요약 | 본 발명은 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol, DES)에 의해 유도된 생식계 유전독성을 이용한 유전독성물질 검출용 키트 및 이의 검출 방법에 관한 것으로서, 구체적으로 DES 처리된 생식세포의 유전독성에 의해 발현이 증가 또는 감소되는 특정 유전자를 바이오마커로 이용함으로써 시료 내 유전독성물질의 함유 여부 판정을 위해 유용하게 사용할 수 있다. |
---|---|
Int. CL | C12N 15/12 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) C12N 5/076 (2010.01) |
CPC | C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) |
출원번호/일자 | 1020100004627 (2010.01.19) |
출원인 | 한국화학연구원 |
등록번호/일자 | 10-1194260-0000 (2012.10.18) |
공개번호/일자 | 10-2011-0085050 (2011.07.27) 문서열기 |
공고번호/일자 | (20121029) 문서열기 |
국제출원번호/일자 | |
국제공개번호/일자 | |
우선권정보 | |
법적상태 | 등록 |
심사진행상태 | 수리 |
심판사항 | |
구분 | 신규 |
원출원번호/일자 | |
관련 출원번호 | |
심사청구여부/일자 | Y (2010.01.19) |
심사청구항수 | 16 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
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1 | 한국화학연구원 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
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1 | 윤석주 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
2 | 황승용 | 대한민국 | 경기도 안산시 단원구 |
3 | 오정화 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
4 | 박한진 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
5 | 김승준 | 대한민국 | 서울특별시 양천구 |
6 | 오문주 | 대한민국 | 경기도 고양시 덕양구 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
---|---|---|---|
1 | 이원희 | 대한민국 | 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동) |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
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1 | 한국화학연구원 | 대전광역시 유성구 |
번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
---|---|---|---|---|
1 | [특허출원]특허출원서 [Patent Application] Patent Application |
2010.01.19 | 수리 (Accepted) | 1-1-2010-0034019-35 |
2 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2011.07.28 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2011-0422747-82 |
3 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 [Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation) |
2011.09.28 | 수리 (Accepted) | 1-1-2011-0759142-37 |
4 | [명세서등 보정]보정서 [Amendment to Description, etc.] Amendment |
2011.09.28 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2011-0759141-92 |
5 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2012.03.22 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2012-0169004-09 |
6 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 [Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation) |
2012.03.26 | 수리 (Accepted) | 1-1-2012-0240005-08 |
7 | [명세서등 보정]보정서 [Amendment to Description, etc.] Amendment |
2012.03.26 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2012-0240004-52 |
8 | 등록결정서 Decision to grant |
2012.08.27 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2012-0497781-05 |
9 | [출원서등 보정]보정서 [Amendment to Patent Application, etc.] Amendment |
2015.01.08 | 수리 (Accepted) | 1-1-2015-0018331-84 |
10 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2017.09.14 | 수리 (Accepted) | 4-1-2017-5149242-13 |
11 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2017.09.14 | 수리 (Accepted) | 4-1-2017-5149265-52 |
번호 | 청구항 |
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1 |
1 하기의 모든 유전자의 핵산 서열의 전부 또는 그로부터 선택되는 15 내지 50개의 핵산 서열로 구성되는 상기 유전자의 단편인 올리고뉴클레오티드 또는 그의 상보가닥 분자가 집적된, 시료 내 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol)에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인용 DNA 마이크로어레이 칩:유전자 등록번호(Genebank) Z49206(heat shock factor 1-alpha), 유전자 등록번호 BC050108{numb gene homolog (Drosophila)}, 유전자 등록번호 NM_013798(actin, gamma, cytoplasmic), 유전자 등록번호 AK045226(CD44 antigen), 유전자 등록번호 NM_029780(v-raf-1 leukemia viral oncogene 1), 유전자 등록번호 NM_007913(early growth response 1), 유전자 등록번호 NM_145979(chromodomain helicase DNA binding protein 4), 유전자 등록번호 NM_008302(heat shock protein 1, beta), 유전자 등록번호 NM_010758(myelin-associated glycoprotein), 유전자 등록번호 NM_008058{frizzled homolog 8 (Drosophila)}, 유전자 등록번호 XM_284529(SRY-box containing gene 14), 유전자 등록번호 NM_021496(poliovirus receptor-related 3), 유전자 등록번호 NM_010810(matrix metalloproteinase 7), 유전자 등록번호 NM_133196(cleavage stimulation factor, 3'' pre-RNA subunit 2), 유전자 등록번호 NM_009158(mitogen activated protein kinase 10), 유전자 등록번호 NM_011445(SRY-box containing gene 6), 유전자 등록번호 NM_007872(DNA methyltransferase 3A), 유전자 등록번호 AK083292(RAB13, member RAS oncogene family), 유전자 등록번호 NM_053116(wingless-related MMTV integration site 16), 유전자 등록번호 NM_028392{protein phosphatase 2 (formerly 2A), regulatory subunit B (PR 52), beta isoform}, 유전자 등록번호 NM_013565(integrin alpha 3), 유전자 등록번호 NM_144919(histone deacetylase 11), 및 유전자 등록번호 NM_019677(phospholipase C, beta) |
2 |
2 삭제 |
3 |
3 삭제 |
4 |
4 1) 수컷 개체의 생식세포에 피검 시료를 처리하는 단계;2) 단계 1)의 피검 시료를 처리한 실험군 세포와 피검 시료를 처리하지 않은 대조군 세포에서 RNA를 분리하는 단계;3) 단계 2)의 실험군 및 대조군의 RNA를 각각 cDNA로 합성하면서 실험군과 대조군을 각기 다른 형광물질로 표지하는 단계;4) 단계 3)의 각기 다른 형광물질로 표지된 cDNA를 제 1항의 DNA 마이크로어레이 칩과 혼성화시키는 단계;5) 단계 4)의 반응한 DNA 마이크로어레이 칩을 분석하는 단계; 및6) 단계 5)의 분석한 데이터에서 상기 DNA 마이크로어레이 칩에 집적된 실험군의 유전자 발현 정도를 대조군과 비교하여 확인하는 단계를 포함하는 시료 내 유전독성 유발 수준의 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인 방법 |
5 |
5 제 4항에 있어서, 상기 개체는 마우스 또는 랫트인 것을 특징으로 하는 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인 방법 |
6 |
6 제 4항에 있어서, 상기 생식세포는 마우스 고환조직에서 유래한, Sertoli TM4 세포인 것을 특징으로 하는 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인 방법 |
7 |
7 제 4항에 있어서, 단계 3)의 형광물질은 Cy3(Cyanine 3), Cy5(Cyanine 5), 폴리 L-라이신-플루오레세인 이소티오시아네이트(poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate, FITC), 로다민-B-이소티오시아네이트(rhodamine-B-isothiocyanate, RITC) 및 로다민(rhodamine)으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인 방법 |
8 |
8 1) 수컷 개체의 생식세포에 피검 시료를 처리하는 단계;2) 단계 1)의 피검 시료를 처리한 실험군 세포와 피검 시료를 처리하지 않은 대조군 세포에서 RNA를 분리하는 단계;3) 단계 2)의 RNA를 대상으로, 제 1항의 유전자에 상보적이고 상기 유전자를 증폭할 수 있는 각각의 프라이머 쌍을 모두 사용하여 실시간 RT-PCR(real time reverse transcript polymerase chain reaction)을 수행하는 단계; 및4) 단계 3)의 실험군의 유전자 산물의 양을 대조군과 비교하여 확인하는 단계를 포함하는 시료 내 유전독성 유발 수준의 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인 방법 |
9 |
9 삭제 |
10 |
10 삭제 |
11 |
11 제 4항 또는 제 8항 중 어느 한 항에 있어서, 피검 시료와 랫트 간 분쇄물의 포스트-미토콘드리아 상층액 분획물(a single lot of post-mitochondrial supernatant fractions of rat liver homogenates, S9)을 함께 처리하는 것을 특징으로 하는 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인 방법 |
12 |
12 제 4항 또는 제 8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 시료는 생체시료, 식품시료, 화학시료, 공업시료, 임상시료 및 환경시료로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인 방법 |
13 |
13 제 1항의 DNA 마이크로어레이 칩을 포함하는 것을 특징으로 하는 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인용 키트 |
14 |
14 제 13항에 있어서, 수컷 마우스의 생식세포를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인용 키트 |
15 |
15 제 14항에 있어서, 상기 생식세포는 Sertoli TM4 세포인 것을 특징으로 하는 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인용 키트 |
16 |
16 제 13항에 있어서, 스트렙트아비딘-알칼리 탈인화효소 접합물질(streptavidin-alkaline phosphatase conjugate), 화학형광물질(chemifluorescence) 및 화학발광물질(chemiluminescent)로 구성된 형광물질로부터 선택되는 어느 하나를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인용 키트 |
17 |
17 제 13항에 있어서, 혼성화에 사용되는 완충용액, RNA로부터 cDNA를 합성하기 위한 역전사효소, cNTPs 또는 rNTPs(사전혼합형 또는 분리공급형), 표식시약, 및 세척 완충용액으로 구성된 반응시약군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인용 키트 |
18 |
18 제 1항의 유전자에 상보적이고 상기 유전자를 증폭할 수 있는 15 내지 50머 길이의 각각의 정방향 및 역방향 프라이머 쌍을 모두 포함하는 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인용 키트 |
19 |
19 제 18항에 있어서, 수컷 마우스의 생식세포를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인용 키트 |
20 |
20 제 18항에 있어서, RNA로부터 cDNA를 합성하기 위한 역전사효소, cNTPs 및 rNTP(사전 혼합형 또는 분리 공급형), DNA 중합 효소 및, 세척 완충용액으로 구성된 반응시약군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 디에틸스틸베스트롤에 대한 세포주기 조절 관련 유전자의 발현 여부 확인용 키트 |
지정국 정보가 없습니다 |
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패밀리정보가 없습니다 |
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순번 | 연구부처 | 주관기관 | 연구사업 | 연구과제 |
---|---|---|---|---|
1 | 환경부 | 한국화학연구원 부설 안전성평가연구소 | 차세대 핵심환경기술개발사업 | 유해물질에 의한 생식계 염색체 이상 판정기술 개발 |
2 | 지식경제부 | 한국화학연구원 부설 안전성평가연구소 | 첨단 독성평가기술 개발사업 | 독성유전체기술을 이용한 독성평가 기반기술 개발사업 |
특허 등록번호 | 10-1194260-0000 |
---|
표시번호 | 사항 |
---|---|
1 |
출원 연월일 : 20100119 출원 번호 : 1020100004627 공고 연월일 : 20121029 공고 번호 : 특허결정(심결)연월일 : 20120827 청구범위의 항수 : 16 유별 : C12Q 1/68 발명의 명칭 : 디에틸스틸베스트롤에 의해 유도된 생식계 유전독성을 이용한 유전독성물질 검출용 키트 및 이의 검출 방법 존속기간(예정)만료일 : |
순위번호 | 사항 |
---|---|
1 |
(권리자) 한국화학연구원 대전광역시 유성구... |
제 1 - 3 년분 | 금 액 | 334,500 원 | 2012년 10월 19일 | 납입 |
제 4 년분 | 금 액 | 274,400 원 | 2015년 09월 18일 | 납입 |
제 5 년분 | 금 액 | 274,400 원 | 2016년 09월 27일 | 납입 |
제 6 년분 | 금 액 | 274,400 원 | 2017년 09월 01일 | 납입 |
제 7 년분 | 금 액 | 354,000 원 | 2018년 09월 17일 | 납입 |
제 8 년분 | 금 액 | 354,000 원 | 2019년 09월 18일 | 납입 |
제 9 년분 | 금 액 | 354,000 원 | 2020년 09월 22일 | 납입 |
번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
---|---|---|---|---|
1 | [특허출원]특허출원서 | 2010.01.19 | 수리 (Accepted) | 1-1-2010-0034019-35 |
2 | 의견제출통지서 | 2011.07.28 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2011-0422747-82 |
3 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 | 2011.09.28 | 수리 (Accepted) | 1-1-2011-0759142-37 |
4 | [명세서등 보정]보정서 | 2011.09.28 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2011-0759141-92 |
5 | 의견제출통지서 | 2012.03.22 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2012-0169004-09 |
6 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 | 2012.03.26 | 수리 (Accepted) | 1-1-2012-0240005-08 |
7 | [명세서등 보정]보정서 | 2012.03.26 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2012-0240004-52 |
8 | 등록결정서 | 2012.08.27 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2012-0497781-05 |
9 | [출원서등 보정]보정서 | 2015.01.08 | 수리 (Accepted) | 1-1-2015-0018331-84 |
10 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2017.09.14 | 수리 (Accepted) | 4-1-2017-5149242-13 |
11 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2017.09.14 | 수리 (Accepted) | 4-1-2017-5149265-52 |
기술번호 | KST2015020860 |
---|---|
자료제공기관 | 미래기술마당 |
기술공급기관 | 한국화학연구원 |
기술명 | 디에틸스틸베스트롤에 의해 유도된 생식계 유전독성을 이용한 유전독성물질 검출용 키트 및 이의 검출 방법 |
기술개요 |
본 발명은 디에틸스틸베스트롤(diethylstilbestrol, DES)에 의해 유도된 생식계 유전독성을 이용한 유전독성물질 검출용 키트 및 이의 검출 방법에 관한 것으로서, 구체적으로 DES 처리된 생식세포의 유전독성에 의해 발현이 증가 또는 감소되는 특정 유전자를 바이오마커로 이용함으로써 시료 내 유전독성물질의 함유 여부 판정을 위해 유용하게 사용할 수 있다. |
개발상태 | 기능 및 개념 검증 |
기술의 우수성 |
1) 생식계 유전독성물질 검출 가능 : 생식세포의 유전독성 유발시 특이적으로 변화하는 유전자를 바이오 마커로 이용함으로써 시료내 유전독성물질의 함유 여부 판정을 위해 활용 가능함 2) 생식계 유전독성 작용 기전 규명에 활용 : 생식세포에서 소핵 증가와 같은 유전독성 유발에 대한 독성 기전 규명에 활용가능함 |
응용분야 | ○ 독성평가 분야, 신물질 (농약, 화학물질, 의약품) 개발 분야 |
시장규모 및 동향 | |
희망거래유형 | |
사업화적용실적 | |
도입시고려사항 |
과제고유번호 | 1415127170 |
---|---|
세부과제번호 | KK-1204 |
연구과제명 | 첨단 독성평가기술 개발사업 |
성과구분 | 등록 |
부처명 | 지식경제부 |
연구관리전문기관명 | 산업기술연구회 |
연구주관기관명 | 안전성평가연구소 |
성과제출연도 | 2012 |
연구기간 | 200801~201212 |
기여율 | 1 |
연구개발단계명 | 기초연구 |
6T분류명 | BT(생명공학기술) |
과제고유번호 | 1485007854 |
---|---|
세부과제번호 | 0120090900100790 |
연구과제명 | 유해물질에 의한 생식계 염색체 이상 판정기술 개발 |
성과구분 | 출원 |
부처명 | 환경부 |
연구관리전문기관명 | 한국환경산업기술원 |
연구주관기관명 | 한국화학연구원부설안전성평가연구소 |
성과제출연도 | 2009 |
연구기간 | 200804~201102 |
기여율 | 1 |
연구개발단계명 | 기초연구 |
6T분류명 | ET(환경기술) |
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