| 1 |
1
원하는 폴리펩타이드를 코딩하는 이종 핵산에 조작될 수 있게 연결된 서열번호 1(HpaII 프로모터), 서열번호 2(amyR2 프로모터) 및 서열번호 3(BLMA 프로모터)에 기재된 유전자 서열을 가지는 프로모터 중 두 개의 프로모터를 5‘에서 3’방향으로 연속적으로 배열한 프로모터를 포함하는 재조합 핵산 구축물
|
| 2 |
2
제 1항에 있어서, 상기 프로모터는 바실러스에서 작동하는 재조합 핵산 구축물
|
| 3 |
3
제 1항에 있어서, 상기 프로모터는 대장균에서 작동하는 재조합 핵산 구축물
|
| 4 |
4
제 1항에 있어서, 상기 이중 프로모터는 서열번호 1(HpaII 프로모터), 서열번호 2(amyR2 프로모터) 또는 서열번호 3(BLMA 프로모터) 프로모터 성분을 개별적으로 사용하였을 때보다 원하는 폴리펩타이드를 더 다량으로 발현시키는 재조합 핵산 구축물
|
| 5 |
5
제 1항에 있어서, 상기 이종 핵산이 폴리펩타이드를 코딩하는 재조합 핵산 구축물
|
| 6 |
6
제 5항에 있어서, 상기 폴리펩타이드는 a) 탄수화물의 생합성 또는 대사에 관여하는 단백질;b) 지질 및 지방산의 생합성 또는 대사에 관여하는 단백질; 및c) 단백질 및 펩타이드의 생합성 또는 대사에 관여하는 단백질로 구성된 군으로부터 선택된 폴리펩타이드인 재조합 핵산 구축물
|
| 7 |
7
제 5항 또는 제 6항에 있어서, 상기 폴리펩타이드는 4-알파-글루카노트랜스퍼레이즈, 브랜칭 효소, 말토제닉 아밀레이즈 (EC 3
|
| 8 |
8
원하는 폴리펩타이드를 코딩하는 이종 핵산에 조작될 수 있게 연결된 원하는 폴리펩타이드를 코딩하는 이종 핵산에 조작될 수 있게 연결된 서열번호 1(HpaII 프로모터), 서열번호 2(amyR2 프로모터) 및 서열번호 3(BLMA 프로모터)에 기재된 유전자 서열을 가지는 프로모터 중 두 개의 프로모터를 5‘에서 3’방향으로 연속적으로 배열한 프로모터를 포함하는 재조합 핵산 구축물 및 선택적 표지 유전자를 포함하는 발현 벡터
|
| 9 |
9
제 8 항에 있어서, 상기 선택적 표지 유전자가 앰피실린 저항성 유전자 및 가나마이신 저항성 유전자로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 유전자인 발현 벡터
|
| 10 |
10
제 8 항에 있어서, 상기 벡터는 바실러스에서 작용하는 복제 서열의 기원을 추가로 포함하는 발현 벡터
|
| 11 |
11
제 8 항에 있어서, 상기 벡터는 대장균(E
|
| 12 |
12
제 8항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 벡터는 도 1b 또는 1c의 개열지도를 가지는 발현 벡터
|
| 13 |
13
제 8항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 벡터는 4b의 개열지도를 가지는 발현 벡터
|
| 14 |
14
원하는 폴리펩타이드가 발현될 수 있는 조건하에, 원하는 폴리펩타이드를 코딩하는 이종 핵산에 조작될 수 있게 연결된 서열번호 1(HpaII 프로모터), 서열번호 2(amyR2 프로모터) 및 서열번호 3(BLMA 프로모터)에 기재된 유전자 서열을 가지는 프로모터 중 두 개의 프로모터를 5‘에서 3’방향으로 연속적으로 배열한 프로모터를 포함하는 재조합 발현 카세트를 포함하는 박테리아 세포를 적당한 배지에서 배양함을 포함하는 원하는 폴리펩타이드를 제조하는 방법
|
| 15 |
15
제 14 항에 있어서, 상기 박테리아 세포가 바실러스인 원하는 폴리펩타이드를 제조하는 방법
|
| 16 |
16
제 14 항에 있어서, 상기 박테리아 세포를 가나마이신을 포함하는 배지에서 배양하는 원하는 폴리펩타이드를 제조하는 방법
|
| 17 |
17
제 14항에 있어서, 상기 폴리펩타이드는 a) 탄수화물의 생합성 또는 대사에 관여하는 단백질;b) 지질 및 지방산의 생합성 또는 대사에 관여하는 단백질; 및c) 단백질 및 펩타이드의 생합성 또는 대사에 관여하는 단백질로 구성된 군으로부터 선택된 폴리펩타이드인 원하는 폴리펩타이드를 제조하는 방법
|
| 18 |
18
제 14항 또는 제 17항에 있어서, 상기 폴리펩타이드는 4-알파-글루카노트랜스퍼레이즈, 브랜칭 효소, 말토제닉 아밀레이즈 (EC 3
|
| 19 |
19
제 14항에 있어서, 상기 방법은 배양 후 원하는 폴리펩타이드 생성물을 배양액 또는 균체 내에서 생산하는 단계를 더욱 포함하는 원하는 폴리펩타이드를 제조하는 방법
|
