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초기 배아 및 줄기 세포를 포함한 역분화 세포의 양질성 판단방법

  • 기술번호 : KST2014061357
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 초기 배아 및 줄기세포를 포함한 역분화 세포의 양질성(quality) 판단 방법에 관한 것으로, 본 발명은 체내수정, 체외수정, 체내발달, 체외발달, 처녀생식, 핵치환복제 및 배양조건과 같은 다양한 환경조건에서 유래된 표준동물 배아가 표준과 비교하여 어느 정도의 양질을 가지는 판단하는 방법을 발견하여 초기 배 발생에서 그 기능과 중요성이 확인된 후성유전 재편(epigenetic reprogramming) 관련 대상으로 다중 PCR를 통해 조사 대상 유전자를 집단화하여 그 발현을 조사하였고 개별 배반포별로 분자생물학적 분석하였으며 개별 배반포내 유전자간 상대적 발현 수준을 측정하였고 유전자 발현 관련 배반포간 개체변이를 측정하였으며 복제효율 또는 iPS 효율을 높이는 다양한 처리로 나타나는 효험(efficacy)에 대해 개별 방법 간 차이를 정량화할 수 있으므로 유용하게 이용할 수 있다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01)
CPC C12Q 1/686(2013.01) C12Q 1/686(2013.01)
출원번호/일자 1020120105720 (2012.09.24)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-1599523-0000 (2016.02.25)
공개번호/일자 10-2014-0043539 (2014.04.10) 문서열기
공고번호/일자 (20160303) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2013.08.22)
심사청구항수 11

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 강용국 대한민국 대전광역시 유성구
2 박정선 대한민국 대전광역시 유성구
3 권수진 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2012.09.24 수리 (Accepted) 1-1-2012-0772507-94
2 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)		 2013.08.22 수리 (Accepted) 1-1-2013-0765079-13
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2014.03.06 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2014.04.09 수리 (Accepted) 9-1-2014-0032632-69
5 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2015.02.23 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0119862-43
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2015.03.12 수리 (Accepted) 1-1-2015-0242682-37
8 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2015.03.12 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2015-0242683-83
9 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2015.05.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0334590-62
10 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2015.06.26 수리 (Accepted) 1-1-2015-0620225-52
11 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2015.06.26 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2015-0620226-08
12 최후의견제출통지서
Notification of reason for final refusal		 2015.10.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0741442-59
13 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2015.12.16 수리 (Accepted) 1-1-2015-1233032-04
14 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2015.12.16 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2015-1233047-88
15 등록결정서
Decision to grant		 2016.02.23 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0141667-42
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번호 청구항
1 1
1) 하기 i) 내지 iii) 중 어느 하나의 실험군 및 대조군을 각각 준비하는 단계:i) 실험군은 체외배양 배반포 및 대조군은 인간을 제외한 포유류의 체내배양 배반포;ⅱ) 실험군은 체외수정 후 체외배양 배반포 및 대조군은 인간을 제외한 포유류의 체내배양 배반포; 및ⅲ) 실험군은 복제수정란 및 대조군은 체외수정란; 2) 상기 단계 1)의 실험군 및 대조군으로부터 각각 유래된 단일 배아 또는 단일 세포 콜로니로부터 하기 15개의 유전자를 각각 증폭할 수 있는 프라이머들을 이용하여 다중 RT-PCR을 수행하여 상기 15개 유전자들의 발현 정도를 분석하는 단계:Dnmt1(DNA methyltransferase 1), Dnmt3a(DNA methyltransferase 3a), Dnmt3b(DNA methyltransferase 3b), G9a, GLP(G9a-like protein), ESET(ERG-associated protein with a SET domain), Suv39h1(suppressor of variegation 3-9 homolog 1), Eed(embryonic ectoderm development), Suz12(suppressor of zeste 12 homolog ), Bmi1(B lymphoma Mo-MLV insertion region 1 homolog), YY1(yin-yang protein), LSD1(lysine (K)-specific demethylase 1), JHDM2A(JmjC-Containing H3K9 Demethylase 2A), JHDM3A(JmjC-Containing H3K9 Demethylase 3A) 및 JMJD3(Jumonji domain 3); 및3) 상기 단계 2)에서 분석한 실험군의 유전자 발현 정도를 대조군의 유전자 발현 정도와 비교하여 하기 a) 내지 c)로 판정하는 단계:를 포함하는 배아 세포의 복제 효율을 증가시키는 양질성(quality) 판단 방법
2 2
삭제
3 3
1) 하기의 실험군 및 대조군을 각각 준비하는 단계:실험군은 역분화 만능 줄기 세포 유래 콜로니 및 대조군은 배아줄기세포 유래 콜로니;2) 상기 단계 1)의 실험군 및 대조군으로부터 각각 유래된 단일 세포 콜로니로부터 하기 15개의 유전자를 각각 증폭할 수 있는 프라이머들을 이용하여 다중 RT-PCR을 수행하여 상기 15개 유전자들의 발현 정도를 분석하는 단계:Dnmt1(DNA methyltransferase 1), Dnmt3a(DNA methyltransferase 3a), Dnmt3b(DNA methyltransferase 3b), G9a, GLP(G9a-like protein), ESET(ERG-associated protein with a SET domain), Suv39h1(suppressor of variegation 3-9 homolog 1), Eed(embryonic ectoderm development), Suz12(suppressor of zeste 12 homolog ), Bmi1(B lymphoma Mo-MLV insertion region 1 homolog), YY1(yin-yang protein), LSD1(lysine (K)-specific demethylase 1), JHDM2A(JmjC-Containing H3K9 Demethylase 2A), JHDM3A(JmjC-Containing H3K9 Demethylase 3A) 및 JMJD3(Jumonji domain 3); 및3) 상기 단계 2)에서 분석한 실험군의 유전자 발현 정도를 대조군의 유전자 발현 정도와 비교하여 하기 a)로 판정하는 단계:를 포함하는 역분화 세포의 iPS(induced-pluripotent stem cell) 효율을 증가시키는 양질성(quality) 판단 방법
4 4
제 1항에 있어서, 상기 단계 3)의 유전자는 후성유전 재편(epigenetic reprogramming) 관련 유전자인 것을 특징으로 하는 배아 세포의 복제 효율을 증가시키는 양질성 판단 방법
5 5
제 1항에 있어서, 상기 단계 3)의 유전자 중에서 Dnmt1, Dnmt3a 및 Dnmt3b은 DNA 메틸화 효소이고, G9a, GLP, ESET 및 Suv39h1은 히스톤 메틸화 효소이며, Eed, Suz12, Bmil 및 YY1은 폴리콤 단백질이고, LSD1, JHDM2A, JHDM3A 및 JMJD3은 히스톤 탈메틸화 효소인 것을 특징으로 하는 배아 세포의 복제 효율을 증가시키는 양질성 판단 방법
6 6
제 1항에 있어서, 상기 단계 2)의 프라이머는 서열번호 1 내지 서열번호 60 중 어느 하나의 염기서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 배아 세포의 복제 효율을 증가시키는 양질성(quality) 판단 방법
7 7
삭제
8 8
제 1항에 있어서, 상기 단계 2)의 다중 RT-PCR은 1) 서열번호 1 내지 서열번호 60의 프라이머를 이용하여 동시에 1차 중합효소반응을 시키는 단계; 및2) 상기 단계 1)의 1차 중합효소반응 생성물을 희석하고 2차 중합효소반응을 위한 주형으로 사용하여 네스티드(nested) 중합효소반응 프라이머 쌍으로 이차 네스티드 중합효소반응을 시키는 것을 특징으로 하는 배아 세포의 복제 효율을 증가시키는 양질성 판단 방법
9 9
하기 15개의 유전자를 각각 증폭할 수 있는 프라이머를 포함하는 역분화 세포의 iPS(induced-pluripotent stem cell) 효율을 증가시키는 양질성 판단용 키트:Dnmt1(DNA methyltransferase 1), Dnmt3a(DNA methyltransferase 3a), Dnmt3b(DNA methyltransferase 3b), G9a, GLP(G9a-like protein), ESET(ERG-associated protein with a SET domain), Suv39h1(suppressor of variegation 3-9 homolog 1), Eed(embryonic ectoderm development), Suz12(suppressor of zeste 12 homolog ), Bmi1(B lymphoma Mo-MLV insertion region 1 homolog), YY1(yin-yang protein), LSD1(lysine (K)-specific demethylase 1), JHDM2A(JmjC-Containing H3K9 Demethylase 2A), JHDM3A(JmjC-Containing H3K9 Demethylase 3A) 및 JMJD3(Jumonji domain 3)
10 10
하기 15개의 유전자를 각각 증폭할 수 있는 프라이머를 포함하는 배반포 또는 수정란 세포의 복제 효율을 증가시키는 양질성 판단용 키트:Dnmt1(DNA methyltransferase 1), Dnmt3a(DNA methyltransferase 3a), Dnmt3b(DNA methyltransferase 3b), G9aGLP(G9a-like protein), ESET(ERG-associated protein with a SET domain), Suv39h1(suppressor of variegation 3-9 homolog 1), Eed(embryonic ectoderm development), Suz12(suppressor of zeste 12 homolog ), Bmi1(B lymphoma Mo-MLV insertion region 1 homolog), YY1(yin-yang protein), LSD1(lysine (K)-specific demethylase 1), JHDM2A(JmjC-Containing H3K9 Demethylase 2A), JHDM3A(JmjC-Containing H3K9 Demethylase 3A) 및 JMJD3(Jumonji domain 3)
11 11
제 10항에 있어서, 상기 프라이머는 서열번호 1 내지 서열번호 60 중 어느 하나의 염기서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 배반포 또는 수정란 세포의 복제 효율을 증가시키는 양질성 판단용 키트
12 12
하기 15개의 유전자를 각각 증폭할 수 있는 프라이머들을 포함하는 배반포 또는 수정란 세포의 복제 효율을 증가시키는 양질성 판단용 바이오칩:Dnmt1(DNA methyltransferase 1), Dnmt3a(DNA methyltransferase 3a), Dnmt3b(DNA methyltransferase 3b), G9aGLP(G9a-like protein), ESET(ERG-associated protein with a SET domain), Suv39h1(suppressor of variegation 3-9 homolog 1), Eed(embryonic ectoderm development), Suz12(suppressor of zeste 12 homolog ), Bmi1(B lymphoma Mo-MLV insertion region 1 homolog), YY1(yin-yang protein), LSD1(lysine (K)-specific demethylase 1), JHDM2A(JmjC-Containing H3K9 Demethylase 2A), JHDM3A(JmjC-Containing H3K9 Demethylase 3A) 및 JMJD3(Jumonji domain 3)
13 13
제 12항에 있어서, 상기 프라이머는 서열번호 1 내지 서열번호 60 중 어느 하나의 염기서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 배반포 또는 수정란 세포의 복제 효율을 증가시키는 양질성 판단용 바이오칩
지정국 정보가 없습니다
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 농림수산식품부(농림부) 한국생명공학연구원 차세대바이오그린21사업 복제배아의 리프로그래밍 촉진 연구
2 교육과학기술부 한국생명공학연구원 원천기술개발사업 후성체계 변형단백질을 활용한 역분화 촉진 방법 개발