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생체 내 단백질 간 상호작용의 분석 방법

  • 기술번호 : KST2014061534
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 세포 내 단백질 간 상호작용을 분석하는 방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로 목적 (bait) 단백질, 제1 형광 단백질 및 CBD (cellulose-binding domain) 단백질로 구성된 제1 융합 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 제1 구조물, 및 표적 (prey) 단백질 및 제2 형광 단백질로 구성된 제2 융합 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 제2 구조물을 포함하는 세포를 제공하고, 상기 융합 단백질을 발현시켜 세포 내에서 봉입체 (inclusion body)를 형성시킨 다음, 형광 단백질의 형광 신호를 측정하여 세포 내 단백질 간 상호작용을 분석하는 방법, 상기 구조물들을 포함하는 세포를 이용하여 목적 단백질과 결합하는 표적 단백질을 분리하는 방법, 상기 세포, 및 상기 구조물을 포함하는 단백질 간 상호작용 분석용 키트에 관한 것이다.
Int. CL G01N 33/68 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01)
CPC C12Q 1/6886(2013.01)
출원번호/일자 1020120063804 (2012.06.14)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-1519627-0000 (2015.05.06)
공개번호/일자 10-2013-0023057 (2013.03.07) 문서열기
공고번호/일자 (20150512) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020110086057   |   2011.08.26
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2012.06.14)
심사청구항수 18

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이승구 대한민국 대전광역시 유성구
2 최수림 대한민국 대전광역시 유성구
3 감종식 대한민국 대전광역시 유성구
4 송재준 대한민국 대전광역시 유성구
5 이상준 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 손민 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, *층(문정동)(특허법인한얼)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2012.06.14 수리 (Accepted) 1-1-2012-0473993-79
2 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2012.07.06 수리 (Accepted) 1-1-2012-0543738-18
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2013.07.02 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2013.08.09 수리 (Accepted) 9-1-2013-0065789-45
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2013.10.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0744796-41
6 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2013.12.27 수리 (Accepted) 1-1-2013-1199233-17
7 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2014.01.28 수리 (Accepted) 1-1-2014-0093601-64
8 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2014.02.28 수리 (Accepted) 1-1-2014-0204423-15
9 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2014.03.28 수리 (Accepted) 1-1-2014-0299650-66
10 지정기간연장관련안내서
Notification for Extension of Designated Period		 2014.03.31 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2014-0054562-16
11 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2014.04.29 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2014-0410974-71
12 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2014.04.29 수리 (Accepted) 1-1-2014-0410973-25
13 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2014.09.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0641593-87
14 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2014.11.24 수리 (Accepted) 1-1-2014-1134940-56
15 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2014.12.22 수리 (Accepted) 1-1-2014-1243529-27
16 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2015.01.22 수리 (Accepted) 1-1-2015-0068328-52
17 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2015.01.22 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2015-0068329-08
18 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
19 등록결정서
Decision to grant		 2015.04.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0289170-54
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(i) 목적 (bait) 단백질, 제1 형광 단백질 및 CBD (cellulose-binding domain) 단백질로 구성된 제1 융합 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 제1 구조물, 및 표적 (prey) 단백질 및 제2 형광 단백질로 구성된 제2 융합 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 제2 구조물을 포함하는, 진핵 세포를 제공하는 단계;(ii) 상기 융합 단백질을 발현시켜 진핵 세포 내에서 봉입체 (inclusion body)를 형성시키는 단계; 및(iii) 목적 단백질과 표적 단백질의 상호작용을 형광 단백질의 형광 신호로 측정하는 단계를 포함하는, 진핵 세포 내 단백질 간 상호작용을 분석하는 방법
2 2
제1항에 있어서, (iv) 봉입체에 형광이 응집되면 목적 단백질 및 표적 단백질이 상호작용하는 것으로 판단하는 단계를 추가로 포함하는 방법
3 3
제1항에 있어서, 상기 방법은 목적 단백질과 표적 단백질 간의 상호작용을 형광 단백질의 형광으로 정량적으로 분석하는 것인 방법
4 4
제1항에 있어서, 상기 (i) 단계의 제1 구조물 및 제2 구조물은 별개의 벡터 또는 하나의 벡터 내에 존재하는 것인 방법
5 5
제4항에 있어서, 상기 제1 구조물 및 제2 구조물이 IRES (internal ribosome entry site) 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드로 연결되어 하나의 벡터에 존재하는 것인 방법
6 6
제5항에 있어서, 상기 IRES는 서열번호 11의 뉴클레오티드 서열로 기재되는 것인 방법
7 7
제1항에 있어서, 상기 목적 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 표적 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드는 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하는 라이브러리로부터 유래된 것인 방법
8 8
제1항에 있어서, 상기 제1 형광 단백질 및 제2 형광 단백질은 서로 다른 형광을 나타내는 것을 특징으로 하는 방법
9 9
제1항에 있어서, 상기 형광 단백질은 GFP (Green Fluorescent Protein), EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein), mGFP (modified green fluorescent protein), RFP (Red Fluorescent Protein), mRFP (Monomeric Red Fluorescent Protein), ERFP (Enhanced Red Fluorescent Protein), DsRed (Discosoma sp
10 10
제1항에 있어서, 상기 형광 검출은 형광 현미경 또는 유세포분석기로 수행하는 것인 방법
11 11
(i) 목적 (bait) 단백질, 제1 형광 단백질 및 CBD (cellulose-binding domain) 단백질로 구성된 제1 융합 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 제1 구조물, 및 표적 (prey) 단백질 및 제2 형광 단백질로 구성된 제2 융합 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 제2 구조물을 포함하는 진핵 세포를 제공하는 단계;(ii) 상기 융합 단백질을 발현시켜 진핵 세포 내에서 봉입체 (inclusion body)를 형성시키는 단계; 및(iii) 목적 단백질에 결합된 표적 단백질을 분리하는 단계를 포함하는, 목적 단백질과 상호 작용하는 표적 단백질을 분리하는 방법
12 12
제11항에 있어서, 상기 (i) 단계의 제1 구조물 및 제2 구조물은 별개의 벡터 또는 하나의 벡터 내에 존재하는 것인 방법
13 13
제12항에 있어서, 상기 제1 구조물 및 제2 구조물이 IRES (internal ribosome entry site) 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드로 연결되어 하나의 벡터에 존재하는 것인 방법
14 14
제13항에 있어서, 상기 IRES는 서열번호 11의 뉴클레오티드 서열로 기재되는 것인 방법
15 15
제11항에 있어서, 상기 표적 단백질의 분리는 유세포분석기를 이용하는 것인 방법
16 16
제11항에 있어서, 상기 목적 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 표적 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드는 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하는 라이브러리로부터 유래된 것인 방법
17 17
제11항에 있어서, 상기 제1 형광 단백질 및 제2 형광 단백질은 서로 다른 형광을 나타내는 것을 특징으로 하는 방법
18 18
제11항에 있어서, 상기 형광 단백질은 GFP (Green Fluorescent Protein), EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein), mGFP (modified green fluorescent protein), RFP (Red Fluorescent Protein), mRFP (Monomeric Red Fluorescent Protein), ERFP (Enhanced Red Fluorescent Protein), DsRed (Discosoma sp
19 19
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20 20
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21 21
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 US08877446 US 미국 FAMILY
2 US20130052660 US 미국 FAMILY

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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 농림수산식품부 한국생명공학연구원 차세대바이오그린21사업 인공 유전자 회로 기술 개발
2 농림수산식품부 한국생명공학연구원 차세대바이오그린21사업 Phyto-센서 부품/모듈 통합 및 가시화
3 교육과학기술부 한국생명공학연구원 주요사업(연구개발과제) Livecell imaging 핵심기술 개발 및 활용 연구
4 교육과학기술부 한국생명공학연구원 원천기술개발사업(첨단융합기술) 통합적 단백질 설계를 위한 고속 친화도 분석 및 스크리닝 기술 개발
5 교육과학기술부 한국생명공학연구원 협동연구개발사업(기초기술연구회) Cellulose-basedbiofuel 생산효율 향상을 위한 합성생물학 기술