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효모에서 인체 상피세포 성장인자를 대량 생산하는 방법

  • 기술번호 : KST2014061351
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 야생형과 동일한 활성을 가지는 hEGF(human epidermal growth factor)를 고농도 및 고순도로 생산하는 방법에 관한 것이다. 구체적으로, 서열번호 14의 폴리펩티드를 코딩하는 핵산 서열이 포함된 hEGF 발현벡터, 상기 발현벡터가 형질전환된 숙주세포, 및 상기 발현벡터를 제조하고, 이를 KEX1 유전자가 결손된 효모에 형질전환하는 단계를 포함하는 hEGF의 생산방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법에 의하면 인간 유래 EGF와 동일한 크기, 활성을 가지는 인간 유래의 EGF를 대량생산할 수 있으며, 이는 의료용, 화장품 등 다양하게 이용될 수 있다.
Int. CL C12N 15/12 (2006.01) C12N 1/19 (2006.01) C12N 15/81 (2006.01) C07K 14/485 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020110114818 (2011.11.04)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-1291241-0000 (2013.07.24)
공개번호/일자 10-2012-0047838 (2012.05.14) 문서열기
공고번호/일자 (20130801) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020100109441   |   2010.11.04
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2011.11.04)
심사청구항수 13

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 손정훈 대한민국 대전광역시 유성구
2 배정훈 대한민국 대전광역시 유성구
3 김미진 대한민국 대전광역시 유성구
4 김현진 대한민국 대전광역시 유성구
5 박순호 대한민국 대전광역시 유성구
6 임광묵 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 손민 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, *층(문정동)(특허법인한얼)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2011.11.04 수리 (Accepted) 1-1-2011-0872414-24
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2012.06.07 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2012.07.16 수리 (Accepted) 9-1-2012-0055602-14
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2012.12.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0780678-61
5 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2013.02.21 수리 (Accepted) 1-1-2013-0159680-41
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2013.03.21 수리 (Accepted) 1-1-2013-0247442-89
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2013.03.21 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2013-0247443-24
8 등록결정서
Decision to grant		 2013.07.19 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0497413-53
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
ⅰ) 서열번호 14의 분리된 폴리펩티드를 코딩하는 핵산 서열이 포함된 hEGF(human epidermal growth factor) 발현벡터를 제조하는 단계; 및 ⅱ) 상기 ⅰ)단계의 발현벡터를 KEX1 유전자가 결손된 효모에 형질전환하는 단계를 포함하는, hEGF의 생산방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 생산되는 hEGF는 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 것인 hEGF의 생산방법
3 3
제1항에 있어서, 상기 발현벡터는 GST, MBP, NusA, 티오레독신(thioredoxin), 유비퀴틴, FLAG, BAP, 6HIS, STREP, CBP, CBD, 및 S-태그로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 친화성 태그(affinity tag)를 코딩하는 핵산서열을 추가로 포함하는 것인 hEGF의 생산방법
4 4
제1항에 있어서, 상기 발현벡터는 효모 kex2p-인식 서열, 포유동물 퓨린-인식 서열, Factor Xa-인식 서열, 엔테로키나아제-인식 서열, 서브틸리신-인식 서열, 담배식각바이러스 프로테아제-인식 서열, 트롬빈-인식 서열, 및 유비퀴틴 가수분해효소-인식 서열로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 프로테아제 인식 서열을 코딩하는 핵산서열을 추가로 포함하는 것인 hEGF의 생산방법
5 5
제1항에 있어서, 상기 발현벡터는 서열번호 14의 분리된 폴리펩티드를 코딩하는 핵산 서열, 친화성 태그를 코딩하는 핵산 서열, 프로테아제 인식 서열을 코딩하는 핵산 서열, hEGF를 코딩하는 핵산 서열이 순차적으로 작동가능하게 연결된 것인 hEGF의 생산방법
6 6
제1항에 있어서, 상기 발현벡터는 도 1에 도시된 개열지도를 갖는 것인 hEGF의 생산방법
7 7
제1항에 있어서, 상기 효모는 캔디다(Candida), 디베리오마이세스(Debaryomyces), 한세눌라(Hansenula), 클루이베로마이세스(Kluyveromyces), 피키아(Pichia), 스키조사카로마이세스(Schizosaccharomyces), 야로이야(Yarrowia), 사카로마이세스(Saccharomyces), 슈완니오마이세스(Schwanniomyces) 및 아르술라(Arxula) 종으로 이루어진 그룹에서 선택되는 것인 hEGF의 생산방법
8 8
제7항에 있어서, 상기 효모는 캔디다 유틸리스(Candida utilis), 캔디다 보이디니(Candida boidinii), 캔디다 알비칸스(Candida albicans), 클루이베로마이세스 락티스(Kluyveromyces lactis), 피키아 파스토리스(Pichia pastoris), 피키아 스티피티스(Pichia stipitis), 스키조카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe), 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae), 한세눌라 폴리모르파(Hansenula polymorpha), 야로이야 리포폴리티카(Yarrowia lipolytica), 슈완니오마이세스 옥시덴탈리스(Schwanniomyces occidentalis) 및 아르술라 아데니니모란스(Arxula adeninivorans)로 이루어진 그룹에서 선택되는 것인 hEGF의 생산방법
9 9
제5항에 있어서, 엔테로키나아제(enterokinase)를 처리하여 서열번호 14의 폴리펩티드와 hEGF를 분리시키는 단계를 추가로 포함하는 것인 hEGF의 생산방법
10 10
분리된 서열번호 14의 폴리펩티드를 코딩하는 핵산 서열 및 hEGF를 코딩하는 핵산 서열이 작동가능하게 연결된 hEGF 발현벡터
11 11
제10항에 있어서, 상기 발현벡터는 도 1에 도시된 개열지도를 갖는 것인 hEGF 발현벡터
12 12
제10항 또는 제11항의 벡터가 형질전환된 숙주 세포
13 13
제12항에 있어서, 상기 세포는 KEX1 유전자가 결손된 효모 세포인 것을 특징으로 하는 숙주 세포
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 US08986956 US 미국 FAMILY
2 US20130323785 US 미국 FAMILY
3 WO2012060666 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY
4 WO2012060666 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 US2013323785 US 미국 DOCDBFAMILY
2 US8986956 US 미국 DOCDBFAMILY
3 WO2012060666 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
4 WO2012060666 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 지식경제부 한국생명공학연구원 대덕특구 전문클러스터형 사업화 지원사업 효모 TFP 원천기술을 활용한 맞춤형 단백질 대량생산
2 과학기술부 한국생명공학연구원 주요사업(연구개발과제) 저탄소 녹색성장을 위한 바이오매스/에너지개발