1 |
1
다음의 단계를 포함하는 생체 유래 스핑고마이엘린(sphingomyelin)의 정량 분석방법: (a) 생체 시료(biological sample)에 내부 표준물질(internal standard)로서 다이하이드로스핑고마이엘린(dihydrosphingomyelin)을 첨가하는 단계; (b) 상기 단계 (a)의 내부 표준물질이 첨가된 생체 시료로부터 지질(lipid) 성분을 추출하는 단계; (c) 상기 단계 (b)의 추출된 지질성분으로부터 클로로포름, 메탄올 및 암모니아수의 혼합액을 전개용매로 사용한 고성능 박층크로마토그래피(high performance thin-layer chromatography, HPTLC)에 의해 스핑고마이엘린 및 내부 표준물질인 다이하이드로스핑고마이엘린을 분리하는 단계; (d) 상기 단계 (c)의 HPTLC 분리된 스핑고마이엘린을 효소적 가수분해(enzymatic hydrolysis) 반응 시키는 단계로서, 상기 효소적 가수분해는 스핑고지질 세라마이드 N-디아실아제(sphingolipid ceramide N-deacylase, SCDase) 및 스핑고마이엘린아제(sphingomyelinase, SMase)에 의한 가수분해인 단계; (e) 상기 단계 (d)의 효소적 가수분해 반응 생성물을 형광 유도체화(fluorescence derivatization) 반응시키는 단계; 및 (f) 상기 단계 (e)의 형광 유도체화 반응 생성물을 HPLC(high performance liquid chromatography)로 분석하는 단계
|
2 |
2
삭제
|
3 |
3
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (d)의 효소적 가수분해 반응은 지방산 없는(fatty acid free) 우혈청알부민(BSA, bovine serum albumin)의 존재 하에서 행하는 것을 특징으로 하는 분석방법
|
4 |
4
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (e)의 형광 유도체화(fluorescence derivatization) 반응은 o-프탈알데히드(o-Phthalaldehyde, OPA) 염색제의 존재 하에 행하는 것을 특징으로 하는 분석방법
|
5 |
5
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (a)의 생체 시료는 배양된 세포(cultured cell), 조직(tissue), 혈액(blood), 혈장(plasma), 혈청(serum) 뇨액(urine), 타액(saliva), 땀(sweat), 정액(semen) 또는 점액(mucus)인 것을 특징으로 하는 분석방법
|
6 |
6
제 5 항에 있어서, 상기 조직(tissue)은 뇌(brain), 눈(eye), 심장(heart), 장(intestine), 신장(kidney), 간(liver), 허파(lung), 근육(muscle), 비장(spleen) 또는 정소(testis)로부터 얻은 조직인 것을 특징으로 하는 분석방법
|