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세포막에 함유되는 당쇄를 질량분석학적으로 검출하기 위한 세포막의 선택적 분리방법

  • 기술번호 : KST2014053832
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  • 전화번호 :
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 세포막을 선택적으로 분리하는 방법에 관한 것으로서, 좀 더 구체적으로, 본 발명은 세포막에 함유되는 단백질을 질량분석학적으로 검출하기 위한 세포막의 선택적 분리방법에 관한 것이다.
Int. CL C12Q 1/00 (2006.01) C12Q 1/34 (2006.01) C12N 13/00 (2006.01)
CPC C07H 1/06(2013.01) C07H 1/06(2013.01) C07H 1/06(2013.01) C07H 1/06(2013.01) C07H 1/06(2013.01)
출원번호/일자 1020120036738 (2012.04.09)
출원인 충남대학교산학협력단
등록번호/일자 10-1456093-0000 (2014.10.23)
공개번호/일자 10-2013-0114407 (2013.10.18) 문서열기
공고번호/일자 (20141112) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2012.04.09)
심사청구항수 6

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 충남대학교산학협력단 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 안현주 대한민국 대전광역시 유성구
2 칼리토 레브릴라 미국 캘리포니아대학
3 유종신 대한민국 서울특별시 강남구
4 박건욱 대한민국 충청북도 청원군

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 강성혜 대한민국 대전 유성구 지족로***번길 **, ***-*호 (지족동, 성훈프라자)(아이앤아이특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 충남대학교산학협력단 대전광역시 유성구
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2012.04.09 수리 (Accepted) 1-1-2012-0281537-70
2 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2012.04.10 수리 (Accepted) 1-1-2012-0284985-25
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2013.04.01 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2013.05.06 수리 (Accepted) 9-1-2013-0031303-40
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2013.09.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0676609-04
6 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2013.12.02 수리 (Accepted) 1-1-2013-1098328-54
7 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2013.12.20 수리 (Accepted) 1-1-2013-1167893-25
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2013.12.26 수리 (Accepted) 4-1-2013-5174286-48
9 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2014.02.03 수리 (Accepted) 1-1-2014-0102691-64
10 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2014.02.28 수리 (Accepted) 1-1-2014-0201056-36
11 지정기간연장관련안내서
Notification for Extension of Designated Period		 2014.03.05 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2014-0039383-32
12 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2014.03.28 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2014-0299187-27
13 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2014.03.28 수리 (Accepted) 1-1-2014-0299192-56
14 등록결정서
Decision to grant		 2014.08.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0588882-99
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.09.01 수리 (Accepted) 4-1-2015-5116889-90
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.09.01 수리 (Accepted) 4-1-2015-5116888-44
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
a) 세포에 수산화나트륨 또는 수산화칼륨 중 1종 이상, 자당 및 프로테아제 억제자를 포함하고 계면활성제 및 킬레이팅제를 포함하지 않는 균질화 완충액을 가하는 단계;b) 상기 완충액을 가한 세포가 담긴 용기를 얼음 위에 놓고 초음파 처리하여 세포를 파괴하는 단계;c) 상기 초음파 처리로 얻어진 세포 용균액을 원심분리하여 핵 분획과 잔해를 제거하는 단계; d) 상기 c) 단계에서 얻어진 상청액에 수산화나트륨 또는 수산화칼륨 중 1종 이상, 자당 및 프로테아제 억제자를 포함하고 계면활성제 및 킬레이팅제를 포함하지 않는 균질화 완충액을 가하는 단계;e) 상기 d) 단계에서 얻어진 상청액을 초원심분리하여 세포질 분획을 제거하는 단계;f) 상기 e) 단계에서 얻어진 침전물을 Na2CO3 (pH 11) 용액에 재현탁하여 마이크로좀을 파괴하는 단계;g) 상기 f) 단계에서 얻어진 시료를 2회 이상 초원심분리하여 세포질 분획이 포함된 상청액을 제거하는 단계; 및h) 상기 g) 단계에서 얻어진 펠렛 세포막 분획을 분리하는 단계;를 포함하는, 세포막에 함유되는 당쇄를 질량분석학적으로 검출하기 위한 세포막의 선택적 분리방법
2 2
제1항에 있어서,상기 a) 단계 및 d) 단계의 균질화 완충액은 헤페스 (Hepes) 완충액 또는 트리스 (Tris) 완충액임을 특징으로 하는, 세포막에 함유되는 당쇄를 질량분석학적으로 검출하기 위한 세포막의 선택적 분리방법
3 3
가) 제1항의 방법으로 분리된 세포막 분획에 중탄산 암모늄 (NH4HCO3) 및 DTT (Dithiothreitol)를 가하는 단계;나) 상기 가) 단계를 거친 세포막 분획을 가열하여 단백질을 변성시키는 단계;다) 상기 나) 단계에서 단백질을 변성시킨 세포막 분획을 실온으로 식힌 후 펩타이드 N-글라이코시데이즈를 가하고 배양하는 단계; 라) 상기 다) 배양 단계 후 세포막 분획에 차가운 에탄올을 가하고 동결하는 단계; 및마) 동결된 세포막 분획을 원심분리하여 단백질로부터 N-당쇄를 분리하는 단계;를 포함하는, 세포막에 함유되는 N-당쇄의 선택적 분리방법
4 4
제3항에 있어서,바) 초순수, 아세토나이트릴 함유 트리플루오로초산 및 초순수로 흑연 처리한 탄소 카트리지(Graphitized Carbon Cartridge, 이하 'GCC'라 함)를 순차적으로 세척하는 단계; 사) 상기 마) 단계에서 분리한 N-당쇄를 GCC (Graphitized Carbon Cartridge)에 넣고 초순수를 흘려주어 염을 제거하는 단계;아) 상기 사) 단계 이후 10% (v/v) 아세토나이트릴 수용액, 20% (v/v) 아세토나이트릴 수용액 및 40% (v/v) 아세토나이트릴과 0
5 5
가) 제1항의 방법으로 분리된 세포막 분획에 알칼라인 보로하이드라이드 용액을 가하는 단계; 나) 상기 가) 단계에서 얻어진 세포막 분획을 가열하여 단백질을 변성시키는 단계; 및다) 상기 나) 단계에서 얻어진 단백질을 변성시킨 세포막 분획에 얼음 수조 내에서 염산 용액을 가하여 반응을 중지시키고 과량의 알칼라인 보로하이드라이드를 제거하여 O-당쇄를 분리하는 단계;를 포함하는, 세포막에 함유되는 O-당쇄의 선택적 분리방법
6 6
제5항에 있어서,라) 초순수, 아세토나이트릴 함유 트리플루오로초산 및 초순수로 흑연 처리한 탄소 카트리지(Graphitized Carbon Cartridge, 이하 'GCC'라 함)를 순차적으로 세척하는 단계; 마) 상기 라) 단계에서 분리한 O-당쇄를 GCC (Graphitized Carbon Cartridge)에 넣고 초순수를 흘려주어 염을 제거하는 단계;바) 상기 마) 단계 이후 10% (v/v) 아세토나이트릴 수용액, 20% (v/v) 아세토나이트릴 수용액 및 40% (v/v) 아세토나이트릴과 0
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 한국기초과학지원연구원 첨단의료기기사업본부-신기술융합형 성장동력사업 MALDI 질량분석기반 암세포 표지자 발굴 및 암진단 시스템 개발
2 교육과학기술부 한국기초과학지원연구원 특화전문대학원 연계학연협력사업 분석과학기술 전문대학원 연계 학연협력 지원사업