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대상 생물로부터 검체를 채취하여 준비하는 단계; 준비된 생물 검체를 아스코르브산-EDTA와 혼합하는 단계; 상기 혼합물을 메탄올/에틸 아세테이트 용액과 디티온산나트륨(sodium dithionite)/Na2EDTA 용액으로 균질화하는 단계; 상기 균질화된 용액을 농축시키는 단계;a) 상기 농축된 용액을 포스페이트 버퍼로 희석하는 공정, b) HLB 컬럼을 메탄올과 증류수로 세척한 후, 상기 희석된 용액을 컬럼에 적용하는 공정, c) 포스페이트 버퍼를 적용하여 불순물을 제거한 후 메탄올로 컬럼을 세척하는 공정을 포함하는 방법으로 상기 농축된 용액을 HLB 컬럼에 적용하는 단계; HLB 컬럼에서 에틸 아세테이트를 이용하여 카페인을 추출하는 단계; 및 HLB 컬럼에서 아스코르브산-EDTA 및 메탄올/에틸 아세테이트 용액을 이용하여 카테킨을 추출하는 단계를 포함하는, 생물 검체 내 카페인 및 카테킨을 동시분석하는 방법
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제1항에 있어서,상기 대상 생물은 닭, 오리, 돼지, 소, 젖소를 포함하는 축산용 가축인 것을 특징으로 하는, 생물 검체 내 카페인 및 카테킨을 동시분석하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 생물 검체는 대상 생물로부터 채취된 간, 근육, 장액, 혈액을 포함하는 조직 생검(biopsy), 계란 및 우유를 포함하는 축산물, 및 이의 가공물을 포함하는 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는, 생물 검체 내 카페인 및 카테킨을 동시분석하는 방법
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제1항에 있어서,상기 카테킨은 에피갈로카테킨 갈레이트(epigallocatechin gallate, EGCG), 에피카테킨(epicatechin, EC), 갈로카테킨 갈레이트(gallocatechin gallate, GCG), 에피카테킨 갈레이트(epicatechin gallate, ECG) 및 카테킨 갈레이트(catechin gallate, CG)로 이루어진 그룹에서 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 생물 검체 내 카페인 및 카테킨을 동시분석하는 방법
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제1항에 있어서,상기 메탄올/에틸 아세테이트 용액은 메탄올과 에틸아세테이트가 2 : 1로 혼합된 것을 특징으로 하는, 생물 검체 내 카페인 및 카테킨을 동시분석하는 방법
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제1항에 있어서,상기 디티온산나트륨(sodium dithionite)/Na2EDTA 용액은 0
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제1항에 있어서,상기 균질화된 용액을 농축시키는 공정이 상기 균질화된 용액을 원심분리한 후 상층액을 질소가스를 이용하여 농축시켜 수행되는 것을 특징으로 하는, 생물 검체 내 카페인 및 카테킨을 동시분석하는 방법
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제1항에 있어서,상기 HLB 컬럼에 적용하는 공정은농축된 용액을 포스페이트 버퍼(pH 7)로 희석하는 단계;HLB 컬럼을 메탄올과 증류수로 세척한 후, 상기 희석된 용액을 컬럼에 적용하는 단계; 및포스페이트 버퍼(pH 3)와 포스페이트 버퍼(pH 7)를 차례로 적용하여 불순물을 제거한 후 메탄올로 컬럼을 세척하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 생물 검체 내 카페인 및 카테킨을 동시분석하는 방법
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제1항에 있어서,상기 추출된 카테킨과 카페인 용액을 질소가스로 완전히 농축시킨 후 메탄올로 용해하고, 이를 여과한 후 HPLC로 분석하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 생물 검체 내 카페인 및 카테킨을 동시분석하는 방법
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