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벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐, 및 인데노(1,2,3―C,D)파이렌 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 확인 방법

  • 기술번호 : KST2015121935
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 대표적인 다환방향족탄화수소류인 벤조에이안트라센(benz[a]anthracene), 벤조케이플루오란텐(benzo[k]fluoranthene), 및 인데노(1,2,3-c,d)파이렌(indeno(1,2,3-c,d)pyrene) 노출에 대한 암세포의 이동 관련 유전자 발현 여부 확인용 바이오마커 및 이를 이용한 확인 방법에 관한 것으로, 구체적으로 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 및 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 의해 공통적이며 특이적으로 유전자 발현이 증가 또는 감소하는 암세포 이동 관련 바이오마커, 및 이를 이용한 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐, 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌에 대한 노출 여부를 확인하는 방법에 관한 것이며, 본 발명의 암세포 이동 관련 바이오마커는 DNA 마이크로어레이 칩을 통하여 선별된 반응 유전자들을 바이오마커로 이용함으로써, 환경 시료에서 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 및 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 오염에 의한 암세포의 이동성을 모니터링 및 판정하는데 유용하게 사용될 수 있으며, 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 및 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 의해 유발되는 독성 작용 기작을 규명하는 도구로서 유용하게 이용될 수 있다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01) C40B 40/08 (2006.01)
CPC C12Q 1/6886(2013.01) C12Q 1/6886(2013.01) C12Q 1/6886(2013.01) C12Q 1/6886(2013.01)
출원번호/일자 1020110002197 (2011.01.10)
출원인 한국과학기술연구원
등록번호/일자 10-1292840-0000 (2013.07.29)
공개번호/일자 10-2012-0080786 (2012.07.18) 문서열기
공고번호/일자 (20130805) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2011.01.10)
심사청구항수 13

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 류재천 대한민국 서울특별시 종로구
2 송미경 대한민국 서울특별시 성북구
3 김연정 대한민국 서울특별시 성북구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 서울특별시 성북구
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2011.01.10 수리 (Accepted) 1-1-2011-0016869-39
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2013.01.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0045558-30
3 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2013.03.22 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2013-0250935-57
4 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2013.03.22 수리 (Accepted) 1-1-2013-0250932-10
5 등록결정서
Decision to grant
2013.07.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0513368-62
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.02.19 수리 (Accepted) 4-1-2014-5022002-69
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번호 청구항
1 1
하기 모든 유전자 또는 이의 상보가닥 분자가 집적된 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인용 DNA 마이크로어레이 칩: 유전자 등록번호(Genebank) NM_002228[AP-1, jun oncogene], 유전자 등록번호(Genebank) NM_005238[ETS-1, v-ets erythroblastosis virus E26 oncogene homolog 1 (avian)], 유전자 등록번호(Genebank) NM_005985[SNAI1, snail homolog 1 (Drosophila)], 유전자 등록번호(Genebank) NM_002203[ITGA2, integrin, alpha 2 (CD49B, alpha 2 subunit of VLA-2 receptor)], 유전자 등록번호(Genebank) NM_000296[PKD1, polycystic kidney disease 1 (autosomal dominant)], 유전자 등록번호(Genebank) NM_001408[CELSR2, cadherin, EGF LAG seven-pass G-type receptor 2 (flamingo homolog, Drosophila)], 유전자 등록번호(Genebank) NM_002996[CX3CL1, chemokine (C-X3-C motif) ligand 1], 유전자 등록번호(Genebank) NM_012131[CLDN17, claudin 17], 유전자 등록번호(Genebank) NM_015102[NPHP4, nephronophthisis 4], 유전자 등록번호(Genebank) NM_032088[PCDHGA8, protocadherin gamma subfamily A, 8], 유전자 등록번호(Genebank) NM_144966[FREM1, FRAS1 related extracellular matrix 1], 유전자 등록번호(Genebank) NM_001777[CD47, CD47 molecule], 유전자 등록번호(Genebank) NM_002508[NID1, nidogen 1], 유전자 등록번호(Genebank) NM_005560[LAMA5, laminin, alpha 5], 유전자 등록번호(Genebank) NM_006329[FBLN5, fibulin 5], 유전자 등록번호(Genebank) NM_016446[C9orf127, chromosome 9 open reading frame 127], 유전자 등록번호(Genebank) BF312639[RELN, reelin], 유전자 등록번호(Genebank) NM_000638[VTN, vitronectin], 유전자 등록번호(Genebank) NM_001005862[ERBB2, v-erb-b2 erythroblastic leukemia viral oncogene homolog 2, neuro/glioblastoma derived oncogene homolog (avian)], 유전자 등록번호(Genebank) NM_001457[FLNB, filamin B, beta (actin binding protein 278)], 유전자 등록번호(Genebank) NM_001626[AKT2, v-akt murine thymoma viral oncogene homolog 2], 유전자 등록번호(Genebank) NM_001844[COL2A1, collagen, type Ⅱ, alpha 1 (primary osteoarthritis, spondyloepiphyseal dysplasia, congenital)], 유전자 등록번호(Genebank) NM_006113[VAV3, vav 3 oncogene], 유전자 등록번호(Genebank) NM_015059[TLN2, talin 2], 유전자 등록번호(Genebank) NM_016848[SHC3, SHC (Src homology 2 domain containing) transforming protein 3], 유전자 등록번호(Genebank) NM_033641[COL4A6, collagen, type Ⅳ, alpha 6] 및 유전자 등록번호(Genebank) NM_053025[MYLK, myosin, light chain kinase]
2 2
1) 실험군인 피검체 유래 인간 체세포와 대조군인 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌에 노출되지 않은 인간 체세포로부터 각각 RNA를 분리하는 단계;2) 단계 1)의 실험군 및 대조군의 RNA를 cDNA로 합성하면서 실험군과 대조군을 각기 다른 형광물질로 표지하는 단계;3) 단계 2)의 각기 다른 형광물질로 표지된 cDNA를 제 1항의 DNA 마이크로어레이칩과 혼성화시키는 단계;4) 단계 3)의 반응한 DNA 마이크로어레이칩을 분석하는 단계; 및5) 단계 4)의 분석한 데이터에서 제 1항의 DNA 마이크로어레이칩에 집적된 유전자의 발현 정도를 대조군과 비교하여 확인하는 단계를 포함하는 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인 방법
3 3
제 2항에 있어서, 단계 1)의 인간 체세포는 인간의 간 세포 또는 인간 간암 세포인 것을 특징으로 하는 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인 방법
4 4
제 3항에 있어서, 상기 인간 간암 세포는 HepG2인 것을 특징으로 하는 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인 방법
5 5
제 2항에 있어서, 단계 2)의 형광물질은 Cy3, Cy5, FITC(poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate), RITC(rhodamine-B-isothiocyanate) 및 로다민(rhodamine)으로 이루어진 군으로부터 선택하여 사용하는 것을 특징으로 하는 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인 방법
6 6
1) 실험군인 피검체 유래 인간 체세포와 대조군인 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌에 노출되지 않은 인간 체세포로부터 각각 RNA를 분리하는 단계;2) 단계 1)의 RNA를, 제 1항의 암세포 이동 관련 유전자에 상보적이고 상기 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머쌍을 사용하여 실시간 RT-PCR(Real-time reverse transcript polymerase chain reaction)을 수행하는 단계; 및3) 단계 2)의 유전자 산물을 대조군과 비교하여 발현 정도를 확인하는 단계를 포함하는 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인 방법
7 7
제 6항에 있어서, 단계 1)의 인간 체세포는 인간의 간 세포 또는 인간 간암 세포인 것을 특징으로 하는 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인 방법
8 8
제 7항에 있어서, 상기 인간 간암 세포는 HepG2인 것을 특징으로 하는 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인 방법
9 9
제 1항의 DNA 마이크로어레이 칩을 포함하는, 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인용 키트
10 10
제 9항에 있어서, 인간 간 세포 또는 간암 세포를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인용 키트
11 11
제 1항의 암세포 이동 관련 유전자에 상보적으로 결합하고 상기 각각의 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머쌍을 모두 포함하는, 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인용 키트
12 12
제 11항에 있어서, 인간 간 세포 또는 간암 세포를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인용 키트
13 13
제 11항에 있어서, 상기 프라이머쌍은 서열번호 1로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 2로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머쌍; 서열번호 3으로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 4로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머쌍; 서열번호 5로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 6으로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머쌍; 및 서열번호 7로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 8로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머쌍인 것을 특징으로 하는 벤조에이안트라센, 벤조케이플루오란텐 또는 인데노(1,2,3-c,d)파이렌의 노출에 대한 암세포 이동 관련 유전자 발현 여부 확인 방법
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 환경부 한국과학기술연구원 환경융합신기술개발사업 독성오믹스 기술을 이용한 환경유해 화학물질 모니터링 및 예측용 플랫폼 개발