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(1)미강유 유래 비누분(soapstock)으로부터 애시드 오일(acid oil)을 제조하는 단계; 및(2)상기 애시드 오일 및 탄소수 1 내지 4의 알코올을 기질로 하며, 상기 기질과 노보자임 435(Novozym 435), 리포자임 RM IM(Lipozyme RM IM) 및 리포자임 TL IM(Lipozyme TL IM)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 효소를 반응시켜 에스테르화 반응을 시키는 단계를 포함하는 바이오디젤 제조 방법으로,상기 (2)단계의 효소로 노보자임 435를 사용하는 경우, 에스테르화 반응 조건은 애시드 오일 및 탄소수 1 내지 4의 알코올의 몰비는 1:4 내지 1:6이고, 반응 온도는 40 내지 60℃이고, 상기 기질 총 중량에 대하여 노보자임 435가 10 내지 15 중량%로 사용되고,상기 (2)단계의 효소로 리포자임 RM IM을 사용하는 경우, 에스테르화 반응 조건은 애시드 오일 및 탄소수 1 내지 4의 알코올의 몰비는 1:2 내지 1:6이고, 반응 온도는 10 내지 40℃이고, 상기 기질 총 중량에 대하여 리포자임 RM IM이 5 내지 15 중량%로 사용되고,상기 (2)단계의 효소로 리포자임 TL IM을 사용하는 경우, 에스테르화 반응 조건은 애시드 오일 및 탄소수 1 내지 4의 알코올의 몰비는 1:4 내지 1:6이고, 반응 온도는 10 내지 30℃이고, 상기 기질 총 중량에 대하여 리포자임 TL IM이 10 내지 15 중량%로 사용되는 것을 특징으로 하는 바이오디젤 제조방법
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청구항 1에 있어서, 상기 애시드 오일은 미강유 유래 비누분, 이소프로판올, 헥산, 황산 및 물을 반응시켜 제조되는 것을 특징으로 하는 바이오디젤 제조 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 (2)단계에서 효소로 노보자임 435(Novozym 435) 및 리포자임 RM IM(Lipozyme RM IM)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 사용하여 1차 에스테르화 반응을 시키고, 상기 효소를 여과하여 제거하는 단계 및 효소로 리포자임 TL IM(Lipozyme TL IM)을 첨가하여 2차 에스테르화 반응을 시키는 것을 특징으로 하는 바이오디젤 제조 방법
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청구항 6에 있어서, 상기 1차 에스테르화 반응은 5 내지 60분 동안 진행되는 것을 특징으로 하는 바이오디젤 제조 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 (2)단계에서 기질 및 효소를 연속식 반응기(packed-bed reactor, PBR)에서 반응시켜 에스테르화 반응을 시키는 것을 특징으로 하는 바이오디젤 제조 방법
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청구항 8에 있어서, 상기 (2)단계의 연속식 반응기에서 에스테르화 반응 조건은 애시드 오일 및 탄소수 1 내지 4의 알코올의 몰비는 1:3 내지 1:6이고, 반응온도는 10 내지 35℃이고, 상기 기질 총 중량에 대하여 수분이 1 내지 6 중량%로 사용되는 것을 특징으로 하는 바이오디젤 제조 방법
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청구항 8에 있어서, 상기 (2)단계에서 생성되는 글리세롤을 제거하는 단계를 추가하는 것을 특징으로 하는 바이오디젤 제조 방법
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청구항 8에 있어서, 상기 효소는 리포자임 TL IM 인 것을 특징으로 하는 바이오디젤 제조 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 탄소수 1 내지 4의 알코올은 에탄올인 것을 특징으로 하는 바이오디젤 제조 방법
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