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인체리포코틴을E.COLI에서생산시가용성인상태로생산정제하는방법및인체리포코틴CDNA서열을함유하는벡터

  • 기술번호 : KST2015119584
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 인체 리코포틴을 유전자 재조합 기술에 의하여 생산하는 방법 및 이를 정제하는 방법에 관한 것이다.스테로이드 활성인 소염작용을 보이면서 스테로이드의 여러 부작용을 나타내지 않으므로 의약품으로의 이이 가능성이 큰 리코포틴을충분한 양 얻기 위해서는 유전자 재조합 기술을 이용하는 것이 바람직하며 유전자 운반체와 숙주 연구를 통해 가장 효율적인 생산법 확립이 필요하다.사람 태반에서 mRNA를 분리하고 이로부터 cDNA를 제조,플라스미드 벡터와 재조합시키고 이로서 대장균을 형질전환시켜 얻은 형질 전환 균체중에서 리포코틴 I을 코드하는 유전자를 가진 클론을 선별,플라스미드 pLCI을 제조한다. 이 pLCI을 절단하여 리포코틴 코드 유전자 절편을 분리하고 한편으로 플라스미드 pUC8을 처리해 제조한 벡터를 리포코틴 유전자가 포함된 절편 및 합성 올리고 뉴클레오티드 링커와 접합시켜 플라스미드 pLCI-S를 제조한다. 이를 다시 절단하여 리포코틴 유전자 절편을 분리하고 한편으로 플라스미드 pKK233-2로부터 중복 절단한 벡터를 제조하여 이를 리포코틴 유전자 절편과 접합시켜 플라스미드 pHT1을 제조한다. 이를 사용해 E.coli에서 가용성인 인체 리포코틴을 생산하고 분쇄용 완충액에 녹이고 원심분리,추출로 부분정제한 후 크로마토그래피로 순수 정제한다.
Int. CL C12N 15/00 (2006.01)
CPC C07K 14/4721(2013.01) C07K 14/4721(2013.01) C07K 14/4721(2013.01) C07K 14/4721(2013.01) C07K 14/4721(2013.01) C07K 14/4721(2013.01)
출원번호/일자 1019890000223 (1989.01.11)
출원인 한국과학기술연구원
등록번호/일자 10-0044657-0000 (1991.09.27)
공개번호/일자 10-1990-0011894 (1990.08.02) 문서열기
공고번호/일자 1019910002855 (19910506) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (1989.01.11)
심사청구항수 13

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 나도선 대한민국 서울시강남구
2 박순희 대한민국 서울시성북구
3 강성만 대한민국 서울시노원구
4 허광태 대한민국 서울시강동구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 김석환 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로**길 *, 테헤란오피스빌딩 ***호 시몬국제특허법률사무소 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 서울시성북구
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 출원심사청구서
Request for Examination		 1989.01.11 수리 (Accepted) 1-1-1989-0001285-72
2 대리인선임신고서
Notification of assignment of agent		 1989.01.11 수리 (Accepted) 1-1-1989-0001284-26
3 특허출원서
Patent Application		 1989.01.11 수리 (Accepted) 1-1-1989-0001283-81
4 명세서등보정서
Amendment to Description, etc.		 1989.12.29 수리 (Accepted) 1-1-1989-0001286-17
5 출원공고결정서
Written decision on publication of examined application		 1991.04.08 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-1989-0000686-92
6 등록사정서
Decision to grant		 1991.07.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-1989-0000688-83
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 1999.01.08 수리 (Accepted) 4-1-1999-0002352-05
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 1999.01.18 수리 (Accepted) 4-1-1999-0008675-76
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 1999.02.01 수리 (Accepted) 4-1-1999-0025779-69
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 1999.03.03 수리 (Accepted) 4-1-1999-0041039-77
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 1999.05.26 수리 (Accepted) 4-1-1999-0075472-64
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2000.02.03 수리 (Accepted) 4-1-2000-0014117-45
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2002.03.02 수리 (Accepted) 4-1-2002-0020822-81
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2009.12.15 수리 (Accepted) 4-1-2009-5247056-16
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.02.19 수리 (Accepted) 4-1-2014-5022002-69
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번호 청구항
1 1

사람의 태반에서 mRNA를 분리하고, 이 mRNA로부터 두가닥 cDNA를 제조한 다음에 (dC)n 테일을 붙여 플라스미드 벡터와 재조합시키고 이 재조합 플라스미드로 대장균을 형질전환시켜서 얻어진 형질전환 균체중에서 리포코틴 Ⅰ을 코드하는 유전자를 가진 클론을 선별하는 플라스미드 pLCI의 제조방법

2 2

플라스미드 pLCI을 제한효소 EcRⅠ과 PstⅠ으로 절단하여 리포코틴을 코드하는 유전자가 포함된 절단을 분리하고 한편으로 플라스미드 pUC8을 제한효소 HindⅢ, DNA 폴리머라제 크리나우 절편효소 및 제한효소 Pst Ⅰ 반응으로 처리한 벡터를 제조하여, 이것을 리포코틴 유전자가 포함된 절편 및 합성 올리고 뉴클레오티드 링커와 접합시켜 플라스미드 pLCI-S를 제조하는 방법

3 3

플라스미드 pLCI-S(KCTC 8418P)를 제한효소 Pst Ⅰ과 Nco Ⅰ으로 절단하여 리포코틴 유전자가 포함된 절편을 분리하고, 한편으로 플라스미드 pKK233-2를 제한효소 Pst Ⅰ 및 Nco Ⅰ으로 중복 절단한 벡터를 제조하여, 이것을 리포코틴 유전자가 포함된 절편과 접합시켜서 플라스미드 pHT1을 제조하는 방법

4 4

플라스미드 PLCI(KCTC 8417P)

5 5

플라스미드 PLCI-S(KCTC 8418P)

6 6

플라스미드 pHT1(KCTC 8419P)

7 7

재조합 플라스미드를 사용하여 인체 리포코틴 Ⅰ을 E

8 8

제7항에 있어서, 재조합 플라스미드 pHT1(KCTC 8419P)를 이용하는 방법

9 9

제7항의 방법에 따라서 E

10 10

제9항에 있어서, 리포코틴이 생산된 E

11 11

제10항에서 부분 정제된 리포코틴을 젤 필트레이션 크로마토그라피 및 이온교환 크로마토그라피를 이용하여 순수 정제하는 방법

12 12

제10항에 있어서, 분쇄용 완충액이 양성 이온을 킬레이트(chelate)시키는 성분을 함유하지 않는 방법

13 13

제10항에 있어서, 추출용 완충액이 EDTA(Ethylenediaminetetraacetic acid) EGTA(Ethyleneglycol-bis-(β-aminoethyl ether) N, N, N', N'-tetra acetic acid) 등의 양성 이온을 킬레이트시키는 성분을 함유하는 방법

지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.