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바이오 에탄올 생산 향상용 글리세롤 생산 유전자 결손 변이체 및 그 균주를 이용한 에탄올 생성방법

  • 기술번호 : KST2015132096
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 글리세롤을 발효원으로 이용하도록 조작되어진 사카로마이세스 세레비지애 (Saccharomyces cerevisiae)의 글리세롤 생산 유전자의 결손을 통하여 부산물인 글리세롤 생산을 저해시킴으써 주산물인 바이오 에탄올 생산능이 향상된 형질전환체 및 그 형질전환체를 이용한 에탄올 생산방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 사카로마이세스 세레비지애 (Saccharomyces cerevisiae)가 생산하는 글리세롤의 합성 경로인 글리세롤-3-포스페이트 디히드로게나제 2(glycerol dehydrogenase)와 효모 글리세롤 채널 Fps1p 를 인코딩하는 FPS1의 유전자를 결손 시켜 글리세롤의 생산량이 줄어들며 상대적으로 에탄올 생산능이 향상되어진 효모 형질 전환체 및 이들을 이용한 에탄올 생산 증대 방법에 대한 것이다.
Int. CL C12N 1/19 (2006.01) C12N 15/53 (2006.01) C12P 7/06 (2006.01) C12R 1/865 (2006.01)
CPC C12N 15/81(2013.01)C12N 15/81(2013.01)C12N 15/81(2013.01)C12N 15/81(2013.01)
출원번호/일자 1020100035853 (2010.04.19)
출원인 고려대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2011-0116438 (2011.10.26) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항 심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2010.04.19)
심사청구항수 10

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 고려대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 한성옥 대한민국 서울특별시 성북구
2 유경옥 대한민국 서울특별시 강서구
3 김승욱 대한민국 서울특별시 노원구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2010.04.19 수리 (Accepted) 1-1-2010-0247967-22
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2010.08.12 수리 (Accepted) 4-1-2010-5149278-93
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2011.05.26 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2011.06.29 수리 (Accepted) 9-1-2011-0055992-59
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2011.10.14 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0591505-69
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2011.12.09 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2011-0979440-32
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2011.12.09 수리 (Accepted) 1-1-2011-0979442-23
8 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)
2012.03.02 수리 (Accepted) 1-1-2012-0174305-18
9 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2012.05.07 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0267583-88
10 [법정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Extension of Legal Period] Request for Extension of Period (Reduction, Expiry Reconsideration)
2012.06.05 수리 (Accepted) 7-1-2012-0027558-22
11 명세서 등 보정서(심사전치)
Amendment to Description, etc(Reexamination)
2012.07.06 반려 (Return) 7-1-2012-0032790-26
12 심사관의견요청서
Request for Opinion of Examiner
2012.08.27 수리 (Accepted) 7-8-2012-0028308-12
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.02.11 수리 (Accepted) 4-1-2014-5018243-16
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.04.22 수리 (Accepted) 4-1-2014-5049934-62
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.10.10 수리 (Accepted) 4-1-2019-5210941-09
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
글리세롤-3-포스페이트 디히드로게나제2 (glycerol-3-phosphate dehydrogenase2)와 효모 글리세롤 채널 FPS1을 인코딩하는 FPS1 (glycerol facilitator channel)의 유전자가 결손된 형질전환체
2 2
제 1항에 있어서, 상기 글리세롤-3-포스페이트 디히드로게나제2 (glycerol-3-phosphate dehydrogenase2)는 서열번호 1에 기재된 아미노산 서열을 가지는 형질전환체
3 3
제 1항에 있어서, 상기 글리세롤-3-포스페이트 디히드로게나제2 (glycerol-3-phosphate dehydrogenase2)는 서열번호 2에 기재된 염기 서열을 가지는 형질전환체
4 4
제 1항에 있어서, 상기 효모 글리세롤 채널 FPS1는 서열번호 3에 기재된 아미노산 서열을 가지는 형질전환체
5 5
제 1항에 있어서, 상기 효모 글리세롤 채널 FPS1는 서열번호 4에 기재된 염기서열을 가지는 형질전환체
6 6
제 1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 형질전환체는 효모인 형질전환체
7 7
제 6항에 있어서, 상기 효모는 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)인 형질전환체
8 8
a) 효모 글리세롤 채널 FPS1의 시작 코돈에서부터 40머까지의 유전자를 포함한 포워드 프라이머 및 효모 글리세롤 채널 FPS1의 1971에서 스탑 코돈까지의 서열이 포함된 리버스 프라이머로 도 7a의 개열지도를 가지는 pPICZ 벡터 디엔에이를 주형으로 하여 PCR반응을 수행하여 Fps1 유전자의 시작 코돈과 스탑 코돈이 포함된 PCR 산물을 얻는 단계;b) 글리세롤-3-포스페이트 디히드로게나제2 (glycerol-3-phosphate dehydrogenase2)의 시작 코돈에서부터 40머까지의 유전자를 포함한 포워드 프라이머 및 글리세롤-3-포스페이트 디히드로게나제2 (glycerol-3-phosphate dehydrogenase2)의 1324에서 스탑 코돈까지의 서열이 포함된 리버스 프라이머로 도 7b의 개열지도를 가지는 pET28a 벡터 디엔에이를 주형으로 한 PCR반응을 통하여 PCR 산물을 얻는 단계; 및 c) 상기 각각의 PCR 산물을 효모에 상동 재조합(homologous recombination) 하는 단계를 포함하는 글리세롤-3-포스페이트 디히드로게나제2 (glycerol-3-phosphate dehydrogenase2)와 효모 글리세롤 채널 FPS1을 인코딩하는 FPS1 (glycerol facilitator channel) 유전자가 결손된 형질전환체 제조방법
9 9
제 8항에 있어서, 상기 효모 글리세롤 채널 FPS1의 시작 코돈에서부터 40머까지의 유전자를 포함한 포워드 프라이머 및 효모 글리세롤 채널 FPS1의 스탑 코돈이 포함된 리버스 프라이머는 각각 서열번호 5 및 서열번호 6에 기재된 프라이머인 글리세롤-3-포스페이트 디히드로게나제2 (glycerol-3-phosphate dehydrogenase2)와 효모 글리세롤 채널 FPS1을 인코딩하는 FPS1 (glycerol facilitator channel) 유전자가 결손된 형질전환체 제조방법
10 10
제 8항에 있어서, 상기 글리세롤-3-포스페이트 디히드로게나제2 (glycerol-3-phosphate dehydrogenase2)의 시작 코돈에서부터 40머까지의 유전자를 포함한 포워드 프라이머 및 글리세롤-3-포스페이트 디히드로게나제2 (glycerol-3-phosphate dehydrogenase2)의 스탑 코돈이 포함된 리버스 프라이머는 각각 서열번호 7 및 서열번호 8에 기재된 프라이머인 글리세롤-3-포스페이트 디히드로게나제2 (glycerol-3-phosphate dehydrogenase2)와 효모 글리세롤 채널 FPS1을 인코딩하는 FPS1 (glycerol facilitator channel) 유전자가 결손된 형질전환체 제조방법
11 11
제 1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 형질전환체에 글리세롤 디히드로게나제, 디히드록시아세톤 키나아제, 및 글리세롤 업테이크 프로테인 유전자를 추가로 포함하는 형질전환체
12 12
제 11항에 있어서, 상기 형질전환체는 효모인 형질전환체
13 13
제 11항 또는 제12항에 있어서, 상기 형질전환체는 균주 기탁번호가 KCCM 11071P인 사카로마이시스 세레비지애 YPH499fps1△gpd2△ (pGcyaDak, pGupCas) 형질전환체
14 14
제8항 내지 제10항 중 어느 한 항의 제조방법에 의해 형성된 형질전환체에 c)단계 후에 추가적으로 재조합된 벡터 pGcyaDak, 및 pGupCas를 형질전환시키는 단계를 포함하는 글리세롤을 이용한 에탄올 생산용 형질전환체의 제조방법
15 15
제 14항에 있어서, 상기 형질전환체는 균주 기탁번호가 KCCM11071P인 사카로마이시스 세레비지애 YPH499fps1△gpd2△ (pGcyaDak, pGupCas)인 글리세롤을 이용한 에탄올 생산용 형질전환체의 제조방법
16 16
제 14항에 있어서, 상기 재조합된 벡터 pGcyaDak, 및 pGupCas는 도 4a 및 4b에 기재된 개열지도를 가지는 글리세롤을 이용한 에탄올 생산용 형질전환체의 제조방법
17 17
글리세롤을 기질로 하여 제11항 또는 제12항의 형질전환체를 배양하는 단계를 포함하는 글리세롤을 이용한 에탄올 생산 방법
18 18
제 11항 또는 제12항의 형질전환체를 포함하는 에탄올 생성용 조성물
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 KR101259956 KR 대한민국 FAMILY
2 KR101262999 KR 대한민국 FAMILY
3 US08772000 US 미국 FAMILY
4 US20130109070 US 미국 FAMILY
5 WO2011132890 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY
6 WO2011132890 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY
7 WO2011132890 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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1 한국환경기술진흥원 / 농림기술관리센터 고려대학교 산학협력단 / 고려대학교 산학협력단 차세대핵심환경기술개발사업 / 농림기술개발연구 폐글리세롤 기반 바이오에탄올의 친환경적 전환기술 개발 / [3세부] 다양한 바이오매스 활용을 위한 고효율/저비용 전처리 및 당화공정 시스템 개발