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합성 micro RNA의 표전유전체 검출 방법

  • 기술번호 : KST2014056263
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 특정 microRNA의 새로운 표적유전체(target mRNA)를 검출하는 방법으로 라이브러리 시스템상에서 microRNA의 표적유전체의 단백질합성(translation)을 선택적으로 억제시키고 이 표적유전체의 분리하여 동정하는 새로운 방법이다. 이 과정을 통해 microRNA와 표적유전체를 상관관계를 대량으로 빠르게 확인할 수 있다.따라서 본 발명은 in vitro 상에서 라이브러리 시스템을 직접적으로 활용하여 좀 더 빠르고 간편하게 microRNA의 새로운 표적유전체를 대량으로 검출하는 방법에 관한 것이다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01) C40B 40/06 (2006.01) C12N 15/113 (2010.01)
CPC C12N 15/1086(2013.01) C12N 15/1086(2013.01) C12N 15/1086(2013.01) C12N 15/1086(2013.01) C12N 15/1086(2013.01) C12N 15/1086(2013.01) C12N 15/1086(2013.01) C12N 15/1086(2013.01) C12N 15/1086(2013.01) C12N 15/1086(2013.01)
출원번호/일자 1020100089630 (2010.09.13)
출원인 건국대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1255202-0000 (2013.04.10)
공개번호/일자 10-2012-0027830 (2012.03.22) 문서열기
공고번호/일자 (20130423) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2010.09.13)
심사청구항수 11

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 건국대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 광진구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 안성관 대한민국 서울특별시 광진구
2 이은미 대한민국 경기도 안산시 단원구
3 차화준 대한민국 경기도 수원시 영통구
4 진영우 대한민국 서울특별시 도봉구
5 이재호 대한민국 경기도 의정부시 범골로 **,
6 배승희 대한민국 서울특별시 동대문구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이문섭 대한민국 서울특별시 관악구 남부순환로 ****, ***호 제니스국제특허법률사무소 (봉천동, 청동빌딩)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 건국대학교 산학협력단 서울특별시 광진구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2010.09.13 수리 (Accepted) 1-1-2010-0594333-46
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2012.02.09 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2012.03.21 수리 (Accepted) 9-1-2012-0022057-67
4 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2012.06.01 수리 (Accepted) 4-1-2012-5116974-69
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2012.07.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0430958-86
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2012.09.21 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2012-0766965-95
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2012.09.21 수리 (Accepted) 1-1-2012-0766966-30
8 등록결정서
Decision to grant
2013.01.10 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0019636-49
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번호 청구항
1 1
다음 단계들을 포함하는, 합성 microRNA의 표적 유전체(target mRNA)의 검출방법:a) 시료 생물체의 cDNA 라이브러리를 준비하는 단계;b) 상기 cDNA라이브러리로부터 5`Capping과 3` poly A tailing을 포함하는 RNA라이브러리를 제조하는 단계;c) 상기 제조된 RNA라이브러리를 이용한 시험관내(in vitro) 단백질합성과정 중 합성 microRNA를 투여하는 단계;d) 상기 단백질합성반응에서 합성 microRNA 유무에 따른 단백질 합성량의 변화를 확인하는 단계;e) 합성 microRNA에 의해 단백질합성이 억제된 표적 유전체(target mRNA)를 선별하는 단계
2 2
제 1항에 있어서, 상기 cDNA 라이브러리는 cDNA가 T7 프로모터 또는 SP6 프로모터를 가지는 플라스미드에 삽입되어 있는 것을 특징으로 하는 검출방법
3 3
제 1항에 있어서, 상기 5` Capping과 3` Poly A tailing을 포함하는 RNA라이브러리는 T7 폴리머라제를 이용한 전사과정에서 Cap Analog를 이용하여 5` Capping 하고, 전사후 T4 ligase와 polyA를 이용하여 3` Poly A tailing 을 하는 것을 특징으로 하는 검출방법
4 4
제 1항에 있어서, 상기 시험관내 단백질합성과정은 라이보좀(ribosomes)을 갖는 세포 추출물을 이용하는 것을 특징으로 하는 검출방법
5 5
제 4항에 있어서, 상기 세포 추출물은 동물 적혈구 추출물인 것을 특징으로 하는 검출방법
6 6
제 1항에 있어서, 상기 합성 microRNA는 단일가닥 mature microRNA, 이중가닥 mature microRNA, Pre-microRNA, 또는 Pri-microRNA인 것을 특징으로 하는 검출방법
7 7
제 1항에 있어서, 상기 합성 microRNA는 0
8 8
제 1항에 있어서, 상기 단백질 합성량은 SDS-PAGE 및 단백질 표지에 의해 측정되는 것을 특징으로 하는 검출방법
9 9
제 8항에 있어서, 상기 단백질 표지는 방사선동위원소를 갖는 아미노산, 바이오틴(biotin), 또는 형광염색으로 표지하는 것을 특징으로 하는 검출방법
10 10
제 1항에 있어서, 상기 표적 유전체(target mRNA)는 단백질합성이 억제된 cDNA의 시퀀싱을 통해 동정하는 것을 특징으로 하는 검출방법
11 11
제 1항에 있어서, 상기 cDNA 라이브러리 및 RNA라이브러리의 제조 및 시험관내(in vitro) 단백질합성은 다중 웰(well) 플레이트에서 실시하여 고속스크리닝(high throughput screening)법으로 표적유전체를 검출하는 것을 특징으로 하는 검출방법
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1 WO2012036350 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 건국대학교 산학협력단 원자력 연구개발사업 방사선 특이적 microRNA 및 이의 표적유전체를 활용한 방사선의 생체영향 규명