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유전자 도입 벼 세포 배양액으로부터 재조합 인간 키모트립시노겐 B2의 정제방법

  • 기술번호 : KST2015001671
  • 담당센터 : 광주기술혁신센터
  • 전화번호 : 062-360-4654
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 유전자 도입 벼 세포 배양 현탁액에서 발현된 재조합 인간 키모트립시노겐(Chymotrypsinogen) B2를 정제하는 방법으로서, (a) 벼 세포 배양 현탁액 내에서 가장 많이 존재하는 단백질인 a-아밀라아제(amylase)를 제거하기 위하여 세포 배양액을 강산으로써 pH 3으로 떨어뜨린 다음 12시간 동안 4℃로 냉장한 후에 원심 분리하는 단계; (b) 상기 원심분리단계에서 pH 조절된 배양액을 분자량 10,000Da 이상의 크기를 배제하는 한외여과에 의한 농축단계; 및 (c) 상기 농축단계에서 얻어진 농축액으로부터 강산성 양이온교환제(strongly acidic cation exchanger)인 Sulphopropyl-Sepharose에 흡착된 인간 유래 키모트립신노겐 B2를 단일 피크로 용출시키는 단계를 포함하고 있다.본 발명에 의한 유전자 도입 벼 세포 배양 현탁액에서 발현된 재조합 인간 키모트립시노겐 B2를 정제하는 방법은 단지 3단계만으로 이루어지므로 단순화된 경제적인 정제 공정으로서, 대량 배양액으로부터 정제가 용이하며, 평균 90% 순도로 재현성 있게 정제할 수 있는 우수한 효과가 있다.
Int. CL C07K 1/34 (2006.01.01) C07K 1/18 (2006.01.01) C07K 1/36 (2006.01.01) C12N 9/76 (2006.01.01)
CPC C07K 1/34(2013.01) C07K 1/34(2013.01) C07K 1/34(2013.01) C07K 1/34(2013.01) C07K 1/34(2013.01)
출원번호/일자 1020120008771 (2012.01.30)
출원인 전북대학교산학협력단, (주)엔비엠
등록번호/일자 10-1363225-0000 (2014.02.07)
공개번호/일자 10-2013-0087709 (2013.08.07) 문서열기
공고번호/일자 (20140217) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2012.01.30)
심사청구항수 8

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 전북대학교산학협력단 대한민국 전라북도 전주시 덕진구
2 (주)엔비엠 대한민국 전라북도 완주군

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 엄태붕 대한민국 전라북도 전주시 완산구
2 권태호 대한민국 전북 전주시 덕진구
3 임성근 대한민국 전북 전주시 완산구
4 김용상 대한민국 전북 전주시 완산구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 황여현 대한민국 대전광역시 서구 문예로 ***, KT&G빌딩 *층 (둔산동)(화평국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 전북대학교산학협력단 전라북도 전주시 덕진구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2012.01.30 수리 (Accepted) 1-1-2012-0072785-39
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2012.03.30 수리 (Accepted) 4-1-2012-5067712-86
3 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2012.10.04 수리 (Accepted) 4-1-2012-5206243-46
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2012.10.23 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2012.11.22 수리 (Accepted) 9-1-2012-0086989-72
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2013.08.16 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0563717-10
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2013.08.29 수리 (Accepted) 4-1-2013-5118052-70
8 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2013.10.10 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2013-0913802-12
9 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2013.10.10 수리 (Accepted) 1-1-2013-0913791-97
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2013.11.20 수리 (Accepted) 4-1-2013-0054946-54
11 등록결정서
Decision to grant
2014.02.07 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0092027-34
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2016.01.29 수리 (Accepted) 4-1-2016-5013206-34
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.03.06 수리 (Accepted) 4-1-2018-5038420-08
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.02.27 수리 (Accepted) 4-1-2019-5038917-11
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.05.20 수리 (Accepted) 4-1-2019-5099085-03
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.07.23 수리 (Accepted) 4-1-2019-5146985-61
17 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.07.23 수리 (Accepted) 4-1-2019-5146986-17
18 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.10.22 수리 (Accepted) 4-1-2019-5219602-91
19 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.07.06 수리 (Accepted) 4-1-2020-5149086-79
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
다음의 단계를 포함하는 유전자 도입 벼 세포 배양 현탁액에서 발현된 재조합 키모트립시노겐 B2를 정제하는 방법:(a) 벼 세포 배양액을 강산으로써 pH 3으로 조정한 후에 4℃에서 12시간 정치하여 원심분리하는 단계;(b) 상기 원심분리단계에서 얻어진 상기 벼 세포 배양액을 한외여과막을 사용하여 염 및 불순물을 제거하고 농축하는 단계;(c) 상기 농축단계에서 얻어진 상기 벼 세포 배양액을 강산성 양이온교환체를 사용하여 키모트립시노겐 B2를 흡착시키는 단계
2 2
제 1항에 있어서, 상기 키모트립시노겐 B2는 인간으로부터 유래된 것을 특징으로 하는 유전자 도입 벼 세포 배양 현탁액에서 발현된 재조합 키모트립시노겐 B2를 정제하는 방법
3 3
제 1항에 있어서, 상기 강산은 염산, 황산, 질산 중에 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 유전자 도입 벼 세포 배양 현탁액에서 발현된 재조합 키모트립시노겐 B2를 정제하는 방법
4 4
제 1항에 있어서, 상기 한외여과막은 그 재질이 폴리에테르설폰(polyethersulfone) 또는 재생셀루로오스(regenerated cellulose)인 것을 특징으로 하는 유전자 도입 벼 세포 배양 현탁액에서 발현된 재조합 키모트립시노겐 B2를 정제하는 방법
5 5
제 1항에 있어서, 상기 강산성 양이온교환체는 설포프로필(Sulphopropyl)기를 가지는 것을 특징으로 하는 유전자 도입 벼 세포 배양 현탁액에서 발현된 재조합 키모트립시노겐 B2를 정제하는 방법
6 6
제 1항에 있어서, 상기 농축단계는 분자량 10,000Da 이상의 크기를 배제하는 한외여과막을 사용하는 것을 특징으로 하는 유전자 도입 벼 세포 배양 현탁액에서 발현된 재조합 키모트립시노겐 B2를 정제하는 방법
7 7
제 1항에 있어서, 상기 흡착단계는 1M NaCl을 포함하는 완충액으로 이온세기 구배를 이용하여 실시함으로써 인간 유래 키모트립시노겐 B2가 단일 피크로 용출되는 것을 특징으로 하는 유전자 도입 벼 세포 배양 현탁액에서 발현된 재조합 키모트립시노겐 B2를 정제하는 방법
8 8
삭제
9 9
제 1항에 있어서, 상기 흡착단계는 pH 2
10 10
삭제
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 한국산업기술진흥협회 산학연협력체제활성화지원(산학연협력우수연구실사업) 핵심애로기술개발 지원