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(a) 호기성 조건에서 통성 혐기성 미생물을 배양시키는 단계;(b) 상기 통성 혐기성 미생물을 고정화 담체에 고정화시키는 단계; 및(c) 혐기성 조건에서 폐글리세롤(crude glycerol)이 포함되는 배지에서 상기 고정화된 통성 혐기성 미생물을 배양시키는 단계를 포함하는 폐글리세롤을 이용한 수소 생산방법
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청구항 1에 있어서, 상기 통성 혐기성 미생물을 고정화 담체에 고정화시키는 단계 (b) 는 상기 통성 혐기성 미생물 및 고정화 담체를 140 내지 170℃ 온도 조건에서 혼합하고, 냉각시키는 것을 특징으로 하는 폐글리세롤을 이용한 수소 생산방법
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청구항 1에 있어서, 상기 고정화 담체는 한천(agar)용액, 알지네이트(alginate)용액, 젤라틴(gelatin)용액 및 κ-카라기난(κ-carrageenan)용액으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 폐글리세롤을 이용한 수소 생산방법
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청구항 3에 있어서, 상기 한천(agar)용액은 1 내지 5%(w/v) 한천용액인 것을 특징으로 하는 폐글리세롤을 이용한 수소 생산방법
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청구항 2에 있어서, 상기 냉각은 상기 통성 혐기성 미생물 및 한천(agar)용액을 -10℃ 내지 25℃ 오일(oil)에서 반응시간 60분 이하로 침적시키는 것을 특징으로 하는 폐글리세롤을 이용한 수소 생산방법
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청구항 1에 있어서, 상기 통성 혐기성 미생물이 엔테로박터 에어로게네스(Enterobacter aerogenes) 또는 대장균(Escherichia coli)인 것을 특징으로 하는 폐글리세롤을 이용한 수소 생산방법
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청구항 1에 있어서, 상기 고정화된 통성 혐기성 미생물을 배양시키는 단계 (c) 는 혐기성 조건에서 4 내지 8g/L 인산이수소칼륨(KH2PO4), 4 내지 8g/L 펩톤(peptone) 및 160 내지 200mM 폐글리세롤(crude glycerol)을 포함하는 배지에서 상기 고정화된 통성 혐기성 미생물을 배양시키는 단계를 포함하는 폐글리세롤을 이용한 수소 생산방법
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청구항 7에 있어서, 상기 배지는 12 내지 16g/L 인산수소칼륨(K2HPO4), 1 내지 3g/L 황산암모늄((NH4)2SO4), 0
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청구항 1에 있어서, 상기 고정화된 통성 혐기성 미생물을 배양시키는 단계 (c) 는 30 내지 40℃에서 50 내지 200rpm으로 교반하는 것이 포함되는 것을 특징으로 하는 폐글리세롤을 이용한 수소 생산방법
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청구항 1에 있어서, 상기 호기성 조건에서 배양시킨 통성 혐기성 미생물의 흡광도(Optical density, O
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청구항 1에 있어서, 상기 통성 혐기성 미생물 및 한천(agar)용액의 중량비가 5:1 내지 20:1인 것을 특징으로 하는 폐글리세롤을 이용한 수소 생산방법
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