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에탄올(ethanol) 및 15 부피% 내지 35 부피%의 디에틸에테르(diethyl ether) 함유 혼합 용매에 지질이 용해된 지질 용액과, 핵산이 용해된 수용액을 섞는 단계를 포함하는, 핵산 함유 나노 리포솜의 제조방법으로서,상기 지질은 이온화 가능한(ionizable) 양이온 지질로서 DC-CHOL(dimethylethancarbanoyl cholesterol) 및 비-이온화(non-ionizable) 지질로서 DSPC(distearoylphosphatidylcholine), DOPE(dioleolphosphatidyl ethanolamine) 및 CHOL(cholesterol)을 포함하는 것인 제조방법
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제1항에 있어서,상기 디에틸에테르 및 에탄올의 혼합 용매는 물을 추가로 포함하는 것인 제조방법
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제1항에 있어서,상기 지질 용액과 핵산 수용액의 혼합 용액 중 디에틸에테르 및 에탄올을 포함하는 혼합 유기 용매의 부피와 물의 최종 부피비가 45:55 내지 30:70 인 것인 제조방법
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제1항에 있어서,상기 지질은 PEG(polyethylene glycol)-지질을 추가로 포함하는 것인 제조방법
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제1항에 있어서,상기 이온화 가능한 양이온 지질은 DODAP(dioleoyldimethylammonium-propane), DODAC(dioleyl-dimethylammonium chloride), DDAB(didodecyldimethylammonium bromide), DMRIE(dimyristyloxypropyl-dimethyl-hydroxyethylammonium bromide), DODMA(dioleyloxydimethylaminopropane), DMDMA(dimethyldimyristylammonium) 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 이온화 가능한 양이온 지질을 추가로 포함하는 것인 제조방법
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제1항에 있어서,상기 비-이온화 지질은 DPPE(bis(diphenylphosphino)ethane), 디아실포스파티딜콜린(diacyl phosphatidylcholine), 디아실포스파티딜에탄올아민(diacylphosphatidylethanolamine), 디아실포스파티딜세린(diacylphosphatidylserine) 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 비-이온화 지질을 추가로 포함하는 것인 제조방법
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제5항에 있어서,상기 PEG-지질은 mPEG-PE(methoxy-PEG2000 distearoylphosphatidylethanolamine), miPEG-PE(maleimidyl-PEG2000 distearoylphosphatidylethanolamine) 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 제조방법
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제1항에 있어서,상기 나노 리포솜의 크기는 100 내지 150 nm인 것인 제조방법
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제1항에 있어서,상기 핵산은 siRNA인 것인 제조방법
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제1항에 있어서,상기 나노 리포솜은 추가로 표면에 세포투과성 리간드 또는 표적 장기 또는 조직 특이적 리간드를 표지한 것인 제조방법
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제1항에 있어서,압출과정 없이(extrusion-free) 단순혼합(simple mixing)에 의해 핵산 함유 나노 리포솜을 형성시키는 것인 제조방법
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(i) 에탄올 및 15 부피% 내지 35 부피%의 디에틸에테르 함유 혼합 용매; 및 (ii) 이온화 가능한(ionizable) 양이온 지질로서 DC-CHOL(dimethylethancarbanoyl cholesterol), 비-이온화(non-ionizable) 지질로서 DSPC(distearoylphosphatidylcholine), DOPE(dioleolphosphatidyl ethanolamine) 및 CHOL(cholesterol) 및 PEG(polyethylene glycol)-지질을 포함하는 지질 혼합물을 구비한, 나노 리포솜 제조용 키트
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