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1) 인간을 제외한 포유동물로부터 심장을 분리하는 단계;2) 단계 1에서 분리한 심장으로부터 심근조직을 분리하는 단계;3) 단계 2에서 분리한 심근조직을 일정한 수위의 관류(Normal Tyrode) 용액을 포함하고, 상기 용액의 출렁임을 방지하는 챔버에 담그는 단계;4) 단계 3에서 챔버에 담근 심근조직을 실리콘이 코팅된 플레이트 바닥에 고정시키는 단계; 및5) 단계 4의 고정된 심근조직에 약물을 처리한 뒤 활동전위를 측정하는 단계를 포함하는 심근조직 활동전위 측정을 통한 심장기능 위해성 약물의 스크리닝 방법
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제 1항에 있어서, 단계 1의 동물은 기니픽, 토끼 및 개로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
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제 1항에 있어서, 단계 2의 심근조직은 푸르킨예 섬유(Purkinje fiber), 유두근(papillary muscle) 및 심실근(ventricular muscle)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
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제 3항에 있어서, 심근조직은 푸르킨예 섬유 또는 유두근인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1항에 있어서, 단계 3의 관류 용액은 135 내지 145 mM NaCl, 5 내지 6 mM KCl, 5 내지 10 mM HEPES, 0
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제 5항에 있어서, 단계 3의 관류 용액은 143 mM NaCl, 5
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제 1항에 있어서, 단계 3의 챔버는 심근조직을 핀고정하기 위한 실리콘이 채워져 있고, 관류 용액이 일정한 수위를 유지하기 위한 배수관을 포함하고, 용액의 출렁임이 방지되도록 칸막이를 포함하고 챔버 윗부분에 구멍을 뚫어놓은 도 3의 구조를 가지는 챔버인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1항에 있어서, 단계 4의 실리콘이 코팅된 플레이트는 실리콘와 챠콜을 18:1 내지 22:1로 혼합한 것으로 코팅된 플레이트인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1항에 있어서, 단계 4의 실리콘이 코팅된 플레이트는 실리콘와 챠콜을 20:1로 혼합한 것으로 코팅된 플레이트인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1항에 있어서, 단계 5의 심근조직에 약물을 처리한 뒤 활동전위를 측정하는 단계는 하기 단계로 수행하는 것을 특징으로 하는 방법; (1) 10 ㏁ 내지 50 ㏁, 3 M KCl로 충진된 미세유리관을 홀더(holder)에 끼우고 미세조작기(micromanipulator)를 사용해서 미세유리관의 끝을 조직 위에 가까이 접촉시키는 단계; (2) 자극 증폭기와 활동전위 관찰 컴퓨터 프로그램을 실행시키고, 단계 1의 미세유리관 끝을 조직세포에 삽입시키는 단계; (3) 심근조직에 조직이 박동하는 크기에 따라 볼트(Volatge) 단위, 심장박동수(heart rate)에 따라 Hz, ms 단위로 조절하여 자극을 주는 단계; (4) 안정막전위(resting membrane potential)가 -70 mV 이하로 내려갈 때까지 미세유리관의 위치를 조작하며 전형적인 활동전위의 모양을 관찰하는 단계; 및 (5) 관류 용액을 관류시키면서 (4)의 상태를 1시간 내지 2시간 유지하며, 활동전위의 모양이 일정하게 유지되면 농도별로 시험 약물을 관류용액에 용해시켜 관류시키면서 약물 처리에 따른 활동전위의 변화를 관찰하는 단계
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제 1항에 있어서, 단계 5의 심근조직에 약물을 처리한 뒤 활동전위를 측정하는 단계는 하기 단계로 수행하는 것을 특징으로 하는 방법; (1) 10 ㏁ 내지 50 ㏁, 3 M KCl로 충진된 미세유리관을 홀더(holder)에 끼우고 미세조작기(micromanipulator)를 사용해서 미세유리관의 끝을 조직 위에 가까이 접촉시키는 단계; (2) 자극 증폭기와 활동전위 관찰 컴퓨터 프로그램을 실행시키고, 단계 1의 미세유리관 끝을 조직세포에 삽입시키는 단계; (3) 심근조직에 조직이 박동하는 크기에 따라 볼트(Volatge) 단위, 심장박동수(heart rate)에 따라 Hz, ms 단위로 조절하여 자극을 주는 단계; (4) 안정막전위(resting membrane potential)가 -70 mV 이하로 내려갈 때까지 미세유리관의 위치를 조작하며 전형적인 활동전위의 모양을 관찰하는 단계; 및 (5) 관류 용액을 관류시키면서 (4)의 상태를 1시간 내지 2시간 유지하며, 활동전위의 모양이 일정하게 유지되면 농도별로 시험 약물을 관류용액에 용해시켜 관류시키면서 약물 처리에 따른 활동전위의 변화를 관찰하는 단계
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