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(a) 평판 및 상기 평판의 적어도 일면에 흡착제가 코팅되어 박층으로 형성된 고정상을 포함하는 박층크로마토그래피 플레이트를 준비하는 단계;(b) 상기 박층크로마토그래피 플레이트의 고정상에 위치한 베이스라인에 사포닌 및 당류를 포함하는 액상 조성물을 도포하고 건조하는 단계;(c) 비극성 유기용매, 극성 유기용매 및 물로 이루어진 혼합용매가 하부에 담긴 전개용 챔버를 상기 혼합용매로 포화시키는 단계;(d) 상기 액상 조성물이 도포된 박층크로마토그래피 플레이트를 상기 혼합용매를 이동상으로 하여 혼합용매로 포화된 전개용 챔버 안에서 1차 전개하는 단계;(e) 상기 1차 전개된 박층크로마토그래피 플레이트를 건조하여 박층크로마토그래피 플레이트에 존재하는 혼합용매를 제거하는 단계; 및(f) 상기 혼합용매가 제거된 박층크로마토그래피 플레이트를 강산 수용액을 이동상으로 하여 다른 전개용 챔버 안에서 2차 전개하는 단계를 포함하고,상기 1차 전개 및 2차 전개시 전개용 챔버는 밀폐된 상태인 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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제 1항에 있어서, (g) 상기 2차 전개된 박층크로마토그래피 플레이트를 가열하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 흡착제는 실리카겔인 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 사포닌 및 당류를 포함하는 액상 조성물은 Glycine 속 식물로부터 추출된 것을 특징으로 하는 사포닌의 분리방법
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제 4항에 있어서, 상기 사포닌 및 당류를 포함하는 액상 조성물은 콩 추출물인 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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제 5항에 있어서, 상기 콩 추출물은 콩 종자의 배축 추출물인 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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7
제 5항에 있어서, 상기 콩 추출물은 물, 극성 유기용매 또는 수용성 유기용매에서 선택되는 적어도 1종의 추출용매로 추출된 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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제 7항에 있어서, 상기 추출용매는 탄소수가 1~5인 저급알코올 및 물로 이루어진 수용성 유기용매인 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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제 8항에 있어서, 상기 수용성 유기용매는 메탄올 수용액이고, 상기 메탄올 수용액의 메탄올의 함량이 적어도 50wt%인 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 혼합용매의 비극성 유기용매는 클로로포름이고, 극성 유기용매는 탄소수가 1~5인 저급알코올인 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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제 10항에 있어서, 상기 혼합용매는 클로로포름, 메탄올 및 물로 이루어지고, 상기 혼합용매에서 클로로포름 : 메탄올 : 물의 비가 부피를 기준으로 (12~14) : (6~8) : (1~3)인 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 전개용 챔버의 포화 시간은 2시간 내지 5시간인 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 1차 전개 시간은 50분 내지 90분인 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 혼합용매를 제거하는 단계는 100~150℃에서 적어도 5분 이상 수행되는 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 강산 수용액은 황산 수용액인 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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제 15항에 있어서, 상기 황산 수용액의 황산 함량은 5~10w%인 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 분리방법
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17
(a) 평판 및 상기 평판의 적어도 일면에 흡착제가 코팅되어 박층으로 형성된 고정상을 포함하는 박층크로마토그래피 플레이트를 준비하는 단계;(b) 상기 박층크로마토그래피 플레이트의 고정상에 위치한 베이스라인에 사포닌 및 당류를 포함하는 액상 조성물을 도포하고 건조하는 단계;(c) 비극성 유기용매, 극성 유기용매 및 물로 이루어진 혼합용매가 하부에 담긴 전개용 챔버를 상기 혼합용매로 포화시키는 단계;(d) 상기 액상 조성물이 도포된 박층크로마토그래피 플레이트를 상기 혼합용매를 이동상으로 하여 혼합용매로 포화된 전개용 챔버 안에서 1차 전개하는 단계;(e) 상기 1차 전개된 박층크로마토그래피 플레이트를 건조하여 박층크로마토그래피 플레이트에 존재하는 혼합용매를 제거하는 단계;(f) 상기 혼합용매가 제거된 박층크로마토그래피 플레이트를 강산 수용액을 이동상으로 하여 다른 전개용 챔버 안에서 2차 전개하는 단계;(g) 상기 2차 전개된 박층크로마토그래피 플레이트를 가열하는 단계; 및(h) 상기 가열된 박층크로마토그래피 플레이트 상에 표시된 사포닌 밴드의 이미지를 화상 분석기로 분석하는 단계를 포함하고,상기 1차 전개 및 2차 전개시 전개용 챔버는 밀폐된 상태인 것을 특징으로 하는 박층크로마토그래피를 이용한 사포닌의 검출방법
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