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외래단백질 분비생산용 인공 단백질 분비융합인자, 이를 사용한 외래단백질의 생산방법 및 인공 단백질 분비융합인자의 스크리닝 방법

  • 기술번호 : KST2014046126
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 외래단백질을 분비생산하기 위한, 프리-분비시그널과 프로-분비시그널의 신규한 조합을 가지는 인공 단백질 분비융합인자(TFP), 상기 인공 단백질 분비융합인자를 이용하여 외래단백질을 분비생산하는 방법 및 인공 단백질 분비융합인자 라이브러리로부터 목적하는 외래단백질의 분비생산 효율이 가장 우수한 프리-분비시그널 및 프로-분비시그널의 조합으로 구성된 인공 단백질 분비융합인자를 스크리닝하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 프리-분비시그널과 프로-분비시그널의 신규한 조합을 가지는 인공 단백질 분비융합인자를 이용하면 hGH를 비롯한 종래의 재조합 기술에 의하여 효모에서 대량으로 생산하기 어려운 외래단백질을 대량으로 생산할 수 있으므로, 기존에 낮은 생산성으로 재조합 단백질 발현에 널리 사용되지 못한 효모 발현 시스템을 이용한 재조합 외래단백질의 생산에 널리 활용될 수 있을 것이다.
Int. CL C07K 14/575 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) C07K 14/61 (2006.01) C12N 15/81 (2006.01) C07K 14/475 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)
CPC C12N 15/62(2013.01) C12N 15/62(2013.01) C12N 15/62(2013.01) C12N 15/62(2013.01) C12N 15/62(2013.01) C12N 15/62(2013.01)
출원번호/일자 1020110060407 (2011.06.21)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-1653809-0000 (2016.08.29)
공개번호/일자 10-2012-0140577 (2012.12.31) 문서열기
공고번호/일자 (20160905) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2014.11.10)
심사청구항수 10

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 손정훈 대한민국 대전광역시 유성구
2 박순호 대한민국 대전광역시 유성구
3 배정훈 대한민국 대전광역시 유성구
4 성봉현 대한민국 대전광역시 유성구
5 이승구 대한민국 대전광역시 유성구
6 김현진 대한민국 대전광역시 유성구
7 임광묵 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 손민 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, *층(문정동)(특허법인한얼)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대전광역시 유성구
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2011.06.21 수리 (Accepted) 1-1-2011-0472919-08
2 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)
2014.11.10 수리 (Accepted) 1-1-2014-1079720-94
3 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2015.05.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2015.07.10 수리 (Accepted) 9-1-2015-0043378-58
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2016.02.24 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0143200-92
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.04.25 수리 (Accepted) 1-1-2016-0397320-50
8 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.04.25 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-0397337-25
9 등록결정서
Decision to grant
2016.08.23 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0607328-87
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번호 청구항
1 1
효모 유래의 단백질 분비융합인자의 프리-분비시그널 및 프로-분비시그널을 포함하는 인간 성장호르몬(hGH) 단백질의 분비생산용 인공 단백질 분비융합인자로서, 상기 프리-분비시그널과 프로-분비시그널은 서로 다른 단백질 분비융합인자로부터 유래되고, 상기 프로-분비시그널은 TFP19-프로(서열번호 38)로 표시되는 단백질인 것인 인공 단백질 분비융합인자
2 2
삭제
3 3
제1항에 있어서, 상기 프리-분비시그널은 서열번호 1 내지 25로 구성된 군으로부터 선택되는 단백질 또는 서열번호 51 내지 75로 구성된 군으로부터 선택되는 유전자인 것인 인공 단백질 분비융합인자
4 4
삭제
5 5
제1항에 있어서, 상기 프리-분비시그널은 TFP20-Pre(서열번호 14), TFP3-Pre(서열번호 3) 또는 TFP14-Pre(서열번호 10)인 것인 인공 단백질 분비융합인자
6 6
i) 제1항, 제3항 및 제5항 중 어느 한 항에 따른 인공 단백질 분비융합인자 및 생산하고자 하는 인간 성장호르몬(hGH) 단백질 유전자를 포함하는 발현벡터를 제조하는 단계; ii) 상기 i) 단계의 발현벡터를 효모에 도입하여 형질전환체를 수득하는 단계; 및 iii) 상기 형질전환체를 배양하고, 이의 배양물 또는 배양상등액으로부터 인간 성장호르몬(hGH) 단백질을 회수하는 단계를 포함하는, 인간 성장호르몬(hGH) 단백질을 생산하는 방법
7 7
제6항에 있어서, 상기 발현벡터는 도 6의 개열지도로 표시되는 플라스미드 YGaC9-hGH인 것인 방법
8 8
제6항에 있어서,상기 형질전환체의 배양은 비-이온성 계면활성제를 포함하는 배지를 이용하여 수행되는 것인 방법
9 9
제8항에 있어서,상기 비-이온성 계면활성제는 폴리소르베이트(Polysorbate) 또는 폴록사머(poloxamer)인 것인 방법
10 10
제6항에 있어서, 회수한 인간 성장호르몬(hGH) 단백질의 정제 단계를 추가로 포함하는 것인 방법
11 11
제10항에 있어서, 상기 정제는 음이온 교환 크로마토 그래피, 소수성 상호작용 크로마토그래피, 음이온 교환 크로마토그래피 및 젤여과 크로마토그래피의 순서로 정제하는 것인 방법
12 12
(ⅰ) 제1항, 제3항 및 제5항 중 어느 한 항에 따른 인공 단백질 분비융합인자를 포함하는 라이브러리에 목적하는 인간 성장호르몬(hGH) 단백질의 유전자를 도입하여 각각의 발현벡터를 수득하는 단계; (ⅱ) 상기 각 발현벡터를 효모에 도입하여 각각의 형질전환체를 수득하는 단계;(ⅲ) 수득한 각 형질전환체를 배양하여 인간 성장호르몬(hGH) 단백질을 분비생산하는 단계; (ⅳ) 분비생산된 인간 성장호르몬(hGH) 단백질의 양에 따라 인간 성장호르몬(hGH) 단백질의 분비생산 효율이 우수한 형질전환체를 선별하는 단계; 및 (ⅴ) 상기 선별된 형질전환체에 포함된 발현벡터를 분석하여 프리-분비시그널 및 프로-분비시그널의 조합을 결정하는 단계를 포함하는, 인간 성장호르몬(hGH) 단백질의 분비생산에 적합한 인공 단백질 분비융합인자의 스크리닝 방법
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패밀리정보가 없습니다
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 한국생명공학연구원 주요사업(연구개발과제) TFP 기술기반 대규모 단백질 맞춤형 생산 및 산업화
2 지식경제부 한국생명공학연구원 산업원천기술개발사업(산업기술) 인체성장호르몬 재설계 및 고효율 생산기술개발