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생물학적 시료내의 단당세라마이드를 정량 분석하는 방법

  • 기술번호 : KST2015011018
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 생물학적 시료내에서의 단당세라마이드를 정량 분석하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법은 내부표준물질로서 디하이드로스핑고신을 첨가함으로써 단당세라마이드를 높은 신뢰도로 정량 분석할 수 있다. 또한, 고성능 박층크로마토그래피(HP-TLC)에 의한 정제과정을 통해, 백그라운드 없는 HPLC 크로마토그램을 제공할 수 있으며, 역상(reverse phase)-HPLC 방법을 사용함으로써 HP-TLC에 의해 분리되지 않는 스핑고신 및 디하이드로스핑고신을 분석대상물 단당스핑고신으로부터 분리할 수 있어 정확한 단당세라마이드의 분석이 가능하다. 본 발명의 방법은 배양된 세포는 물론 동물의 조직이나 혈액 등 생체 시료내의 단당세라마이드 정량 분석에도 매우 적합하다.
Int. CL G01N 30/02 (2006.01) G01N 30/90 (2006.01) G01N 33/483 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01)
CPC G01N 33/483(2013.01) G01N 33/483(2013.01) G01N 33/483(2013.01) G01N 33/483(2013.01) G01N 33/483(2013.01) G01N 33/483(2013.01)
출원번호/일자 1020100139545 (2010.12.30)
출원인 충북대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1489535-0000 (2015.01.28)
공개번호/일자 10-2012-0090119 (2012.08.17) 문서열기
공고번호/일자 (20150206) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2013.05.29)
심사청구항수 6

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 충북대학교 산학협력단 대한민국 충청북도 청주시 서원구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 유환수 대한민국 충청북도 청주시 서원구
2 최경미 대한민국 충청북도 청주시 서원구
3 이용문 대한민국 충청북도 청주시 서원구
4 윤여표 대한민국 충청북도 청주시 서원구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 김정현 대한민국 서울특별시 강남구 역삼로 ***, *층 (역삼동, 신명빌딩)(한맥국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 충북대학교 산학협력단 대한민국 충청북도 청주시 서원구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2010.12.30 수리 (Accepted) 1-1-2010-0878280-08
2 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)
2013.05.29 수리 (Accepted) 1-1-2013-0477657-71
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2014.03.07 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2014.04.09 수리 (Accepted) 9-1-2014-0031979-17
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2014.06.24 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0428411-01
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2014.08.21 수리 (Accepted) 1-1-2014-0793175-34
7 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2014.08.21 수리 (Accepted) 1-1-2014-0793191-65
8 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2014.08.21 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2014-0793177-25
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.08.28 수리 (Accepted) 4-1-2014-5103343-45
10 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)
2014.10.22 수리 (Accepted) 1-1-2014-1011658-89
11 등록결정서
Decision to grant
2015.01.19 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0039712-59
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.06.17 수리 (Accepted) 4-1-2015-5081402-70
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2018-5086612-26
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.07.06 수리 (Accepted) 4-1-2020-5149268-82
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
다음의 단계를 포함하는 생물학적 시료(biological sample)내의 단당세라마이드(monoglycoceramide)를 정량 분석하는 방법: (a) 생물학적 시료에 내부표준물질(internal standard)로서 디하이드로스핑고신을 첨가하는 단계; (b) 상기 단계 (a)의 생물학적 시료로부터 지질성분을 추출하는 단계; (c) 상기 단계 (b)에서 추출된 지질성분으로부터 클로로포름, 메탄올 및 암모니아수의 혼합액을 전개 용매로 사용하여 고성능 박층크로마토그래피(HP-TLC)를 행하여 단당세라마이드 및 내부표준물질로서 첨가한 상기 디하이드로스핑고신을 분리하는 단계; (d) 상기 단계 (c)에서 분리된 단당세라마이드를 탈아실화(deacylation) 반응시키는 단계; (e) 상기 단계 (d)에서 탈아실화 반응에 의해 생성된 단당스핑고신과 상기 첨가한 내부표준물질인 디하이드로스핑고신을 형광 유도체화(fluorescence derivatization) 반응시키는 단계; 및 (f) 상기 단계 (e)의 형광 유도체화 반응 생성물을 역상(reverse phase)-고성능 액체크로마토그래피(HPLC)로 분석하는 단계로서, 상기 단당세라마이드의 함량은 디하이드로스핑고신 및 단당스핑고신에 대한 역상-고성능 액체크로마토그래피의 크로마토그램의 피크 면적으로부터 산출하는 것을 특징으로 하는 단계
2 2
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (c)의 단당세라마이드는 글루코실세라마이드 또는 갈락토실세라마이드인 것을 특징으로 하는 방법
3 3
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (d)의 탈아실화 반응은 SCDase (Sphingolipid ceramide N-deacylase)처리에 의해 행하는 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (d)의 탈아실화 반응은 지방산 없는(fatty acid free) 우혈청알부민(BSA, bovine serum albumin)의 존재 하에서 행하는 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (e)의 형광 유도체화 반응은 o-프탈알데히드(o-Phthalaldehyde, OPA) 존재 하에서 행하는 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (a)의 생물학적 시료는 배양된 세포, 뇌, 눈, 심장, 장, 신장, 간, 허파, 근육, 비장 또는 정소로부터 얻은 조직(tissue), 혈액, 혈장, 혈청, 요액(urine), 타액, 땀, 정액 또는 점액인 것을 특징으로 하는 방법
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패밀리정보가 없습니다
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2 교육과학기술부 충북대학교 산학협력단 지역거점연구단육성사업 항암효능평가, 시뮬레이션 및 작용기전연구
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