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민감도와 특이도가 향상된 표적 핵산의 검출방법

  • 기술번호 : KST2014061563
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 두 종류의 프로브와 온도조건을 사용하여 표적 핵산을 검출하는 방법, 상기 방법을 이용한 표적 핵산의 정량분석 방법 및 상기 표적 핵산을 생산하는 세포를 선별하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법을 이용하면, 작은 변이가 발생한 핵산을 표지 없이도 높은 민감도와 특이도를 가지고 검출할 수 있으므로, 작은 변이에 의하여도 큰 영향을 받는 miRNA 또는 siRNA를 이용한 유전자 치료 및 연구에 널리 이바지할 수 있을 것이다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01)
CPC C12Q 1/6876(2013.01) C12Q 1/6876(2013.01) C12Q 1/6876(2013.01) C12Q 1/6876(2013.01)
출원번호/일자 1020120052222 (2012.05.16)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-1392970-0000 (2014.04.30)
공개번호/일자 10-2012-0128117 (2012.11.26) 문서열기
공고번호/일자 (20140508) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020110045900   |   2011.05.16
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2012.05.16)
심사청구항수 9

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 정용원 대한민국 대전광역시 유성구
2 이정민 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 손민 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, *층(문정동)(특허법인한얼)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 대한민국(산업통상자원부장관) 세종특별자치시 한누리대
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2012.05.16 수리 (Accepted) 1-1-2012-0393379-01
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2013.02.28 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2013.04.09 수리 (Accepted) 9-1-2013-0025701-12
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2013.10.23 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0727964-72
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2013.12.23 수리 (Accepted) 1-1-2013-1179487-27
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2013.12.23 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2013-1179488-73
7 등록결정서
Decision to grant		 2014.04.24 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0281699-73
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(a) 표적 핵산과 상보적인 뉴클레오티드 서열을 포함하는 캡쳐 LNA(Locked Nucleic Acid) 프로브가 고정화된 마이크로어레이를 제공하는 단계; (b) 상기 마이크로어레이의 캡쳐 LNA 프로브에 표적 핵산을 가하여 제1온도에서 혼성화시키는 단계; (c) 상기 혼성화가 종료된 후, 제1온도보다 상승된 제2온도로 반응온도를 상향조절하여 상기 캡쳐 LNA 프로브에 미스매치된 핵산을 캡쳐 LNA 프로브로부터 분리시키고, 상기 표적 핵산과 상보적이면서도 캡쳐 LNA 프로브의 뉴클레오티드 서열과는 상이한 뉴클레오티드 서열을 포함하는 감지 LNA 프로브를 가하여 상기 캡쳐 LNA 프로브에 혼성화된 표적 핵산에 다시 감지 LNA 프로브를 혼성화시키는 단계; 및 (d) 상기 마이크로어레이에서 감지 LNA 프로브를 검출하는 단계를 포함하는, 민감도와 특이도가 향상된 표적 핵산의 검출방법
2 2
(a) 표적 핵산과 상보적인 뉴클레오티드 서열을 포함하는 캡쳐 LNA(Locked Nucleic Acid) 프로브가 고정화된 마이크로어레이를 제공하는 단계; (b) 상기 마이크로어레이의 캡쳐 LNA 프로브에 표적 핵산을 가하여 제1온도에서 혼성화시키는 단계; (c) 상기 혼성화가 종료된 후, 제1온도보다 상승된 제2온도로 반응온도를 상향조절하여 상기 캡쳐 LNA 프로브에 미스매치된 핵산을 캡쳐 LNA 프로브로부터 분리시키고, 상기 표적 핵산과 상보적이면서도 캡쳐 LNA 프로브의 뉴클레오티드 서열과는 상이한 뉴클레오티드 서열을 포함하는 감지 LNA 프로브를 가하여 상기 캡쳐 LNA 프로브에 혼성화된 표적 핵산에 다시 감지 LNA 프로브를 혼성화시키는 단계; 및 (d) 상기 마이크로어레이에서 감지 LNA 프로브를 검출하고, 검출된 표지신호를 정량분석하는 단계를 포함하는, 표적 핵산의 정량분석방법
3 3
(a) 다양한 세포로부터 핵산시료를 수득하는 단계;(b) 상기 수득한 핵산 시료를, 표적 핵산과 상보적인 뉴클레오티드 서열을 포함하는 캡쳐 LNA(Locked Nucleic Acid) 프로브가 고정화된 마이크로어레이에 가하고 제1온도에서 혼성화시키는 단계; (c) 상기 혼성화가 종료된 후, 제1온도보다 상승된 제2온도로 반응온도를 상향조절하여 상기 캡쳐 LNA 프로브에 미스매치된 핵산을 캡쳐 LNA 프로브로부터 분리시키고, 상기 표적 핵산과 상보적이면서도 캡쳐 LNA 프로브의 뉴클레오티드 서열과는 상이한 뉴클레오티드 서열을 포함하는 감지 LNA 프로브를 가하여 상기 캡쳐 LNA 프로브에 혼성화된 표적 핵산에 다시 감지 LNA 프로브를 혼성화시키는 단계; 및 (d) 상기 마이크로어레이에서 감지 LNA 프로브를 검출하고, 검출된 표지신호를 정량분석하여, 표적 핵산을 포함하는 핵산시료가 유래된 세포를 선발하는 단계를 포함하는, 목적하는 핵산을 생산하는 세포를 선별하는 방법
4 4
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 표적 핵산은 miRNA(microRNA)인 것인 방법
5 5
제4항에 있어서,상기 miRNA는 서열번호 13, 15, 17, 19 및 29로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 것인 방법
6 6
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 캡쳐 LNA 프로브는 서열번호 1 내지 7로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 것인 방법
7 7
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 감지 LNA 프로브는 서열번호 8 내지 12로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 것인 방법
8 8
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1온도는 표적 핵산의 해리온도(Tm)보다 낮은 온도이고, 상기 제2온도는 표적 핵산의 해리온도(Tm)보다 높은 온도인 것인 방법
9 9
제8항에 있어서, 상기 제1온도는 40 내지 50℃이고, 상기 제2온도는 60 내지 70℃인 것인 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 한국생명공학연구원 미래기반기술개발사업 바이오전자 소자용 생체분자 생산 및 활용기술 개발
2 지식경제부 한국생명공학연구원 산업원천기술개발사업(산업기술) 다기능성 나노복합체 바이오 인터페이싱 기술 개발