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형광을 이용한 텔로머레이즈 활성(telomerase activity) 측정

  • 기술번호 : KST2015022540
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 형광을 이용한 텔로머라제 활성측정 방법에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 (a) 생물시료 및 TS 프라이머를 dNTP 존재하에 반응시켜, TS 프라이머의 3' 말단에 TTAGGG가 반복되도록 신장시키는 단계; (b) 상기 신장된 TS 프라이머에 양이온을 처리하여 구아닌-사중구조(G-quadruplex)를 형성시킨 다음, 인터컬레이팅(intercalating) 형광물질을 첨가하여 형성된 구아닌-사중구조와 반응시키는 단계; 및 (c) 상기 반응 후에 형광을 측정하는 단계를 포함하는 텔로머라제 활성측정 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 방법은 PCR 과정 없이 빠르고 민감하게 텔로머레이즈 활성을 측정할 수 있으므로, 텔로머레이즈 활성 측정 키트(telomerase activity assay kit)에 활용할 수 있다. 또한, 텔로머레이즈 저해제의 존재여부에 의해 형광발현이 민감하게 반응하고, TS 프라이머를 다른 지지체에 고정할 필요가 없어 매우 간단하고 쉽기 때문에, 초고속탐색시스템(HTS) 및 자동화 장치에 쉽게 적용이 가능하며, 암 진단 및 항암제로서의 텔로머레이즈 저해제의 초기 스크리닝에 활용할 수 있다.
Int. CL G01N 33/50 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01)
CPC G01N 33/5044(2013.01) G01N 33/5044(2013.01) G01N 33/5044(2013.01)
출원번호/일자 1020130071183 (2013.06.20)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2014-0147604 (2014.12.30) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2014.06.19)
심사청구항수 10

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 정봉현 대한민국 대전광역시 유성구
2 정주연 대한민국 대전광역시 유성구
3 쾩쿠앙 흐이 베트남 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)
2 장제환 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2013.06.20 수리 (Accepted) 1-1-2013-0552344-89
2 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)
2014.06.19 수리 (Accepted) 1-1-2014-0574903-41
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2014.12.05 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2015.01.09 수리 (Accepted) 9-1-2015-0003412-97
5 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2015.03.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0206756-20
7 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2015.08.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0563450-94
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번호 청구항
1 1
다음의 단계를 포함하는 텔로머라제 활성 측정방법:(a) 생물시료 및 TS 프라이머를 dNTP 존재하에 반응시켜, TS 프라이머의 3' 말단에 TTAGGG가 반복되도록 신장시키는 단계;(b) 상기 신장된 TS 프라이머에 양이온을 처리하여 구아닌-사중구조(G-quadruplex)를 형성시킨 다음, 인터컬레이팅(intercalating) 형광물질을 첨가하여 형성된 구아닌-사중구조와 반응시키는 단계; 및(c) 상기 반응 후에 형광을 측정하는 단계
2 2
다음의 단계를 포함하는 텔로머라제 활성 정량방법: (a) 생물시료 및 TS 프라이머를 dNTP 존재하에 반응시켜, TS 프라이머의 3' 말단에 TTAGGG가 반복되도록 신장시키는 단계;(b) 상기 신장된 TS 프라이머에 양이온을 처리하여 구아닌-사중구조(G-quadruplex)를 형성시킨 다음, 인터컬레이팅(intercalating) 형광물질을 첨가하여 형성된 구아닌-사중구조와 반응시키는 단계; 및(c) 상기 반응 후에 형광을 측정하여 정량하는 단계
3 3
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 (a) 단계의 생물시료는 세포 또는 조직 추출물인 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 (a) 단계의 TS 프라이머는 텔로머라제 주형이 되는 올리고뉴클레오타이드(oligonucleotied)인 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 (b) 단계의 양이온은 칼슘이온(K+) 또는 나트륨이온(Na+)인 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 (b)단계의 인터컬레이팅(intercalating) 형광물질은 아크리딘 호모다이머(Acridine homodimer) 및 이의 유도체, 아크리딘 오렌지(Acridine Orange) 및 이의 유도체, 7-아미노액티노마이신 D(7-aminoactinomycin D, 7-AAD) 및 이의 유도체, 액티노마이신 D(Actinomycin D) 및 이의 유도체, 에이씨엠에이(ACMA, 9-amino-6-chloro-2-methoxyacridine) 및 이의 유도체, 디에이피아이(DAPI) 및 이의 유도체, 디하이드로에티듐(Dihydroethidium) 및 이의 유도체, 에티듐 브로마이드(Ethidium bromide) 및 이의 유도체, 에티듐 호모다이머-1(EthD-1) 및 이의 유도체, 에티듐 호모다이머-2(EthD-2) 및 이의 유도체, 에티듐 모노아자이드(Ethidium monoazide) 및 이의 유도체, 헥시디움 아이오다이드(Hexidium iodide) 및 이의 유도체, 비스벤지마이드(bisbenzimide, Hoechst 33258) 및 이의 유도체, 호에크스트 33342(Hoechst 33342) 및 이의 유도체, 호에크스트 34580(Hoechst 34580) 및 이의 유도체, 하이드로옥시스티바미딘(hydroxystilbamidine) 및 이의 유도체, 엘디에스 751(LDS 751) 및 이의 유도체, 프로피디움 아이오다이드(Propidium Iodide, PI) 및 이의 유도체 및 사이다이스(Cy-dyes) 유도체로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
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다음 단계를 포함하는 텔로머라제 활성 저해제의 스크리닝 방법: (a) 텔로머라제와 TS 프라이머를 텔로머라제 저해제 후보물질 및 dNTP 존재하에 반응시켜, TS 프라이머의 3' 말단에 TTAGGG가 반복되도록 신장시키는 단계;(b) 상기 신장된 TS 프라이머에 양이온을 처리하여 구아닌-사중구조(G-quadruplex)를 형성시킨 다음, 인터컬레이팅(intercalating) 형광물질을 첨가하여 형성된 구아닌-사중구조와 반응시키는 단계; 및(c) 상기 반응 후에 형광을 측정하여 텔로머라제 저해제를 선별하는 단계
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제7항에 있어서, 상기 (a) 단계의 TS 프라이머는 텔로머라제 주형이 되는 올리고뉴클레오타이드(oligonucleotied)인 것을 특징으로 하는 방법
9 9
제7항에 있어서, 상기 (b) 단계의 양이온은 칼슘이온(K+) 또는 나트륨이온(Na+)인 것을 특징으로 하는 방법
10 10
제7항에 있어서, 상기 (b)단계의 인터컬레이팅(intercalating) 형광물질은 아크리딘 호모다이머(Acridine homodimer) 및 이의 유도체, 아크리딘 오렌지(Acridine Orange) 및 이의 유도체, 7-아미노액티노마이신 D(7-aminoactinomycin D, 7-AAD) 및 이의 유도체, 액티노마이신 D(Actinomycin D) 및 이의 유도체, 에이씨엠에이(ACMA, 9-amino-6-chloro-2-methoxyacridine) 및 이의 유도체, 디에이피아이(DAPI) 및 이의 유도체, 디하이드로에티듐(Dihydroethidium) 및 이의 유도체, 에티듐 브로마이드(Ethidium bromide) 및 이의 유도체, 에티듐 호모다이머-1(EthD-1) 및 이의 유도체, 에티듐 호모다이머-2(EthD-2) 및 이의 유도체, 에티듐 모노아자이드(Ethidium monoazide) 및 이의 유도체, 헥시디움 아이오다이드(Hexidium iodide) 및 이의 유도체, 비스벤지마이드(bisbenzimide, Hoechst 33258) 및 이의 유도체, 호에크스트 33342(Hoechst 33342) 및 이의 유도체, 호에크스트 34580(Hoechst 34580) 및 이의 유도체, 하이드로옥시스티바미딘(hydroxystilbamidine) 및 이의 유도체, 엘디에스 751(LDS 751) 및 이의 유도체, 프로피디움 아이오다이드(Propidium Iodide, PI) 및 이의 유도체 및 사이다이스(Cy-dyes) 유도체로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 한국생명공학연구원 주요사업(연구개발과제) 나노바이오메디컬 융합 진단/치료 기술 개발
2 교육과학기술부 한국생명공학연구원 원천기술개발사업 나노이온소자 적용을 위한 바이오 컨텐츠 엔지니어링
3 교육과학기술부 한국생명공학연구원 원천기술개발사업 식중독 유발인자 신속검출 원천기술 및 통합 모듈시스템 개발