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비스페놀 A에 의해 유도된 생식독성 진단용 바이오마커 및이를 이용한 생식독성 진단 방법

  • 기술번호 : KST2014065589
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 비스페놀 A(Bisphenol A, BPA)에 의해 유도된 생식독성 진단용 바이오마커 및 이를 이용한 생식독성 진단 방법에 관한 것으로, 구체적으로 BPA가 투여되어 생식독성이 유도된 동물모델에서 마이크로어레이 칩을 이용하여 BPA에 의해 특이적으로 유전자 발현이 증가 또는 감소하는 바이오마커 및 이를 이용한 생식독성을 진단하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 바이오마커는 마이크로어레이 칩을 통하여 선별된 반응 유전자들을 바이오마커로 이용하여 BPA의 노출에 의해 유발되는 생식독성의 작용 기작을 규명하는데 유용하게 사용될 수 있다. 비스페놀 A, 바이오마커, 마이크로어레이, 생식독성
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01)
CPC C12N 15/11(2013.01) C12N 15/11(2013.01) C12N 15/11(2013.01) C12N 15/11(2013.01) C12N 15/11(2013.01)
출원번호/일자 1020090012417 (2009.02.16)
출원인 한국화학연구원
등록번호/일자 10-1017059-0000 (2011.02.16)
공개번호/일자 10-2010-0093295 (2010.08.25) 문서열기
공고번호/일자 (20110225) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2009.02.16)
심사청구항수 22

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국화학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 윤석주 대한민국 대전광역시 유성구
2 오정화 대한민국 대전광역시 유성구
3 박한진 대한민국 대전광역시 유성구
4 황승용 대한민국 경기도 안산시 단원구
5 오문주 대한민국 경기도 고양시 덕양구
6 김승준 대한민국 서울특별시 양천구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국화학연구원 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2009.02.16 수리 (Accepted) 1-1-2009-0093861-55
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2010.10.20 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2010.11.16 수리 (Accepted) 9-1-2010-0071233-65
4 등록결정서
Decision to grant
2011.02.15 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0085170-87
5 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2015.01.08 수리 (Accepted) 1-1-2015-0018004-69
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.09.14 수리 (Accepted) 4-1-2017-5149265-52
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.09.14 수리 (Accepted) 4-1-2017-5149242-13
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
하기의 군으로부터 선택되는 하나 이상의 유전자를 포함하는, 비스페놀 A(Bisphenol A)의 노출에 의해 발현 변화를 일으키는 것을 특징으로 하는 BPA에 의해 유도된 생식독성 유발 여부 진단용 바이오마커: 유전자 등록번호(Genebank) NM_020514[olfactory receptor 1509], 유전자 등록번호(Genebank) A_52_P541760, 유전자 등록번호(Genebank) AF378830[cytochrome c oxidase subunit II], 유전자 등록번호(Genebank) AI604167, 유전자 등록번호(Genebank) AK003018, 유전자 등록번호(Genebank) AK007167[RIKEN cDNA 1700111A04 gene], 유전자 등록번호(Genebank) AK011828[huntingtin interacting protein 1], 유전자 등록번호(Genebank) AK016332[RIKEN cDNA 4930567H12 gene], 유전자 등록번호(Genebank) AK018680[ADP-ribosylation factor GTPase activating protein 3], 유전자 등록번호(Genebank) AK021409[RIKEN cDNA 1810057P16 gene], 유전자 등록번호(Genebank) AK029341[RIKEN cDNA 4932417H02 gene], 유전자 등록번호(Genebank) AK032990[RIKEN cDNA 2210417J20 gene], 유전자 등록번호(Genebank) AK034139[dynein, axonemal, heavy chain 5], 유전자 등록번호(Genebank) AK035426[RIKEN cDNA 4921511I16 gene], 유전자 등록번호(Genebank) AK036565, 유전자 등록번호(Genebank) AK038031[RIKEN cDNA A130072N09 gene], 유전자 등록번호(Genebank) AK039650[RIKEN cDNA A930009L07 gene], 유전자 등록번호(Genebank) AK044108, 유전자 등록번호(Genebank) AK045134[pleckstrin homology domain containing, family K member 1], 유전자 등록번호(Genebank) AK046538[dynein, cytoplasmic, heavy chain 2], 유전자 등록번호(Genebank) AK047216[RNA and export factor binding protein 2], 유전자 등록번호(Genebank) AK047301[proviral integration site 1], 유전자 등록번호(Genebank) AK047973[RIKEN cDNA D630041K24 gene], 유전자 등록번호(Genebank) AK048083, 유전자 등록번호(Genebank) AK052528[RIKEN cDNA D430042O09 gene], 유전자 등록번호(Genebank) AK052938[LIM domain only 7], 유전자 등록번호(Genebank) AK053009[solute carrier family 22 (organic anion transporter), member 20], 유전자 등록번호(Genebank) AK053412[expressed sequence AW124694], 유전자 등록번호(Genebank) AK054549[RIKEN cDNA 1300004G08 gene], 유전자 등록번호(Genebank) AK076937[RIKEN cDNA 4933407I05 gene], 유전자 등록번호(Genebank) AK078152[gene model 723, (NCBI)], 유전자 등록번호(Genebank) AK080244[RIKEN cDNA A530088I07 gene], 유전자 등록번호(Genebank) AK081756[excision repair cross-complementing rodent repair deficiency complementation group 6 - like], 유전자 등록번호(Genebank) AK083630[target of myb1-like 1 (chicken)], 유전자 등록번호(Genebank) AK085477[amyloid beta precursor protein (cytoplasmic tail) binding protein 2], 유전자 등록번호(Genebank) AK087246, 유전자 등록번호(Genebank) AK122562[RIKEN cDNA D330001F17 gene], 유전자 등록번호(Genebank) AW045060[RIKEN cDNA 2900009J06 gene], 유전자 등록번호(Genebank) BB548379, 유전자 등록번호(Genebank) BC016522[TAO kinase 1], 유전자 등록번호(Genebank) BC021394, 유전자 등록번호(Genebank) BC023356[SRY-box containing gene 10], 유전자 등록번호(Genebank) BC028660, 유전자 등록번호(Genebank) BC030075[T-cell receptor beta, variable 13], 유전자 등록번호(Genebank) BC034701[RIKEN cDNA 1500034J01 gene], 유전자 등록번호(Genebank) BC049659[DNA segment, human D6S2654E], 유전자 등록번호(Genebank) BC049975[cDNA sequence BC049975], 유전자 등록번호(Genebank) BC051474[similar to calcium and DAG-regulated guanine nucleotide exchange factor I], 유전자 등록번호(Genebank) BC055832[Myb protein P42POP], 유전자 등록번호(Genebank) BC062654[GNAS (guanine nucleotide binding protein, alpha stimulating) complex locus], 유전자 등록번호(Genebank) BC063047[transcription factor E3], 유전자 등록번호(Genebank) BC085235[Hbs1-like (S
2 2
제 1항에 있어서, 하기 유전자가 10 내지 50 ㎎/㎏ 체중(저) 농도의 BPA 노출에 의해 발현이 증가하는 것을 특징으로 하는 바이오마커: NM_020514, NM_029013, AK076937, AK016332, NM_175280, AK083630, NM_182807, AK047216, NM_027845, NM_009975, NM_010352, XM_488078, NM_007990, BC023356, NM_011655, NM_015789
3 3
제 1항에 있어서, 하기 유전자가 10 내지 50 ㎎/㎏ 체중(저) 농도의 BPA 노출에 의해 발현이 감소하는 것을 특징으로 하는 바이오마커: NM_053140, NM_008572, NM_010271, NM_009109, AK053009, NM_019831, NAP071090-1, BC030075, NM_031843, NM_146630, NM_019987, NM_175126, XM_140518, AK080244, AK081756, NM_011580, NM_024414, AK053412, NM_177790, AK044108, NM_153543, NM_010319, BC028660, XM_127565, NM_207687, NM_173442, NM_028995, BC016522, NM_021464, NM_030024, AK039650, NM_177282, NM_010149, NM_175433, NM_153544, NM_177849, NM_008010, NM_172549, AK047301, NM_008004, AK078152, BC085235, ENSMUST00000082346, NM_133981, NM_145390, NM_008883, BC021394, NM_177678, NM_146807, NM_019507, XM_484041, BE981145, XM_486347, NM_021339, XM_619002, NM_028333, AK052528, AK036565, NM_011741, NM_139291, NR_001461, NM_016925, XM_355934, NM_009170, NM_033321, BC063047, NM_153080, A_52_P541760, TC1479877, NM_011718, NM_001002004, NM_019828, NM_010800, NM_183389, NM_008219, BF579422, TC1494321, XM_486604, NM_146910, BC049975, AK007167, NM_173868, NM_011256, NM_172503, NM_146513, AK038031, NM_009791, AK029341, NM_146498, NM_025675, BC055832, AK018680, NM_027871, NM_013683, AK047973, XM_130930, NM_013732, XM_489612, XM_355324, XM_355221, XM_126613, NM_198604, XM_484752, NM_133192, NM_133195, TC1505847, J00623, XM_287612, BB548379, NM_013838, NM_133681, NM_153405, XM_621054, NM_177037, XM_488945, NM_019431, AK045134, NM_027925, NAP056550-1, NM_025486, NM_145835, NM_194268, AK054549, NM_009643, XM_619795, AK122562, NM_009525, AK011828, AK052938, AK048083, AI604167, Z83815, NM_033592, NM_018729, TC1503077, NM_010656, NM_010389, Z83808, NM_133947, NM_013835, NM_021323, NM_172749, AW045060, NM_011413
4 4
제 1항에 있어서, 하기 유전자가 51 내지 150 ㎎/㎏ 체중(중) 농도의 BPA 노출에 의해 발현이 증가하는 것을 특징으로 하는 바이오마커: NM_020514, NM_010642, NM_008161, NM_010645, NM_010640, NP064425, NM_007817, NM_199013, BC023356, NM_010639, NM_020268, NM_015789, XM_488078, NM_025577, AK047216, NM_010643, NM_177613, BC051474, NM_010856, NM_057171, NM_009657, NM_025789, NM_013694, NM_175280, AK034139, NM_008757, NM_007990, NM_010699, XM_484950, NM_145852, NM_025610, NM_021329, NM_019990, NM_025271, NM_011655, AK032990, NM_009975, V00829, NM_022653, NM_010722, NM_021898, NM_010352, NM_177135
5 5
제 1항에 있어서, 하기 유전자가 51 내지 150 ㎎/㎏ 체중(중) 농도의 BPA 노출에 의해 발현이 감소하는 것을 특징으로 하는 바이오마커: AK122562, NM_133681, NR_001461, BC030075, NM_175126, NM_013774, NM_177678, NM_024414, NM_013732, XM_147957, NM_145353, XM_621054, NM_146519, NM_133192, AK081756, AK087246, NM_177090, NM_194333, NM_016925, NM_013683, NM_207687, NM_028162, NM_175031, NM_030024, ENSMUST00000082346, NM_177362, AK053412, BF579422, NM_012000, NM_177849, NM_010319, NM_177790, NM_173442, AK052938, NM_028333, XM_486604, AK053009, NM_145390, NM_019831, AK021409, BC063047, NAP071090-1, BC085235, NM_139291, NM_008219, NM_008572, AK047301, TC1494321, NM_028995, NM_146910, NM_146807, XM_355934, TC1479877, NM_175433, NM_153543, NM_153544, AK029341, NM_008010, NM_146513, NM_008631, AK003018, NM_011718, AK080244, AK044108, BC021394, NM_008883, NM_001002004, AK036565, XM_355324, NM_021339, TC1505847, A_52_P541760, XM_486347, AK007167, NM_009170, NM_019828, NM_053140, AK035426, NM_173868, NM_172549, NM_013838, NM_009791, NM_025486, XM_287612, NM_031843, NM_019507, NM_019987, AK047973, AK052528, AI604167, NM_153405, NM_011652, AK039650, NM_177282, NM_025675, AK048083, XM_484041, NM_153080, NM_133981, NM_133195, NM_146630, NM_011741, BB548379, NM_019431, NM_013835, NM_010800, BC055832, NM_183389, XM_140518, NM_145357, NM_198604, NM_145835, XM_489612, J00623, XM_355221, TC1503077, NM_021323, NM_018729, Z83815, AK054549, NM_033592, XM_484752, AW045060, AK011828, NM_027925, NAP056550-1, NM_027871, NM_173368, NM_010656, NM_021464, AK078152, BC049975, NM_009525, NM_011256, NM_009643, XM_488945, XM_619002, NM_010389, NM_009109, NM_011413, XM_130930, AK045134, NM_133947, NM_146498, NM_177037, XM_619795, Z83808, NM_172749
6 6
제 1항에 있어서, 하기 유전자가 151 내지 250 ㎎/㎏ 체중(고) 농도의 BPA 노출에 의해 발현이 증가하는 것을 특징으로 하는 바이오마커: NM_013694, NM_021898, NM_010642, NM_008161, NM_008933, NP064425, NM_013637, NM_020514, NM_178182, NM_010639, NM_018858, AK016332, NM_057171, BC051474, BC049659, AK032990, BC034701, NM_024227, NM_008757, NM_027221, NAP029336-1, XM_619480, NM_020268, NM_198613, NM_010640, NM_025731, NM_010722, AK047216, NM_008579, NM_016738, NM_010666, J05277, NM_175296, NM_009657, NM_022653, BC062654, NM_025577, NM_199013, ENSMUST00000090782, AF378830, NM_026888, NM_023579, NM_010106, NM_009975, NM_010643, NM_016901, V00829, NM_010645, NM_023178, NM_007981, NM_177613, XM_619183, NM_023431, NM_019990, NM_010801, NM_145852, NM_007990, NM_025800, NM_198020, NM_175280, XM_488078, NAP102624-1, NM_025610, XM_484950, NM_016774, NM_011655, BC023356, NM_013686, NM_007590, NM_015789, NM_177135, NM_027631
7 7
제 1항에 있어서, 하기 유전자가 151 내지 250 ㎎/㎏ 체중(고) 농도의 BPA 노출에 의해 발현이 감소하는 것을 특징으로 하는 바이오마커: NM_173368, NM_009170, AK085477, XM_621054, NM_133681, NM_008572, NM_146910, NM_153080, NM_173442, NM_146513, NR_001461, NM_008202, XM_127565, NM_173437, NM_011580, A_52_P541760, NM_028333, NM_012000, NM_133671, AK046538, NM_177158, NAP071090-1, BC028660, NM_146807, NM_146498, AK035426, AK029341, NM_025486, CA465259, NM_010800, NM_010271, NM_145353, NM_175031, NM_007602, NAP054413-1, M88489, XM_355324, NM_013774, NM_172257, BB548379, NM_177849, NM_021323, NM_008883, NM_021464, NM_145390, BC030075, NM_177090, NM_019831, XM_287612, NM_182993, NM_013835, BC085235, NM_175433, NM_030024, NM_148929, XM_140518, NM_026389, NM_177678, TC1505847, NM_153544, AK018680, BC063047, AK053412, NM_146519, NM_001002004, NM_177790, NM_019431, XM_484041, XM_355934, NM_008010, NM_023598, NM_013838, AK087246, XM_355221, AK036565, NM_008219, NM_009109, XM_486604, AK047301, TC1479877, BC021394, TC1503077, XM_489612, XM_484752, AK038031, NM_016925, NM_024414, NM_011256, TC1509035, AK047973, NM_028995, AK052528, NM_019507, NM_011741, NM_153543, AK045134, AK081756, NM_175126, NM_145835, NM_025675, AK052938, AK007167, NM_027871, AK044108, BE981145, ENSMUST00000082346, NM_139291, XM_147957, XM_619002, NM_009525, BC055832, TC1494321, AK011828, Z83815, NM_021339, XM_486347, NM_013603, NM_010656, NM_133195, BC049975, NM_033592, NM_009643, NM_018729, AW045060, NAP056550-1, NM_133981, XM_619795, NM_198604, AK039650, XM_130930, NM_010389, NM_133947, NM_183389, J00623, AK078152, NM_194333, NM_011413, AK054549, AI604167, NM_027925, AK053009, Z83808, XM_488945, NM_177037, NM_172749
8 8
제 1항의 바이오마커로부터 선택된, 어느 하나 이상의 유전자의 핵산서열의 전부; 또는 상기 유전자의 단편인 올리고뉴클레오티드; 또는 그의 상보가닥 분자가 집적된, BPA에 의해 유도된 생식독성 유발 여부 진단용 마이크로어레이 칩
9 9
제 8항에 있어서, 상기 올리고뉴클레오티드; 또는 이의 상보가닥 분자는 상기 바이오마커의 15 내지 50개의 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 마이크로어레이 칩
10 10
BPA에 대한 노출이 의심되는 수컷 개체(실험군) 및 대조군의 생식세포로부터 분리된 RNA 시료로부터 1) cDNA로 합성하면서 실험군과 대조군을 각기 다른 형광물질로 표지하는 단계; 2) 단계 1)의 각기 다른 형광물질로 표지된 cDNA를 제 8항의 DNA 마이크로어레이 칩과 혼성화시키는 단계; 3) 단계 2)의 반응한 DNA 마이크로어레이 칩을 분석하는 단계; 및 4) 단계 3)의 분석한 데이터에서 상기 DNA 마이크로어레이 칩 상의 유전자의 발현 정도를 대조군과 비교하는 단계를 포함하는 BPA에 의해 유도된 생식독성 유발 여부를 확인하기 위해 제 1항의 바이오마커를 검출하는 방법
11 11
제 10항에 있어서, 상기 생식세포는 정소 또는 부고환에서 유래한 세포인 것을 특징으로 하는 방법
12 12
제 10항에 있어서, 단계 2)의 형광물질은 Cy3, Cy5, FITC(poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate), RITC(rhodamine-B-isothiocyanate) 및 로다민(rhodamine)으로 이루어진 군으로부터 선택하여 사용하는 것을 특징으로 하는 방법
13 13
BPA에 대한 노출이 의심되는 수컷 개체(실험군) 및 대조군의 생식세포로부터 분리된 RNA 시료로부터 1) 상기 RNA를 대상으로, 제 1항의 바이오마커 유전자에 상보적이고 바이오마커 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머 쌍을 사용하여 실시간 RT-PCR(Real-time reverse transcript polymerase chain reaction)을 수행하는 단계; 및 2) 단계 1)의 유전자 산물의 양을 대조군과 비교하는 단계를 포함하는, BPA에 의해 유도된 생식독성 유발 여부를 확인하기 위해 제 1항의 바이오마커를 검출하는 방법
14 14
제 13항에 있어서, 상기 생식세포는 정소 또는 부고환에서 유래한 세포인 것을 특징으로 하는 방법
15 15
제 13항에 있어서, 단계 1)의 프라이머 쌍은 바이오마커 유전자의 증폭 산물이 100 내지 300 bp가 되도록 설계된 15 내지 50머 길이의 정방향 및 역방향 프라이머 쌍인 것을 특징으로 하는 방법
16 16
제 8항의 마이크로어레이 칩을 포함하는, BPA에 의해 유도된 생식독성 유발 여부 진단용 키트
17 17
제 16항에 있어서, 추가적으로 인간 생식세포를 포함하는 것을 특징으로 하는 키트
18 18
제 17항에 있어서, 인간 생식세포는 정소 또는 부고환에서 유래한 세포인 것을 특징으로 하는 키트
19 19
제 1항의 바이오마커 유전자에 상보적이고, 상기 바이오마커 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머 쌍을 포함하는, BPA에 의해 유도된 생식독성 유발 여부 진단용 키트
20 20
제 19항에 있어서, 상기 프라이머 쌍은 바이오마커 유전자의 증폭 산물이 100 내지 300 bp가 되도록 설계된 15 내지 50머 길이의 정방향 및 역방향 프라이머 쌍인 것을 특징으로 하는 키트
21 21
제 19항에 있어서, 추가적으로 인간 생식세포를 포함하는 것을 특징으로 하는 키트
22 22
제 21항에 있어서, 인간 생식세포는 정소 또는 부고환에서 유래한 세포인 것을 특징으로 하는 키트
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2 지식경제부 한국화학연구원 부설 안전성평가연구소 첨단 독성평가기술 개발사업 독성유전체기술을 이용한 독성평가 기반기술 개발사업