요약 | 본 발명은 재설계 유전자 회로를 이용한 섬유소분해활성 효소의 신규 탐색방법에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 재설계 유전자 회로를 이용한 섬유소분해활성 효소의 신규 탐색방법 및 상기 섬유소분해활성 효소에 의해 분해되는 셀로비오스의 정량방법에 관한 것이다.본 발명의 재설계 유전자회로를 이용하면, 셀로비오스의 양에 비례하는 셀로비오스 인지 전사조절 단백질(CelR)이 리포터 단백질의 발현을 유도하도록 함으로써, 셀로비오스를 고감도로 빠르게 감지하고 정량화 함으로서 셀로비오스의 감지 및 정량적 분석에 활용할 수 있고, 셀로비오스를 유리하는 exo형 섬유소분해효소의 활성을 측정하거나 새로운 exo형 섬유소분해효소 탐색할 수 있다. |
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Int. CL | C12N 1/21 (2006.01) C12Q 1/34 (2006.01) C12N 15/65 (2006.01) |
CPC | |
출원번호/일자 | 1020130164442 (2013.12.26) |
출원인 | 한국생명공학연구원 |
등록번호/일자 | 10-1639424-0000 (2016.07.07) |
공개번호/일자 | 10-2015-0075967 (2015.07.06) 문서열기 |
공고번호/일자 | (20160713) 문서열기 |
국제출원번호/일자 | |
국제공개번호/일자 | |
우선권정보 | |
법적상태 | 등록 |
심사진행상태 | 수리 |
심판사항 | |
구분 | 신규 |
원출원번호/일자 | |
관련 출원번호 | |
심사청구여부/일자 | Y (2013.12.26) |
심사청구항수 | 21 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
---|---|---|---|
1 | 한국생명공학연구원 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
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1 | 이승구 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
2 | 권길광 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
3 | 나유진 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
4 | 최수림 | 대한민국 | 경상남도 진주시 |
5 | 김하성 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
6 | 이대희 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
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1 | 장제환 | 대한민국 | 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소) |
2 | 이처영 | 대한민국 | 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소) |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
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1 | 한국생명공학연구원 | 대전광역시 유성구 |
번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
---|---|---|---|---|
1 | [특허출원]특허출원서 [Patent Application] Patent Application |
2013.12.26 | 수리 (Accepted) | 1-1-2013-1192001-13 |
2 | 선행기술조사의뢰서 Request for Prior Art Search |
2014.08.06 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
3 | 선행기술조사보고서 Report of Prior Art Search |
2014.09.15 | 수리 (Accepted) | 9-1-2014-0073544-44 |
4 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2015.02.05 | 수리 (Accepted) | 4-1-2015-0007152-08 |
5 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2015.03.19 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2015-0185216-50 |
6 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 [Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation) |
2015.05.19 | 수리 (Accepted) | 1-1-2015-0479910-44 |
7 | [명세서등 보정]보정서 [Amendment to Description, etc.] Amendment |
2015.05.19 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2015-0479912-35 |
8 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2015.09.22 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2015-0651595-92 |
9 | [명세서등 보정]보정서 [Amendment to Description, etc.] Amendment |
2015.11.23 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2015-1138765-90 |
10 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 [Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation) |
2015.11.23 | 수리 (Accepted) | 1-1-2015-1138762-53 |
11 | 최후의견제출통지서 Notification of reason for final refusal |
2016.03.26 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2016-0224795-57 |
12 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 [Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation) |
2016.05.24 | 수리 (Accepted) | 1-1-2016-0497614-91 |
13 | [명세서등 보정]보정서 [Amendment to Description, etc.] Amendment |
2016.05.24 | 보정승인 (Acceptance of amendment) | 1-1-2016-0497655-52 |
14 | 등록결정서 Decision to grant |
2016.07.06 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2016-0489864-02 |
번호 | 청구항 |
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1 |
1 다음 단계를 포함하는 셀로비오스의 정량방법:(a) 셀로비오스 감지용 재조합 미생물을 셀로비오스를 함유하는 샘플과 접촉시키는 단계; 및(b) 상기 샘플 내에 존재하는 셀로비오스에 의해 발현이 유도된 리포터 단백질의 활성을 분석하여, 샘플 내에 존재하는 셀로비오스를 정량하는 단계:여기서, 상기 셀로비오스 감지용 재조합 미생물은 다음을 포함하는 셀로비오스 감지용 재설계 유전자회로를 함유하는 것을 특징으로 함:(i) 셀로비오스를 인지하여 하류의 리포터 단백질의 발현을 유도하는 전사조절 단백질을 코딩하는 서열번호 1의 염기서열로 표시되는 CelR 유전자; (ii) 형광 단백질을 코딩하는 유전자 및 항생제 저항성 유전자로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 리포터 유전자; (iii) 상기 전사 조절 단백질의 발현을 조절하는 프로모터; 및(iv) 'tgggagcgctccca(서열번호 4)' 의 염기서열을 포함하는 상기 전사 조절 단백질이 결합하여 하류의 리포터 유전자의 발현을 조절하는 프로모터 |
2 |
2 제1항에 있어서, 상기 유전자회로의 상기 리포터 유전자와 상기 리포터 유전자의 발현을 조절하는 프로모터는 상호작동가능하게 연결되어 있는 것을 특징으로 하는 방법 |
3 |
3 제1항에 있어서, 상기 리포터 유전자의 발현을 조절하는 프로모터는 상기 전사조절 단백질과 결합하여 상기 리포터 유전자의 발현을 조절하는 것을 특징으로 하는 방법 |
4 |
4 제1항에 있어서, 상기 리포터 유전자의 발현을 조절하는 프로모터는 trc 프로모터 중 lacI 와 결합하는 부분을 'tgggagcgctccca(서열번호 4)'로 치환한 프로모터인 것을 특징으로 하는 방법 |
5 |
5 제1항에 있어서, 상기 형광단백질은 GFP, GFPUV, sfGFP 및 RFP로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법 |
6 |
6 제1항에 있어서, 상기 항생제 저항성 유전자는 카나마이신 저항성 유전자, 클로람페니콜 저항성 유전자 및 테트라사이클린 저항성 유전자로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법 |
7 |
7 제1항에 있어서, 상기 재설계 유전자회로는 RBS(ribosome binding site)를 코딩하는 유전자를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법 |
8 |
8 제1항에 있어서, 상기 리포터 유전자는 형광 단백질을 코딩하는 유전자 및 항생제 저항성 유전자로 구성된 이중 리포터 유전자인 것을 특징으로 하는 방법 |
9 |
9 제1항에 있어서, 상기 미생물은 세균, 효모, 식물세포 및 동물세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법 |
10 |
10 제1항에 있어서, 상기 리포터 단백질의 활성 분석은 미생물 콜로니 이미지 분석, 형광스펙트럼 분석, 형광유세포분석 (FACS) 및 항생제 내성 측정법으로 구성된 군에서 선택되는 방법을 이용하는 것을 특징으로 하는 방법 |
11 |
11 다음 단계를 포함하는 섬유소분해효소 생산균주의 스크리닝 방법:(a) 셀로비오스 감지용 재조합 미생물과 섬유소 화합물 및 메타게놈 라이브러리 샘플을 접촉시키는 단계; (b) 상기 샘플 내에 존재하는 섬유소분해효소 활성을 가지는 균주에 의해 생산된 셀로비오스에 의해, 발현이 유도된 리포터 단백질의 활성을 분석하는 단계; 및(c) 상기 분석된 리포터 단백질의 활성을 기반으로, 섬유소분해효소 활성을 가지는 섬유소분해효소 생산균주를 선별하는 단계:여기서, 상기 셀로비오스 감지용 재조합 미생물은 다음을 포함하는 셀로비오스 감지용 재설계 유전자회로를 함유하는 것을 특징으로 함:(i) 셀로비오스를 인지하여 하류의 리포터 단백질의 발현을 유도하는 전사조절 단백질을 코딩하는 서열번호 1의 염기서열로 표시되는 CelR 유전자; (ii) 형광 단백질을 코딩하는 유전자 및 항생제 저항성 유전자로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 리포터 유전자; (iii) 상기 전사 조절 단백질의 발현을 조절하는 프로모터; 및(iv) 'tgggagcgctccca(서열번호 4)' 의 염기서열을 포함하는 상기 전사 조절 단백질이 결합하여 하류의 리포터 유전자의 발현을 조절하는 프로모터 |
12 |
12 제11항에 있어서, 상기 유전자회로의 상기 리포터 유전자와 상기 리포터 유전자의 발현을 조절하는 프로모터는 상호작동가능하게 연결되어 있는 것을 특징으로 하는 방법 |
13 |
13 제11항에 있어서, 상기 리포터 유전자의 발현을 조절하는 프로모터는 상기 전사조절 단백질과 결합하여 상기 리포터 유전자의 발현을 조절하는 것을 특징으로 하는 방법 |
14 |
14 제11항에 있어서, 상기 리포터 유전자의 발현을 조절하는 프로모터는 trc 프로모터 중 lacI 와 결합하는 부분을 'tgggagcgctccca(서열번호 4)'로 치환한 프로모터인 것을 특징으로 하는 방법 |
15 |
15 제11항에 있어서, 상기 형광단백질은 GFP, GFPUV, sfGFP 및 RFP로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법 |
16 |
16 제11항에 있어서, 상기 항생제 저항성 유전자는 카나마이신 저항성 유전자, 클로람페니콜 저항성 유전자 및 테트라사이클린 저항성 유전자로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법 |
17 |
17 제11항에 있어서, 상기 재설계 유전자회로는 RBS(ribosome binding site)를 코딩하는 유전자를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법 |
18 |
18 제11항에 있어서, 상기 리포터 유전자는 형광 단백질을 코딩하는 유전자 및 항생제 저항성 유전자로 구성된 이중 리포터 유전자인 것을 특징으로 하는 방법 |
19 |
19 제11항에 있어서, 상기 미생물은 세균, 효모, 식물세포 및 동물세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법 |
20 |
20 제11항에 있어서, 상기 리포터 단백질의 활성 분석은 미생물 콜로니 이미지 분석, 형광스펙트럼 분석, 형광유세포분석 (FACS) 및 항생제 내성 측정법으로 구성된 군에서 선택되는 방법을 이용하는 것을 특징으로 하는 방법 |
21 |
21 삭제 |
22 |
22 제11항에 있어서, 상기 섬유소분해효소는 exo형 또는 endo형 섬유소분해효소인 것을 특징으로 하는 방법 |
23 |
23 삭제 |
24 |
24 삭제 |
지정국 정보가 없습니다 |
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순번 | 패밀리번호 | 국가코드 | 국가명 | 종류 |
---|---|---|---|---|
1 | WO2015099456 | WO | 세계지적재산권기구(WIPO) | FAMILY |
순번 | 패밀리번호 | 국가코드 | 국가명 | 종류 |
---|---|---|---|---|
1 | WO2015099456 | WO | 세계지적재산권기구(WIPO) | DOCDBFAMILY |
순번 | 연구부처 | 주관기관 | 연구사업 | 연구과제 |
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1 | 농림축산식품부 | 한국생명공학연구원 | 차세대 바이오그린21사업 | 바이오부품/회로 적용 감지식물 기술개발 |
2 | 미래창조과학부 | 한국생명공학연구원 | 원천기술개발사업(글로벌프론티어) | 지능형 바이오시스템 구성 고기능 바이오부품/소자 및 분자공학기술 개발 |
3 | 교육과학기술부 | 한국생명공학연구원 | 주요사업(연구개발과제) | 바이오화학 플랫폼케미컬 생산 스마트 세포공장 기술개발 |
4 | 교육과학기술부 | 한국생명공학연구원 | 협동연구개발사업(기초기술연구회) | Cellulose-based biofuel 생산효율 향상을 위한 합성생물학 기술 개발 |
특허 등록번호 | 10-1639424-0000 |
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표시번호 | 사항 |
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1 |
출원 연월일 : 20131226 출원 번호 : 1020130164442 공고 연월일 : 20160713 공고 번호 : 특허결정(심결)연월일 : 20160706 청구범위의 항수 : 6 유별 : C12N 15/65 발명의 명칭 : 재설계 유전자회로를 이용한 섬유소분해효소의 신규 탐색 및 정량방법 존속기간(예정)만료일 : |
순위번호 | 사항 |
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1 |
(권리자) 한국생명공학연구원 대전광역시 유성구... |
제 1 - 3 년분 | 금 액 | 432,000 원 | 2016년 07월 08일 | 납입 |
제 4 년분 | 금 액 | 251,000 원 | 2019년 06월 03일 | 납입 |
제 5 년분 | 금 액 | 86,000 원 | 2019년 12월 20일 | 납입 |
번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
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1 | [특허출원]특허출원서 | 2013.12.26 | 수리 (Accepted) | 1-1-2013-1192001-13 |
2 | 선행기술조사의뢰서 | 2014.08.06 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
3 | 선행기술조사보고서 | 2014.09.15 | 수리 (Accepted) | 9-1-2014-0073544-44 |
4 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2015.02.05 | 수리 (Accepted) | 4-1-2015-0007152-08 |
5 | 의견제출통지서 | 2015.03.19 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2015-0185216-50 |
6 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 | 2015.05.19 | 수리 (Accepted) | 1-1-2015-0479910-44 |
7 | [명세서등 보정]보정서 | 2015.05.19 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2015-0479912-35 |
8 | 의견제출통지서 | 2015.09.22 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2015-0651595-92 |
9 | [명세서등 보정]보정서 | 2015.11.23 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2015-1138765-90 |
10 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 | 2015.11.23 | 수리 (Accepted) | 1-1-2015-1138762-53 |
11 | 최후의견제출통지서 | 2016.03.26 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2016-0224795-57 |
12 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 | 2016.05.24 | 수리 (Accepted) | 1-1-2016-0497614-91 |
13 | [명세서등 보정]보정서 | 2016.05.24 | 보정승인 (Acceptance of amendment) | 1-1-2016-0497655-52 |
14 | 등록결정서 | 2016.07.06 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2016-0489864-02 |
기술번호 | KST2015023164 |
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자료제공기관 | NTB |
기술공급기관 | 한국생명공학연구원 |
기술명 | 재설계 유전자회로를 이용한 섬유소분해효소 활성의 신규 탐색 및 정량방법 |
기술개요 |
본 발명은 재설계 유전자 회로를 이용한 섬유소분해활성 효소의 신규 탐색방법에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 재설계 유전자 회로를 이용한 섬유소분해활성 효소의 신규 탐색방법 및 상기 섬유소분해활성 효소에 의해 분해되는 셀로비오스의 정량방법에 관한 것이다.본 발명의 재설계 유전자회로를 이용하면, 셀로비오스의 양에 비례하는 셀로비오스 인지 전사조절 단백질(CelR)이 리포터 단백질의 발현을 유도하도록 함으로써, 셀로비오스를 고감도로 빠르게 감지하고 정량화 함으로서 셀로비오스의 감지 및 정량적 분석에 활용할 수 있고, 셀로비오스를 유리하는 exo형 섬유소분해효소의 활성을 측정하거나 새로운 exo형 섬유소분해효소 탐색할 수 있다. |
개발상태 | 특허만신청(등록) |
기술의 우수성 | |
응용분야 | 바이오에너지 및 바이오리파이너리 관련 산업 |
시장규모 및 동향 | |
희망거래유형 | 라이센스, |
사업화적용실적 | |
도입시고려사항 |
과제고유번호 | 1395030252 |
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세부과제번호 | PJ009524062013 |
연구과제명 | 바이오부품/회로 적용 감지식물 기술개발 |
성과구분 | 출원 |
부처명 | 농촌진흥청 |
연구관리전문기관명 | |
연구주관기관명 | |
성과제출연도 | 2013 |
연구기간 | 201302~201412 |
기여율 | 0.25 |
연구개발단계명 | 기초연구 |
6T분류명 | BT(생명공학기술) |
과제고유번호 | 1711005851 |
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세부과제번호 | 2011-0031944 |
연구과제명 | 지능형 바이오시스템 구성 고기능 바이오부품/소자 및 분자공학기술 개발 |
성과구분 | 출원 |
부처명 | 미래창조과학부 |
연구관리전문기관명 | |
연구주관기관명 | |
성과제출연도 | 2013 |
연구기간 | 201109~202008 |
기여율 | 0.25 |
연구개발단계명 | 기초연구 |
6T분류명 | BT(생명공학기술) |
과제고유번호 | 1711006335 |
---|---|
세부과제번호 | KRCF-협동-1328 |
연구과제명 | Cellulose-based Biofuel 생산효율 향상을 위한 합성생물학 기술개발 |
성과구분 | 출원 |
부처명 | 미래창조과학부 |
연구관리전문기관명 | |
연구주관기관명 | |
성과제출연도 | 2013 |
연구기간 | 201012~201312 |
기여율 | 0.25 |
연구개발단계명 | 기초연구 |
6T분류명 | BT(생명공학기술) |
과제고유번호 | 1711009345 |
---|---|
세부과제번호 | KGM2121312 |
연구과제명 | 바이오화학 플랫폼케미컬 생산 스마트 세포공장 기술개발 |
성과구분 | 출원 |
부처명 | 미래창조과학부 |
연구관리전문기관명 | |
연구주관기관명 | |
성과제출연도 | 2013 |
연구기간 | 201201~201412 |
기여율 | 0.25 |
연구개발단계명 | 기초연구 |
6T분류명 | BT(생명공학기술) |
[1020140144329] | 연속 대사경로 효소 집합체 구축을 통한 이소프레노이드 고효율 생산 방법(Improved production of isoprenoids by metabolosome construction) | 새창보기 |
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[1020140070684] | 재설계된 감지 단백질을 이용한 유해 방향족 화합물 검출용 인공바이오센서 및 이의 제조방법(Artificial biosensor for non-degradable harmful aromatic compound detection using remodeled sensing protein and manufacturing method thereof) | 새창보기 |
[1020140070683] | 메타게놈 유래 신규 베이어 빌리거 모노옥시게나아제 BVMOgm1(Novel Baeyer-Villiger monooxygenase BVMOgm1 from Metagenome) | 새창보기 |
[1020140070682] | 메타게놈 유래 신규 베이어 빌리거 모노옥시게나아제 BVMOsm1(Novel Baeyer-Villiger monooxygenase BVMOsm1 from Metagenome) | 새창보기 |
[1020130164442] | 재설계 유전자회로를 이용한 섬유소분해효소 활성의 신규 탐색 및 정량방법 | 새창보기 |
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