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Lin28 단백질과 pre-let-7 miRNA의 결합을 정량분석하는 방법 및 상기 방법을 이용한 결합을 저해하는 억제제의 스크리닝 방법

  • 기술번호 : KST2015140503
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 형광프로브를 이용한 Lin28 단백질과 pre-let-7의 miRNA에 결합을 정량적으로 분석하는 방법 및 상기 분석방법을 이용한 Lin28 단백질과 pre-let-7 miRNA의 결합 억제제를 스크리닝 하는 방법에 관한 것이다. 구체적으로 a) pre-let -7 miRNA의 5‘-말단에 소광(quencher)물질이 부착되고 3’-말단에 형광물질이 부착된 형광 프로브를 제조하는 단계; b) Lin28 단백질과 a) 단계의 형광프로브를 반응시키는 단계; c) 상기 반응물의 형광값을 측정하는 단계; 를 포함하는 Lin28 단백질과 pre-let-7 miRNA의 결합을 정량 분석하는 방법에 관한 것이다. 또한 본 분석방법은 이들의 결합을 저해하는 억제제를 대량으로 스크리닝하는 데 유용하게 사용될 수 있다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/113 (2010.01) G01N 33/52 (2006.01)
CPC C12Q 1/6816(2013.01) C12Q 1/6816(2013.01) C12Q 1/6816(2013.01) C12Q 1/6816(2013.01)
출원번호/일자 1020130022795 (2013.03.04)
출원인 한국화학연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2014-0108913 (2014.09.15) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호 1020140131459;1020140131535;
심사청구여부/일자 Y (2013.03.04)
심사청구항수 8

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국화학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김광록 대한민국 대전광역시 유성구
2 김채원 대한민국 울산광역시 남구
3 최상운 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 플러스 대한민국 대전광역시 서구 한밭대로 ***번지 (둔산동, 사학연금회관) **층

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2013.03.04 수리 (Accepted) 1-1-2013-0188082-27
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2014.07.08 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2014.07.18 수리 (Accepted) 9-1-2014-0060461-59
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2014.07.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0522812-89
5 [분할출원]특허출원서
[Divisional Application] Patent Application		 2014.09.30 수리 (Accepted) 1-1-2014-0935359-25
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2014.09.30 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2014-0932864-56
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2014.09.30 수리 (Accepted) 1-1-2014-0932880-87
8 [분할출원]특허출원서
[Divisional Application] Patent Application		 2014.09.30 수리 (Accepted) 1-1-2014-0935052-14
9 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2014.11.13 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0776267-39
10 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)		 2015.01.08 수리 (Accepted) 1-1-2015-5000924-11
11 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2015.01.12 수리 (Accepted) 1-1-2015-0027100-55
12 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)		 2015.02.04 수리 (Accepted) 1-1-2015-5005368-07
13 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2015.02.11 수리 (Accepted) 1-1-2015-0143187-04
14 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2015.03.11 수리 (Accepted) 1-1-2015-0238946-46
15 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2015.04.09 수리 (Accepted) 1-1-2015-0346375-31
16 지정기간연장 관련 안내서
Notification for Extension of Designated Period		 2015.04.17 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2015-0071517-49
17 거절결정서
Decision to Refuse a Patent		 2015.07.08 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0457194-91
18 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2017.09.14 수리 (Accepted) 4-1-2017-5149265-52
19 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2017.09.14 수리 (Accepted) 4-1-2017-5149242-13
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
a) pre-let-7 miRNA의 5‘-말단에 소광(quencher)물질이 부착되고 3’-말단에 형광물질이 부착된 형광 프로브를 제조하는 단계; b) Lin28 단백질과 a) 단계의 형광프로브를 반응시키는 단계; c) 상기 반응물의 형광값을 측정하는 단계; 를 포함하는 Lin28 단백질과 pre-let-7 miRNA의 결합을 정량 분석하는 방법
2 2
제1항에 있어서, a) 단계의 소광물질은 Dabsyl (dimethylaminoazobenzenesulfonic acid)인 것을 특징으로 하는 방법
3 3
제1항에 있어서, a) 단계의 형광물질은 플루오레신아미다이트(FAM), 플루오레신카복실산(FCA), 플루오레신이소티오시아네이트(FITC), 플루오레신 티오우레아(FTH), 7-아세톡시쿠마린-3-일, 플루오레신-5-일, 플루오레신-6-일, 2',7'-디클로로플루오레신-5-일, 2',7'-디클로로플루오레신-6-일로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제1항에 있어서, a) 단계의 pre-let-7 miRNA는 서열번호 1의 염기서열을 가지는 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제1항에 있어서, a) 단계의 pre-let-7 miRNA는 서열번호 2의 염기서열을 가지는 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제1항에 있어서, a) 단계의 Lin28 단백질은 서열번호 3의 아미노산 서열을 가지는 것을 특징으로 하는 방법
7 7
제1항에 있어서, 상기 단계 a)에서 Lin28 단백질과 pre-let-7 miRNA는 2:1 내지 5:1의 몰비로 첨가하는 것을 특징으로 하는 방법
8 8
제1항에 있어서, 상기 단계 b)에서 Lin28 단백질과 pre-let-7 miRNA의 반응은 20 내지 40℃에서 반응시키는 것을 특징으로 하는 방법
9 9
a) pre-let-7 miRNA의 5‘-말단에 소광(quencher)물질이 부착되고 3’-말단에 형광물질이 부착된 형광 프로브와 Lin28단백질의 반응용액에 억제제 후보물질을 첨가하여 반응시키는 단계; b) 상기 반응용액의 형광도를 측정하여 억제제 후보물질의 첨가여부에 따른 형광도의 변화를 관찰하는 단계; 및 c) 억제제 후보물질의 첨가에 의해 Lin28 단백질과 pre-let-7 miRNA의 반응물의 형광도가 감소된 경우에 상기 후보물질을 억제제로 판정하는 단계;를 포함하는 Lin28 단백질과 pre-let-7 miRNA의 결합을 저해하는 억제제를 스크리닝하는 방법
10 10
제9항에 있어서, a) 단계의 소광물질은 Dabsyl (dimethylaminoazobenzenesulfonic acid)인 것을 특징으로 하는 방법
11 11
제9항에 있어서, a) 단계의 형광물질은 플루오레신아미다이트(FAM), 플루오레신카복실산(FCA), 플루오레신이소티오시아네이트(FITC), 플루오레신 티오우레아(FTH), 7-아세톡시쿠마린-3-일, 플루오레신-5-일, 플루오레신-6-일, 2',7'-디클로로플루오레신-5-일, 2',7'-디클로로플루오레신-6-일로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
12 12
제9항에 있어서, a) 단계의 pre-let-7 miRNA는 서열번호 1의 염기서열을 가지는 것을 특징으로 하는 방법
13 13
제9항에 있어서, a) 단계의 pre-let-7 miRNA는 서열번호 2의 염기서열을 가지는 것을 특징으로 하는 방법
14 14
제9항에 있어서, 상기 a) 단계에서 Lin28단백질과 pre-let-7 miRNA는 2:1내지 5:1의 몰비로 첨가하는 것을 특징으로 하는 방법
15 15
제9항에 있어서, 상기 a) 단계의 반응은 20 내지 40℃의 온도에서 반응시키는 것을 특징으로 하는 방법
16 16
Lin 28 단백질과 pre-let-7 miRNA의 결합 억제제를 유효성분으로 함유하는 암 치료용 약학적 조성물
17 17
제16항에 있어서, 상기 억제제는 Lin 28 단백질과 pre-let-7 miRNA의 결합을 억제하여 pre-let-7 miRNA의 성숙을 촉진하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물
18 18
제16항에 있어서, 상기 암은 간암, 난소암, 만선 골수암, 배아 세포 종양, 월름 중양(Wilm's tumor, 유아 신장암), 폐암인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물
19 19
Lin 28 단백질과 pre-let-7 miRNA의 결합 억제제를 유효성분으로 함유하는 줄기세포 분화 유도용 조성물
20 20
제19항에 있어서, 상기 억제제는 Lin 28 단백질과 pre-let-7 miRNA의 결합을 억제하여 pre-let-7 miRNA의 성숙을 촉진하는 것을 특징으로 하는 조성물
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1 지식경제부 한국화학연구원 지식경제기술혁신사업 Drug Repositioning 기술을 이용한 신약개발 활용시스템 구축