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세포내 키나제 활성화 정도의 측정방법

  • 기술번호 : KST2015123878
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 세포 내 키나제 활성화 정도의 측정방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 모세관 전기영동에 의한 Akt 키나제 활성 또는 활성 조절을 측정하기 위해 표적 기질 분자를 사용하는 키나제 분석방법으로, 사이토카인에 의해 자극된 PC12 세포에서 Akt 효소의 활성화 정도를 정확하고 정밀하며 신속하게 측정하기 위한 모세관 전기영동법을 이용한 세포 내 키나제 활성화 정도의 측정방법에 관한 것이다.키나제, 활성화 정도, 측정방법, 모세관 전기영동, Akt
Int. CL C12Q 1/48 (2006.01) C12N 9/12 (2006.01)
CPC C12Q 1/48(2013.01) C12Q 1/48(2013.01)
출원번호/일자 1020050058027 (2005.06.30)
출원인 한국과학기술연구원
등록번호/일자 10-0668044-0000 (2007.01.05)
공개번호/일자 10-2007-0002474 (2007.01.05) 문서열기
공고번호/일자 (20070116) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2005.06.30)
심사청구항수 4

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 유영숙 대한민국 서울 성북구
2 송은주 대한민국 서울 성북구
3 위문형 대한민국 서울 성북구
4 슈레쉬 바부 인도 서울시 성북구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이학수 대한민국 부산광역시 연제구 법원로 **, ****호(이학수특허법률사무소)
2 백남훈 대한민국 서울특별시 강남구 강남대로 ***, KTB네트워크빌딩**층 한라국제특허법률사무소 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application		 2005.06.30 수리 (Accepted) 1-1-2005-0354826-18
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2006.04.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2006.05.11 수리 (Accepted) 9-1-2006-0028631-08
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2006.07.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2006-0436324-93
5 명세서등보정서
Amendment to Description, etc.		 2006.09.14 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2006-0664850-87
6 의견서
Written Opinion		 2006.09.14 수리 (Accepted) 1-1-2006-0664851-22
7 등록결정서
Decision to grant		 2006.12.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2006-0776612-12
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2009.12.15 수리 (Accepted) 4-1-2009-5247056-16
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.02.19 수리 (Accepted) 4-1-2014-5022002-69
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
1) 에이케이티(Akt) 키나제 활성을 측정하고자 하는 인간 세포를 제외한 세포를 TNF-α 및 IFN-γ 중에서 선택된 1종 이상의 사이토카인으로 처리하는 단계;2) 베타-글리세로포스페이트(beta-glycerophosphate), EGTA(ethylene glycol bis(b-aminoethylether) tetraacetic acid), EDTA(Ethylenediamine tetraacetic acid), Na3VO4, DTT(Dithiothreitol)와; PMSF(Phenylmethylsulfonyl Fluoride), 펩스타틴 에이(pepstatin A), 아프로피닌(aprotinin) 및 루펩틴(leupeptin)으로 이루어진 단백질 억제제 혼합물을 함유하는 세포 용해 완충제를 상기 1)의 세포에 첨가하는 단계;3) 상기 2)의 세포를 원심분리를 이용하여 세포 추출물을 얻는 단계;4) 에이케이티(Akt) 키나제 기질 펩티드 및 ATP-Mg 혼합물을 세포 추출물과 배합하는 단계;5) 상기 배합물을 키나제 완충제 하에서 25 ~ 35 ℃에서 10 ~ 30분간 에이케이티(Akt) 반응시키는 단계;6) 상기 반응물을 UV-모세관 전기영동법을 이용하여 기질 및 반응생성물로 분리시키는 단계; 및7) 분리된 기질과 반응생성물의 양을 정량 분석하여 에이케이티(Akt) 키나제 활성을 측정하는 단계를 포함하여 이루어진 것을 특징으로 하는 인간 세포를 제외한 세포 내 에이케이티(Akt) 키나제 활성 수준을 측정하는 방법
2 2
제 1 항에 있어서, 상기 에이케이티(Akt) 키나제 기질 펩티드는 서열번호 1로 표시되는 것임을 특징으로 하는 방법
3 3
제 1 항에 있어서, 상기 반응생성물은 기질 펩티드 내의 쓰레오닌(Thr)에 대한 포스페이트 잔기의 첨가에 의해 변경된 것임을 특징으로 하는 방법
4 4
제 1 항에 있어서, 상기 키나제 완충제는 베타-글리세롤 포스페이트, EGTA, DTT 및 Na3VO4를 함유하며, pH 7
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.