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세포배양용 기질로서, 상기 기질의 재료가 키토산, 수용성 키토산 및 이들의 혼합물로 구성되는 군에서 선택되는 물질이고, 상기 기질이 내부 및 외부에 균일한 기공을 갖는 다공성 구슬형태이고, 상기 기공의 크기가 30-150 ㎛이고, 배양될 세포가 상기 기질에 흡착에 의해 부착되어 내부 기공 및 기질 표면에서 성장하는 것을 것을 특징으로 하는 세포 배양용 기질
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제2항의 세포 배양용 기질을 4 - 6시간의 전배양에 적용시켜 흡착에 의해 배양용 세포를 기질에 부착시킨 후, 배양액을 일정주기로 교체하여 상기 세포를 내부 기공 및 기질 표면에서 성장시키는 단계를 포함하는 세포를 배양하는 방법
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1) 아세트산 수용액에 키토산을 용해시킨 키토산 용액, 탈이온수에 수용성 키토산을 용해시킨 수용성 키토산 용액 또는 상기 키토산 용액과 수용성 키토산 용액의 혼합 용액을 제조하는 단계, 2) 단계 1의 용액을 -5 ∼ -65℃의 저온의 유기용매에 적하하여 구슬 형태로 제조하는 단계, 및 3) 단계 2의 키토산 구슬을 동결 건조하는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 세포 배양용 다공성 키토산 구슬의 제조 방법
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제 5항에 있어서, 단계 1의 키토산은 평균 분자량이 30,000 ∼ 100,000이고, 수용성 키토산은 평균 분자량이 100,000 ∼ 400,000인 것을 특징으로 하는 다공성 키토산 구슬의 제조 방법
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제 5항에 있어서, 단계 1의 아세트산 수용액은 1
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제 5항에 있어서, 단계 1의 키토산 용액은 키토산 농도가 0
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제 5항에 있어서, 수용성 키토산 용액은 키토산 농도가 0
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제 5항에 있어서, 단계 1의 키토산과 수용성 키토산의 혼합용액은 키토산과 수용성 키토산의 중량비가 2:8내지 8:2인 것을 특징으로 하는 다공성 키토산 구슬의 제조 방법
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제 5항에 있어서, 단계 2의 유기용매는 클로로사이클로헥산, 클로로펜탄, n-헥산, 디클로로메탄, 클로로포름 또는 에틸아세테이트로 구성되는 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 다공성 키토산 구슬의 제조 방법
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제 5항에 있어서, 단계 2의 유기용매는 -5 ∼ -25℃의 저온을 유지하는 것을 특징으로 하는 다공성 키토산 구슬의 제조 방법
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제 5항에 있어서, 저온을 유지하기 위해 드라이아이스나 냉각기를 이용하여 -5 ∼ -65℃로 유지된 에탄올을 이용하는 것을 특징으로 하는 다공성 키토산 구슬의 제조 방법
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1) 아세트산 수용액에 키토산을 용해시킨 키토산 용액, 탈이온수에 수용성 키토산을 용해시킨 수용성 키토산 용액 또는 상기 키토산 용액과 수용성 키토산 용액의 혼합 용액을 제조하는 단계, 2) 단계 1의 용액을 -5 ∼ -65℃의 저온의 유기용매에 적하하여 구슬 형태로 제조하는 단계, 3) 단계 2의 키토산 구슬을 동결 건조하는 단계, 4) 동결건조된 다공성 키토산 구슬을 중화한 후 산과 유기용매를 제거하고 멸균하는 단계, 5) 배양용액으로 치환하고 다시 동결 건조한 다음 다공성 키토산 구슬을 4 - 6시간의 전배양에 적용시켜 흡착에 의해 배양용 세포를 기질에 부착시키는 단계, 및 6) 배양액을 일정주기로 교체하여 상기 세포를 키토산 구슬의 내부 기공 및 기질 표면에서 성장시키는 단계를 포함하는 세포를 배양하는 방법
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