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목적단백질을 코딩하는 유전자를 기타의 펩티드나 단백질을 코딩하는 유전자와 융합시켜 생체내에서 발현시켜 생성된 융합 단백질로부터 목적단백질을 분리, 정제하는 방법에 있어서, 목적단백질을 코딩하는 유전자와 기타의 펩티드나 단백질을 코딩하는 유전자의 연결점에 7-15개의 아미노산을 코딩하는 DNA 서열을 도입하여 목적단백질과 기타의 펩티드나 단백질의 사이에 7-15개의 아미노산으로 구성된 친화펩티드를 생성하고 이에 의한 단백질 물성 변화에 따른 금속염에 대한 친화성의 차이를 이용하는 선별방법을 포함하는, 융합단백질로부터 목적단백질을 분리, 정제하는 방법
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제1항에 있어서, 융합단백질을 절단반응하여 목적단백질을 융합된 기타 단백질에 친화펩티드가 포함되도록 절단한 후 금속염을 이용한 친화성 선별방법을 이용하여 목적단백질을 분리, 정제하는 방법
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제2항에 있어서, 융합단백질의 절단 반응 다음에 아황산화 반응을 거친 후 금속염 친화성 선별 방법을 수행하는 방법
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제2항에 있어서, 융합단백질 절단반응은 시안화브롬 절단반응을 사용하는 방법
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제1항에 있어서, 목적단백질의 융합단백질을 구성하는 다른 단백질로서 갈락 토시다제의 전체 또는 일부 또는 변형된 형태를 이용하는 방법
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제1항에 있어서, 친화펩티드가 7-15개의 글루탐산으로 구성된 호모펩티드인 방법
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제1항에 있어서, 친화펩티드가 7-15개의 히스티딘으로 구성된 호모펩티드인 방법
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제1항 내지 제7항의 어느 한 항에 있어서, 목적단백질이 프로인슐린인 방법
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프로모터, 갈락토시다제 유전자의 전부 또는 일부, 및 7-15개의 아미노산으로 구성된 친화펩티드를 코딩하는 DNA 서열을 포함하며 임의의 단백질의 유전자를 연결하여 발현할수 있도록 제조된 플라스미드
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10
제9항에 있어서, 상기 임의의 단백질의 유전자가 프로인슐린 유전자 플라스미드
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제10항에 있어서, tac 프로모터 및 10개의 히스티딘으로 구성된 친화 펩티드를 포함하는 플라스미드 pPRO (KCTC 0024 BP)
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제9항의 플라스미드에 의해 형질전환된 대장균 균주
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제12항에 있어서, 대장균 E
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제1항에 있어서 상기 금속염이 CuCl2, MnCl2, FeCl2, CoCl2, NiCl2, ZnCl2, 또는 MgCl2인 방법
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