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간-카르복실에스터라제 1 단백질과 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 간암 진단 조성물

  • 기술번호 : KST2015125988
  • 담당센터 : 서울서부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-6124-6930
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요약 본 발명은 간암 진단용 마커인 간-카르복실에스터라제 1과 특이적으로 결합하는 항체를 사용하여 간암을 진단하는 방법 및 그 항체 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 간암 진단용 마커는 정상인보다 간암 혈액에서 증가하는 차이를 확인함으로써, 간암의 발병을 조기 진단하는 데에 이용될 수 있다. 간암, 진단마커, 혈장, 간-카르복실에스터라제 1
Int. CL G01N 33/576 (2011.01) G01N 33/574 (2011.01) B82Y 5/00 (2011.01) C12Q 1/44 (2011.01)
CPC
출원번호/일자 1020080023707 (2008.03.14)
출원인 연세대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-0975852-0000 (2010.08.09)
공개번호/일자 10-2009-0098366 (2009.09.17) 문서열기
공고번호/일자 (20100813) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2008.03.14)
심사청구항수 7

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 연세대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 서대문구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 백융기 대한민국 서울 서초구
2 나근 대한민국 서울 마포구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 박종만 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로**길 ** 역삼동, 태강빌딩 *층(TOMORROW국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 연세대학교 산학협력단 서울특별시 서대문구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2008.03.14 수리 (Accepted) 1-1-2008-0186036-28
2 보정요구서
Request for Amendment
2008.03.24 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2008-0042971-43
3 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2008.03.25 수리 (Accepted) 1-1-2008-0214301-25
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2008.11.07 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2008.12.05 수리 (Accepted) 9-1-2008-0079132-80
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2010.02.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2010-0071866-38
7 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2010.04.19 수리 (Accepted) 1-1-2010-0246034-82
8 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2010.05.20 수리 (Accepted) 1-1-2010-0323246-94
9 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2010.05.28 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2010-0342149-53
10 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2010.05.28 수리 (Accepted) 1-1-2010-0342140-43
11 등록결정서
Decision to grant
2010.08.03 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2010-0336183-56
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2011.12.15 수리 (Accepted) 4-1-2011-5252006-10
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2013.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2013-5062749-37
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2013.06.24 수리 (Accepted) 4-1-2013-5088566-87
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.09.25 수리 (Accepted) 4-1-2014-5114224-78
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번호 청구항
1 1
간-카르복실에스터라제 1 단백질과 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 간암진단 조성물
2 2
제1항에 있어서, 상기 항체는 폴리클로날 또는 모노클로날 항체, 간-카르복실에스터라제 1 단백질의 결합 도메인을 갖는 폴리펩타이드에서 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물
3 3
제1항에 있어서, 간-카르복실에스터라제 1 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하고, 상기 항체에 혈액의 혈청 또는 혈장을 혼합하여, 정상 대조군과 비교하여 간-카르복실에스터라제 1 단백질의 발현량의 증가를 검출하는 것을 특징으로 하는 조성물
4 4
항체와 혈장 시료의 혼합으로부터 간-카르복실에스터라제 1의 존재를 확인하는 제1 단계와, 그리고 자석비드-항체면역침강법, 항체-면역블랏팅, ELISA, 질량분석기기의 적어도 하나의 정량 분석에 의하여 간-카르복실에스터라제 1 단백질의 발현량의 변화를 측정하는 제 2단계를 포함하는 간-카르복실에스터라제 1의 검출방법
5 5
제4항에 있어서, 상기 제1 단계가 1) 혈액은 채취한 즉시 디포타시움 에틸렌디아민 테트라아세트산이 포함된 튜브에 30분간 상온에 방치한 후 2,400 xg에서 15분 동안 원심분리하여, 상층액 혈장을 수득하고, 2) 항-간-카르복실에스터라제 1 항체 400 ug과 자석비드 10 mg을 결합시킨 후, 그중 50 ug을 취하여 정상인과 간암환자 혈장 8 mg과 함께 1mL 튜브에서 2시간 동안 면역침강시킨 후 간-카르복실에스터라제 1 단백질을 분리하고, 3) 상기 2) 단계에서 분리한 정상인과 간암환자 시료액은 용해완충용액에서 단백질 변형시킨 후, 1차원 전기영동으로 분리하고, 4) 62 kDa 위치의 겔 밴드를 잘라내어 트립신 절단을 통하여 단백질을 펩티드 형태로 잘라내고, 5) 고감도 나노액체크로마토그래피를 사용하여 간-카르복실에스터라제 1 단백질을 확인하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제4항에 있어서, 상기 제2 단계가 1) 간-카르복실에스터라제 1은 2차 형광전기영동 및 면역블랏팅 결과로부터 간암환자의 간암조직에서 정상조직보다 월등히 감소된다는 것을 확인하고, 2) 혈장을 수득한 후 면역침강시켜 간-카르복실에스터라제 1 용액을 얻고, 3) 면역블랏팅으로 항-간-카르복실에스터라제 1 항체를 이용하여 간-카르복실에스터라제 1의 신호를 확인하고, 4) 정상 혈장에서보다 간암 혈장에서 간-카르복실에스터라제 1의 신호가 높음을 확인하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
7 7
제4항에 있어서, 항체-면역블랏팅에 의한 간-카르복실에스터라제 1 단백질의 발현량이 간암 혈장에서 정상 혈장보다 높은 것을 특징으로 하는 방법
8 8
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1 CN102027127 CN 중국 DOCDBFAMILY
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