료를 분석물질로 하여 렉틴 친화 크로마토그래피를 수행하는 단계; f) 렉틴에 결합된 DNA-결합 당단백질 특이적 항체로부터 전사체 (transcript)를 생산하는 단계; 및g) 생산된 전사체를 DNA칩에서 정성, 정량 분석하는 단계;를 포함하는 DNA-결합 당단백질 특이적 항체를 이용한 당단백질 검증방법
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제1항에 있어서,a) 단계에서 항체의 당쇄를 NaIO4로 산화시키는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서,b) 단계에서 상기 DNA는 5' 말단을 히드라진 그룹으로 공유결합시킨 DNA임을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서,b) 단계에서 상기 DNA는 T7-프로모터를 포함하는 DNA와 전사체를 코딩하는 DNA, 그리고 이 두 DNA에 상보적인 서열을 갖는 DNA를 혼성화시켜 얻어진 이중나선 DNA임을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서,b) 단계 이후 c) 단계 이전 NaBH4를 이용하여 DNA와 당단백질 특이적 항체간 결합을 안정화시키는 과정을 부가하는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서,e) 단계에서 렉틴 친화 크로마토그래피는 L4-PHA (Phytohemagglutinin-L4), LCA (lens culinaris agglutinin), DSA (Datura stramonium agglutinin), AAL (Aleuria aurantia agglutinin), 셀렉틴 (Selectin), Con A (Concanavalin-A), WGA (Wheat germ agglutinin), 자칼린 (Jacalin), SNA (Sambucus Nigra agglutinin) 및 갈렉틴 (galectin) 중 하나 이상의 렉틴을 이용하여 DNA-결합 당단백질 특이적 항체-항원 결합체를 포집하는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서,f) 단계에서 용출방법이 존재하는 렉틴 친화 크로마토그래피의 경우 용출 분획을 이용하여 전사체를 생산함을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서,f) 단계에서 용출방법이 존재하지 않는 렉틴 친화 크로마토그래피의 경우는 렉틴 결합된 비드-DNA-결합 당단백질 특이적 항체-항원 결합체를 그대로 이용하여 전사체를 생산함을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서,f) 단계에서 형광 표지된 기질을 사용하여 형광을 띠는 전사체를 생산함을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서,g) 단계에서 유리 슬라이드에 전사체와 상보적인 서열을 갖는 DNA를 결합시켜 전사체와의 혼성화를 통해 전사체를 정량하는 것을 특징으로 하는 방법
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11
제1항에 있어서,g) 단계에서 유리 슬라이드를 알데히드로 표면처리하여 DNA를 결합시키는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서,상기 생체시료는 정상 대조군 시료와 환자 분석군 시료로 하여 시료 내에 존재하는 당단백질의 당질구조 변이를 분석하는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서,다수의 당단백질 특이적 항체에 각각 서로 다른 서열을 갖는 DNA를 결합시켜 다수의 당단백질을 동시에 분석하는 것을 특징으로 하는 방법
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14
제1항에 있어서,c) 단계에서 렉틴에 결합 반응하는 항체를 제거하기 위하여 렉틴 친화 크로마토그래피를 수행함을 특징으로 하는 방법
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15
제14항에 있어서,상기 렉틴은 L4-PHA (Phytohemagglutinin-L4), LCA (lens culinaris agglutinin), DSA (Datura stramonium agglutinin), AAL (Aleuria aurantia agglutinin), 셀렉틴 (Selectin), Con A (Concanavalin-A), WGA (Wheat germ agglutinin), 자칼린 (Jacalin), SNA (Sambucus Nigra agglutinin) 및 갈렉틴 (galectin) 중 하나 이상의 렉틴임을 특징으로 하는 방법
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당단백질 특이적 항체의 산화된 N-형 당쇄에 프로모터를 포함하여 서열이 알려진 이중가닥 DNA가 공유결합된, 당단백질 정량·정성 분석용 DNA-결합 당단백질 특이적 항체
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당단백질인 알파-태아단백질 (alpha-fetoprotein) 특이적 항체의 산화된 N-형 당쇄에 프로모터를 포함하여 서열이 알려진 이중가닥 DNA가 공유결합된, DNA-결합 알파-태아단백질 특이적 항체 1종 이상;지지체에 결합된 렉틴;상기 DNA-결합 알파-태아단백질 특이적 항체의 DNA로부터 전사체를 제조하기 위한 RNA 폴리머레이즈;상기 RNA 폴리머레이즈의 기질; 및상기 전사체를 인식할 수 있는 서열을 포함하는 핵산 칩;을 포함하는 간암 진단용 키트
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삭제
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제17항에 있어서,상기 기질은 발색 또는 발광 기질을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 간암 진단용 키트
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제17항에 있어서,상기 렉틴은 L4-PHA(Phytohemagglutinin-L4), LCA(lens culinaris agglutinin), DSA(Datura stramonium agglutinin), AAL(Aleuria aurantia agglutinin), rhE-셀렉틴, 콘카나발린 A(Concanavalin-A, Con-A), WGA(Wheat germ agglutinin), 자칼린(Jacalin), SNA(Sambucus Nigra) 및 갈렉틴(galectin) 중 선택된 것임을 특징으로 하는 간암 진단용 키트
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